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MRSA對巨噬細(xì)胞系RAW264.7自噬的影響

發(fā)布時間:2018-02-27 05:15

  本文關(guān)鍵詞: 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌 巨噬細(xì)胞 自噬 出處:《新醫(yī)學(xué)》2016年05期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的探討耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)感染對于巨噬細(xì)胞自噬的影響。方法以小鼠單核巨噬細(xì)胞系RAW264.7為研究對象,以革蘭陽性菌MRSA感染3 h組作為實(shí)驗(yàn)組,設(shè)立空白對照組(對照組),另設(shè)MRSA感染0、30、60、120、150、180 min組。以MRSA感染細(xì)胞后,熒光定量PCR檢測自噬相關(guān)基因5(ATG5)、ATG7、ATG12的表達(dá)情況,蛋白免疫印跡法檢測自噬相關(guān)蛋白Beclin1及微管相關(guān)蛋白輕鏈3(LC3)的表達(dá)情況。結(jié)果感染MRSA 3 h后,實(shí)驗(yàn)組RAW264.7細(xì)胞中ATG5、ATG7、ATG12的mRNA表達(dá)水平均高于對照組(P均0.01),LC3蛋白相對表達(dá)量也比對照組增加(P0.01),2組間Beclin1蛋白相對表達(dá)量比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。ATG7、ATG12 mRNA和LC3及Beclin1蛋白相對表達(dá)量均在感染MRSA 180 min組最高,ATG5 mRNA在感染MRSA 150 min組最高。結(jié)論 MRSA可以誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞發(fā)生自噬,自噬基因激活存在先后順序,自噬可能為巨噬細(xì)胞吞噬胞外菌MRSA的另一種免疫滅活形式。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of methicillin-resistant staphylococcus aureus (MRSA) infection on macrophage autophagy. Methods Murine mononuclear macrophage cell line RAW264.7 was used as the study object and Gram-positive bacteria MRSA as experimental group for 3 h. A blank control group (control group) was established. After MRSA infected cells were infected with MRSA, the expression of ATG7 / ATG12 was detected by fluorescence quantitative PCR. The expression of autophagy associated protein (Beclin1) and microtubule-associated protein light chain (3LC-3) were detected by Western blot. The mRNA expression of ATG5, ATG7, ATG12 in RAW264.7 cells in experimental group was higher than that in control group (P = 0.01). There was also no significant difference in the relative expression of Beclin1 protein between the two groups. There was no significant difference in the relative expression of Beclin1 protein, LC3 and Beclin1 between the two groups. The highest amount of ATG5 mRNA was found in the infected MRSA 180 min group and the highest in the MRSA 150 min group. Conclusion MRSA can induce autophagy in macrophages. Autophagy gene activation exists in sequence, autophagy may be another form of immune inactivation of macrophage phagocytic extracellular bacteria MRSA.
【作者單位】: 中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院呼吸內(nèi)科內(nèi)科ICU;
【基金】:國家自然科學(xué)基金面上項目(81170004)
【分類號】:R515

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本文編號:1541311

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