本文關(guān)鍵詞： 結(jié)核性腦膜炎 診斷 IFN-γ T-SPOT.TB　出處：《復(fù)旦大學(xué)》2013年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：[目的]結(jié)核性腦膜炎(Tuberculous meningitis, TBM)的死亡率和致殘率很高,是結(jié)核病中最嚴(yán)重的一種類型,快速有效的診斷和早期治療是減少病死率和致殘率的關(guān)鍵。結(jié)核性腦膜炎的早期、準(zhǔn)確的診斷一直是一個(gè)世界性難題。近年來(lái)發(fā)展起來(lái)T-SPOT. TB檢測(cè)作為一種新型的酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù),為結(jié)核病的診斷提供了新的技術(shù)。由于具備較高的敏感性和特異性,該方法在國(guó)外已成為診斷結(jié)核感染的主要技術(shù),但在結(jié)核性腦膜炎中的應(yīng)用較少。國(guó)內(nèi)外對(duì)外周血T-SPOT. TB診斷結(jié)核性腦膜炎的臨床價(jià)值評(píng)價(jià)不一,本文將對(duì)此進(jìn)一步研究。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外開(kāi)始對(duì)腦脊液(CSF) T-SPOT. TB診斷結(jié)核性腦膜炎的價(jià)值進(jìn)行研究,該診斷試驗(yàn)是檢測(cè)腦脊液中受抗原刺激后分泌IFN-γ特異性T細(xì)胞,但由于腦脊液量及細(xì)胞數(shù)較少,限制了它在臨床診斷中的應(yīng)用。與腦脊液T-SPOT. TB相比,用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(Enzyme Linked Immunosorbent Assay, ELISA)檢測(cè)腦脊液中未受刺激的IFN-γ更為簡(jiǎn)便,快速,且所需腦脊液量較少,可以為結(jié)核性腦膜炎的診斷提供一種新的輔助檢測(cè)手段。目前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)同時(shí)檢測(cè)結(jié)核性腦膜炎患者腦脊液INF-γ及外周血T-SPOT. TB的報(bào)道。本研究將應(yīng)用酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)核性腦膜炎患者外周血受結(jié)核特異性抗原刺激后分泌IFN-γ的特異性T細(xì)胞,同時(shí)用ELISA法檢測(cè)腦脊液中未受刺激的IFN-γ含量,旨在比較兩種診斷試驗(yàn)對(duì)結(jié)核性腦膜炎的臨床診斷價(jià)值及判斷兩種試驗(yàn)聯(lián)合診斷的價(jià)值。 [方法]病例選取2011年3月～2013年3月,復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院傳染科住院病例。收集臨床懷疑為TBM患者的病歷資料,根據(jù)最新診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分,篩選出30例“確診TBM”和“很可能TBM”為病例組(結(jié)核性腦膜炎組),對(duì)照組選取51例非結(jié)核性腦膜炎患者(非結(jié)核性腦膜炎組)。結(jié)核性腦膜炎組和非結(jié)核性腦膜炎組所有患者均留取入院后首次腰穿腦脊液lml,結(jié)核性腦膜炎組抗癆治療4周后,經(jīng)隨訪共有10例病人收集到治療后腦脊液lml。所有腦脊液均在收集后即刻室溫下3000轉(zhuǎn)／分鐘離心10分鐘,取上清-80℃凍存,待進(jìn)行ELISA檢測(cè)腦脊液中未受刺激的IFN-γ含量。入院后2天內(nèi)采集所有患者5ml新鮮抗凝外周血,離心后吸取中間層白細(xì)胞進(jìn)行T-SPOT. TB檢測(cè)。對(duì)結(jié)核性腦膜炎組、非結(jié)核性腦膜炎組及結(jié)核性腦膜炎組抗癆治療4周后的腦脊液常規(guī)、生化、培養(yǎng)、涂片等結(jié)果進(jìn)行記錄并分析。 [結(jié)果] 1臨床資料分析結(jié)果：符合入組標(biāo)準(zhǔn)的TBM患者30例,確診TBM6例,很可能TBM24例,其中男性24例,女性6例,年齡18～79歲,平均為45.10±17.65歲。對(duì)照組為非TBM患者,共51例,男32例,女19例,年齡14～64歲,平均為37.73±15.30歲。結(jié)核性腦膜炎組與非結(jié)核性腦膜炎組相比,結(jié)核性腦膜炎組腦脊液平均壓力、蛋白含量升高,葡萄糖、氯化物含量降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)核性腦膜炎組與非腦膜炎組相比,腦脊液平均壓力、蛋白含量升高,糖及氯化物含量降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)核性腦膜炎組與病毒性腦膜炎、化膿性腦膜炎、隱球菌性腦膜炎組相比,蛋白升高、氯含量降低,但腦脊液平均壓力、白細(xì)胞數(shù)、糖含量均無(wú)差異。結(jié)核性腦膜炎組治療前后比較,腦脊液平均壓力、蛋白含量、白細(xì)胞數(shù)均降低,糖及氯化物含量較治療前升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 2腦脊液中IFN-γ測(cè)定：結(jié)核性腦膜炎組患者入院后首次腰穿共30份腦脊液,經(jīng)EL工SA法檢測(cè),IFN-γ水平為(0~1688.41) pg/ml,含量平均值為350.97±372.94pg/ml；對(duì)照組中IFN-γ水平為(0~954.83)pg/ml,含量平均值為71.30pg/ml。病例組與對(duì)照組比較有明顯差異(P0.05)。30例結(jié)核性腦膜炎患者中共有10例在抗癆4周后再次收集腦脊液行ELISA法檢測(cè),該10例患者治療前腦脊液中IFN-γ水平為(125.18~1688.41)pg/ml,平均值為500.48±504.86pg/ml；治療4周后腦脊液中IFN-γ水平為(11.60~335.92)pg/ml,平均值為103.62±92.57pg/ml,前后比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05).IFN-γ診斷結(jié)核性腦膜炎患者ROC曲線下面積0.853,標(biāo)準(zhǔn)誤0.048,95%可信區(qū)間[0.759,0.946],最佳診斷分界點(diǎn)81.36pg/ml,此時(shí)對(duì)應(yīng)的敏感度83%,特異度88%,約登指數(shù)0.71,陽(yáng)性預(yù)測(cè)值(PPV)81%,陰性預(yù)測(cè)值(NPV)90%。在結(jié)核性腦膜炎組中有5個(gè)假陰性,其中有2個(gè)病人入院前已接受過(guò)抗結(jié)核治療(療程均大于半年),在對(duì)照組中有6個(gè)病人腦脊液中IFN-γ水平大于界值,為假陽(yáng)性病人。若剔除入院前已接受抗癆治療的2例患者,則診斷試驗(yàn)的敏感度可達(dá)到89%、陰性預(yù)測(cè)值可達(dá)到94%。結(jié)核性腦膜炎組腦脊液IFN-γ含量顯著高于病毒性腦膜炎組、化膿性腦膜炎組、隱球菌性腦膜腦炎組及非腦膜炎組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；其他各組間腦脊液IFN-γ含量相比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。 3外周血T-SPOT.TB檢測(cè)：在81例納入患者中,外周血T-SPOT.TB檢測(cè)診斷結(jié)核性腦膜炎的敏感度為70%(21/30),特異度為86%(44/51),陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為75%,陰性預(yù)測(cè)值為83%,陰性似然比為0.35,陽(yáng)性似然比為5.10。結(jié)核性腦膜炎組T-SPOT.TB日性率為70%,非結(jié)核性腦膜炎組T-SPOT.TB陽(yáng)性率為14%,兩組陽(yáng)性率有顯著性差異(P0.05)。在6例確診的結(jié)腦中有4(?)T-SPOT.TB陽(yáng)性,陽(yáng)性率為67%；在24例很可能的結(jié)腦中有17例T-SPOT.TB陽(yáng)性,陽(yáng)性率為71%,兩組沒(méi)有顯著性差異(P0.05).T-SPOT.TB斑點(diǎn)形成細(xì)胞(Spot forming cells, SFCs)分布：TBM組ESAT-6形成的SFCs數(shù)的中位數(shù)(32.5個(gè)/2.5×105PBMCs)顯著高于對(duì)照組(0個(gè)/2.5×105PBMCs)(P0.001).TBM組CFP-10形成的SFCs數(shù)的中位數(shù)(10個(gè)／2.5×105PBMCs)顯著高于對(duì)照組(0個(gè)/2.5×105PBMCs)(P0.001)。 4腦脊液結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)及抗酸染色涂片結(jié)果：結(jié)腦組共30例,其中腦脊液結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)陽(yáng)性6例,陰性24例,陽(yáng)性率20%,非結(jié)腦組共51例,培養(yǎng)陽(yáng)性為0例。腦脊液結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)的敏感度為20%(6/30),特異度為100%,約登指數(shù)為0.2,陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為100%,陰性預(yù)測(cè)值為68%。81例入選患者腦脊液抗酸染色涂片均為陰性。 5腦脊液結(jié)核分支桿菌培養(yǎng)、外周血LT-SPOT. TB及腦脊液IFN-γ檢測(cè)的比較：外周血T-SPOT. TB檢測(cè)、腦脊液中IFN-γ檢測(cè)及腦脊液結(jié)核分支桿菌培養(yǎng)三種診斷試驗(yàn)中,腦脊液中IFN-γ檢測(cè)的敏感度最高為83%,因此其陰性預(yù)測(cè)值也最高為90%,在入院時(shí)未接受抗結(jié)核治療的患者中敏感度可達(dá)到89%、陰性預(yù)測(cè)值可達(dá)到94%；腦脊液結(jié)核分支桿菌培養(yǎng)的特異度最高為100%,敏感度最低僅為20%。 6外周血T-SPOT. TB及腦脊液IFN-γ聯(lián)合檢測(cè)的比較：腦脊液IFN-γ檢測(cè)的敏感度、特異度均高于外周血T-SPOT. TB,但差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。外周血T-SPOT. TB及腦脊液IFN-γ檢測(cè)至少有一項(xiàng)陽(yáng)性時(shí),診斷TBM的敏感度增高達(dá)90%,陰性預(yù)測(cè)值達(dá)93%,但特異度及陽(yáng)性預(yù)測(cè)值較低,分別為75%、68%。外周血T-SPOT. TB及腦脊液IFN-Y檢測(cè)兩項(xiàng)均陽(yáng)性時(shí),診斷TBM的特異度較高為100%,陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為100%,但敏感度較低,僅為63%,陰性預(yù)測(cè)值為82%�？梢�(jiàn),當(dāng)外周血T-SPOT. TB及腦脊液IFN-γ檢測(cè)均陰性時(shí)有助于排除TBM,當(dāng)二者均陽(yáng)性時(shí)有助于明確TBM診斷。外周血T-SPOT. TB和腦脊液IFN-γ檢測(cè)的總一致性為中度(K=0.44)；在結(jié)核性腦膜炎組,外周血T-SPOT. TB和腦脊液IFN-γ檢測(cè)的一致性較差(κ=0.27),一致程度不夠理想；在對(duì)照組中外周血T-SPOT. TB和腦脊液IFN-γ檢測(cè)的結(jié)果很不一致(K=-0.15)。 [結(jié)論]用ELISA法檢測(cè)腦脊液中未受刺激的IFN-γ是診斷TBM的一種較為快速、經(jīng)濟(jì)、敏感性高的診斷方法,動(dòng)態(tài)觀察其含量變化對(duì)TBM患者的病情監(jiān)測(cè)具有重要意義。外周血T-SPOT. TB對(duì)TBM的診斷也具有重要的意義。外周血T-SPOT. TB及腦脊液中IFN-γ聯(lián)合檢測(cè)可以提高TBM的診斷效率。兩種診斷試驗(yàn)至少有一項(xiàng)陽(yáng)性時(shí)診斷TBM較檢測(cè)單一診斷試驗(yàn)更敏感,兩種診斷試驗(yàn)均陽(yáng)性時(shí)診斷TBM較單一診斷試驗(yàn)更特異。可見(jiàn),當(dāng)外周血T-SPOT. TB及腦脊液IFN-γ檢測(cè)均陰性時(shí)有助于排除TBM,當(dāng)二者均陽(yáng)性時(shí)有助于明確TBM診斷。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R529.3

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1467456