本文關(guān)鍵詞： 瘧原蟲 巨噬細胞遷移抑制因子 轉(zhuǎn)染 趨化　出處：《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院》2015年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：由瘧原蟲感染引起的蟲媒傳染病瘧疾是世界上最嚴重的三大傳染性疾病之一。2013年全球感染瘧疾人數(shù)仍有1.98億,其中死亡人數(shù)58.4萬。瘧疾的防控和治療仍面臨著嚴峻的挑戰(zhàn),而我們對瘧原蟲生物學(xué)特性及其與宿主免疫系統(tǒng)關(guān)系的了解仍很匱乏。瘧原蟲來源的巨噬細胞遷移抑制因子MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor, PMIF)是在瘧原蟲中發(fā)現(xiàn)的與宿主MIF同源的蛋白質(zhì)。MIF是最早發(fā)現(xiàn)的細胞因子,它具有活化巨噬細胞和輔助性T細胞、誘導(dǎo)TNF-α、NO等多種炎癥因子分泌等特點。在瘧原蟲感染之后,宿主MIF和PMIF的水平都顯著上調(diào)。瘧原蟲為何要分泌一種與宿主的細胞因子如此相似的蛋白,PMIF是否在宿主抗瘧疾免疫中發(fā)揮作用是一個值得探究的問題。本研究首先通過雙同源重組的方法構(gòu)建轉(zhuǎn)染載體,并成功獲得了致死性約氏瘧原蟲蟲株P(guān)y17XL的MIF敲除蟲株(PyMIF-KO)及MIF的熒光表達蟲株(PyMIF-GFP)。通過感染Balb/c小鼠的實驗觀察發(fā)現(xiàn),PyMIF敲除之后,瘧原蟲仍能順利完成其紅內(nèi)期生長,并且感染小鼠的蟲血率、生存率和體重變化不受影響。然而PyMIF-KO相比于野生型(WT)感染小鼠更早出現(xiàn)貧血,說明PMIF與瘧疾貧血發(fā)生具有相關(guān)性,同樣在非致死性約氏瘧原蟲Py17XNL MIF-KO感染情況下結(jié)果也類似。對PyMIF-GFP的觀察說明PyMIF在紅細胞感染的各期都有表達,并主要定位于蟲子的胞質(zhì)內(nèi)。我們用細胞因子芯片和ELISA的方法檢測發(fā)現(xiàn)PyMIF敲除之后,宿主血清和全脾細胞培養(yǎng)上清中炎癥因子普遍下調(diào),說明PyMIF對宿主有促炎作用。流式分析顯示,PyMIF敲除之后,感染小鼠脾臟內(nèi)CD11b+Ly6c+細胞顯著下調(diào)。進一步分析得到脾臟內(nèi)CD11b+Ly6c+細胞下調(diào)會顯著降低全脾細胞炎癥因子分泌的結(jié)果。以上結(jié)果表明PyMIF的促炎作用與其促進CD11b+Ly6c+細胞在感染小鼠脾臟內(nèi)聚集相關(guān)。體外實驗證明,PyMIF對CD11b+Ly6c+細胞有趨化作用,且這種趨化作用與細胞表面受體CXCR2和CXCR4以及細胞粘附因子ICAM-1和VLA-4具有相關(guān)性。另外,我們還發(fā)現(xiàn)PyMIF與MmMIF在對CD11b+Ly6c+細胞的趨化性上有協(xié)同性。因此,我們得出結(jié)論：PyMIF在鼠瘧模型中能夠刺激Ly6c+CD11b+在脾臟中聚集從而促進炎癥反應(yīng)。我們推測PyMIF可能以這種方式充當(dāng)一種免疫調(diào)節(jié)的自限因子,通過促進宿主的炎癥反應(yīng)以限制自身過快的增殖,使得宿主處在溫和的感染狀態(tài),以延長自身的存活時間以及增大傳播的幾率。這可能是瘧原蟲長期進化的一種適應(yīng)性的結(jié)果。本論文工作對約氏瘧原蟲來源MIF在宿主抗感染免疫中的功能進行了深入的剖析,也為進一步理解宿主與寄生物之間的關(guān)系提供了線索。
[Abstract]:Malaria is one of the most serious infectious diseases in the world .

【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R531.3

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 ;Serum and ascites levels of macrophage migration inhibitory factor, TNF-α and IL-6 in patients with chronic virus hepatitis B and hepatitis cirrhosis[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2002年04期

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本文編號：1489474