本文關鍵詞： 發(fā)熱伴血小板減少綜合征 實時熒光定量PCR 酶聯免疫吸附試驗 三間分布特征　出處：《山東大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：[研究背景]近幾年來,我國某些省份相繼出現并報告了一些以發(fā)熱、血小板減少、腹瀉等臨床表現的感染性病例,部分病情嚴重患者可因多器官功能衰竭而導致死亡。2010年5月經中國疾病預防控制中心的專家實驗,該類疾病患者的血清中存在一種布尼亞病毒科的新病毒,該病毒被命名為發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV),并將該病毒所致疾病命名為發(fā)熱伴血小板減少綜合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS)。目前最常用的SFTS病例的早期診斷兩種方法是實時熒光PCR和酶聯免疫吸附實驗(ELISA),由于兩種方法的實驗原理、檢測目的、臨床意義等方面不盡相同,因此探討兩種方法的差異、研究采樣時間與實驗結果的關系對實際工作有重要的指導意義。另外通過分析SFTS在山東省的流行病學特點,可對本地區(qū)發(fā)熱伴血小板減少綜合征的臨床診斷及防控策略和措施的制定提供可靠的科學依據。[研究目的]1、研究發(fā)熱伴血小板減少綜合征發(fā)病后樣本采集時間與病毒檢出率之間的關系,為確定最佳采樣時間提供依據。2、比較實時熒光PCR法與酶聯免疫吸附實驗(ELISA)在發(fā)熱伴血小板減少綜合征病例檢測中的差異,探討兩種方法在發(fā)熱伴血小板減少綜合征檢測中的應用價值。3、分析山東省發(fā)熱伴血小板減少綜合征的流行病學特征,為山東省發(fā)熱伴血小板減少綜合征的預防和控制提供科學依據。[研究方法]1、采集2013年1月～2015年12月山東省各醫(yī)院疑似SFTS病例血清樣本,記錄發(fā)病時間和采樣時間。用實時熒光定量PCR方法檢測血清中發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒RNA,分析病毒核酸檢出率與病人血清采集時間之間的關系。2、隨機選取95份SFTS急性期病例血清樣本,實時熒光定量PCR方法檢測血清中發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒RNA,用酶聯免疫吸附法分別檢測血清中的IgM、IgG和總抗體,采用Kappa值的計算、卡方檢驗,比較幾種檢測方法的效果。3、收集山東省發(fā)熱伴血小板減少綜合征病例的流行病學資料,采用描述性流行病學方法分析其三間分布特征。[結果]1、共采集2013年1月～2015年12月山東省疑似SFTS病例血清樣本959例,全部進行Real-time PCR檢測,其中陽性標本519份,陽性率54.11%。通過對患者發(fā)病天數與SFTSV核酸檢測陽性關系的統(tǒng)計與分析,發(fā)熱伴血小板減少綜合征患者在發(fā)病第0～19天,血清中均可檢出SFTSV陽性核酸,在發(fā)病3～8天采血檢出的陽性率較高,第7天最高,達64.52%。發(fā)病8天之后采血檢測陽性率逐漸下降,發(fā)病14天后采血檢出陽性率很小。2、經實驗室檢測95份標本,IgM陽性39例,IgG陽性4例,總抗體陽性29例。PCR結果與IgM結果之間的Kappa值為0.286,證明兩種檢驗方法的一致性程度尚好;PCR結果與IgG結果之間的Kappa值小于零,證明兩種檢驗方法結果不一致;PCR結果與總抗體結果之間的Kappa值小于零,證明兩種檢驗方法結果不一致;總抗體結果與IgM結果之間的Kappa值為0.5021,證明兩種檢驗方法中度一致;總抗體結果與IgG結果之間的Kappa值為0.1164,證明兩種檢驗方法的一致性程度較輕。3、山東省2013—2015年SFTS的發(fā)病率,各年、月和地市之間不同,差異有統(tǒng)計學意義;報告病例呈現明顯的季節(jié)性,5～8月報告病例占75.6%,病例以40～79歲年齡組居多,農民為主。40～79歲年齡組,尤其是60歲以上年齡組的人群病死率較高。[結論]1、實時熒光定量PCR方法檢測SFTSV核酸,在患者發(fā)病第3～8天的血液中檢測到病毒核酸的陽性率較高,提示該時間段內采血能提高實時熒光定量PCR檢測陽性率。2、SFTS的早期診斷應首選實時熒光PCR法,ELISA—IgM法可作為輔助手段,隨著病程的延長ELISA—IgM法是更適宜的診斷方法。3、山東省SFTS病例主要發(fā)生在丘陵山區(qū)的中老年人,性別差異無統(tǒng)計學意義。病例呈現明顯的季節(jié)分布特征,不同地區(qū)發(fā)病存在差異。針對重點地區(qū)的重點人群在疾病流行前期開展健康教育和宣傳,是預防疾病發(fā)生的重要防控措施。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R510;R181.3

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