本文選題：動(dòng)物源性流感病毒　切入點(diǎn)：豬　出處：《華南農(nóng)業(yè)大學(xué)》2016年博士論文

【摘要】：A型流感病毒宿主范圍廣泛,如:人、豬、禽、犬等。由于豬呼吸道上皮細(xì)胞的受體分布特性,豬可以被禽類和人類流感病毒感染,而豬流感病毒也可感染人。因此,豬被認(rèn)為是人、豬、禽流感病毒的天然“混合器”,豬流感病毒的常規(guī)監(jiān)測(cè)具有重要的公共衛(wèi)生安全學(xué)意義。目前抵抗流感病毒侵襲的最好方法是進(jìn)行疫苗免疫。但由于流感病毒基因組特征,病毒基因極不穩(wěn)定,進(jìn)化頻繁。疫苗形式及免疫策略有限,這使有效預(yù)防流感病毒的傳染和傳播變得困難。為評(píng)估廣東地區(qū)豬群、執(zhí)業(yè)人群感染多種亞型流感病毒的風(fēng)險(xiǎn),從2013年3月至2014年3月,分別從廣東省6個(gè)不同城市的生豬養(yǎng)殖場(chǎng)和活禽市場(chǎng)中分別采集豬群血清樣本,共6510份。其中,生豬養(yǎng)殖場(chǎng)樣本4910份,活禽市場(chǎng)樣本1600份。通過(guò)血凝抑制(HI)檢測(cè)血清中抗人類、豬和禽流感病毒抗體的水平,同時(shí)分析各采樣城市地理位置、生長(zhǎng)階段(或活禽市場(chǎng)中存留時(shí)間)、季節(jié)等因素對(duì)血清陽(yáng)性率影響。通過(guò)單因素分析法,計(jì)算各因素對(duì)豬群感染不同流感病毒風(fēng)險(xiǎn)的影響。結(jié)果顯示,影響豬群不同亞型流感病毒感染的主要因素為生長(zhǎng)階段(或活禽市場(chǎng)內(nèi)存留時(shí)間)和季節(jié)因素。在活禽市場(chǎng)中存留時(shí)間較長(zhǎng)的豬只,感染禽流感的風(fēng)險(xiǎn)顯著高于養(yǎng)殖場(chǎng)的豬。廣東各地豬群在秋季感染流感病毒風(fēng)險(xiǎn)較其他季節(jié)高。此外與禽類有密切接觸是豬群感染禽流感(及類禽豬流感)的主要風(fēng)險(xiǎn)因素。由2013年12月起至2014年1月,在廣東省各地選取符合條件的豬場(chǎng)工人,禽場(chǎng)工人,活禽市場(chǎng)工作人員以及寵物醫(yī)院獸醫(yī)進(jìn)行血清樣本采集,同時(shí)采集無(wú)長(zhǎng)期動(dòng)物接觸史的志愿者血清作為對(duì)照。利用HI試驗(yàn)檢測(cè)志愿者血清中抗人類、豬、禽和犬流感病毒抗體的水平。運(yùn)用單因素分析方法計(jì)算不同因素(如,年齡、性別、工作種類以及動(dòng)物接觸情況等)對(duì)人類血清抗體陽(yáng)性率的影響。通過(guò)分析發(fā)現(xiàn)豬場(chǎng)工人感染經(jīng)典豬流感和歐亞類禽豬流感的風(fēng)險(xiǎn)顯著高于對(duì)照組。而禽場(chǎng)工人感染禽流感病毒AV/H7和AV/H9的風(fēng)險(xiǎn)則顯著高于非禽類接觸人群�；钋菔袌�(chǎng)工作人員感染AV/H5、AV/H7和AV/H9的風(fēng)險(xiǎn)高于其他執(zhí)業(yè)人群�；钋菔袌�(chǎng)工作人員感染豬流感病毒的風(fēng)險(xiǎn)也高于對(duì)照組人群。該結(jié)果提示活禽市場(chǎng)工作人員同時(shí)面臨兩種不同宿主的流感病毒感染風(fēng)險(xiǎn)。Pichinde病毒(PICV)屬于沙粒病毒科,沙粒病毒屬成員,是雙義編碼RNA病毒。在感染初期主要攻擊巨噬細(xì)胞和樹(shù)突狀細(xì)胞,并引起高水平的T細(xì)胞免疫反應(yīng)。本研究將流感病毒PR8毒株的HA和NP基因同時(shí)嵌合到PICV載體上,構(gòu)建成重組表達(dá)載體rP18tri-HA/NP。重組PICV嵌合表達(dá)流感的HA和NP蛋白。通過(guò)免疫小鼠,發(fā)現(xiàn)載體疫苗能有效誘導(dǎo)小鼠機(jī)體產(chǎn)生HA蛋白特異性中和抗體和NP蛋白特異性殺傷性T細(xì)胞免疫反應(yīng)(CTLs)。利用MHC四聚體染色法(MHC Tetramer stain)檢測(cè)特異性CTLs數(shù)量,結(jié)果顯示首免后,小鼠CTL反應(yīng)水平顯著提高,并在二免后,該類型細(xì)胞數(shù)量仍能維持較高水平。不同分支或亞型流感毒株進(jìn)行攻毒保護(hù)試驗(yàn),結(jié)果顯示免疫小鼠均能獲得較好的交叉保護(hù)作用。評(píng)價(jià)機(jī)體抗載體免疫反應(yīng)對(duì)疫苗免疫效果的影響,結(jié)果顯示抗載體免疫反應(yīng)會(huì)抑制疫苗誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生CTL免疫反應(yīng)。評(píng)價(jià)嵌合不同亞型流感HA基因的疫苗交替免疫效果,經(jīng)交替免疫嵌合H1和H3亞型流感病毒HA蛋白的載體疫苗后,小鼠能抵抗非免疫原流感病毒的侵襲。綜上所述,該新型PICV載體疫苗能夠有效地誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生體液和細(xì)胞免疫反應(yīng)。為廣譜流感疫苗的研制奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:A wide variety of influenza A viruses such as humans , pigs , birds , dogs , etc . As a result of the receptor distribution characteristics of porcine respiratory epithelial cells , pigs can be infected by avian and human influenza viruses , and swine influenza viruses can also infect humans . In order to assess the risk of influenza virus infection among pigs in Guangdong Province from March 2013 to March 2014 , it was found that the risk of influenza virus infection in pigs was significantly higher than that in control group .

【學(xué)位授予單位】：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S858.28;R511.7

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本文編號(hào)：1706149