本文關(guān)鍵詞： 腹瀉 細(xì)菌 病毒 艱難梭菌　出處：《南方醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：感染性腹瀉是一種由病原微生物引起的,以腹瀉為主要表現(xiàn)的胃腸炎癥候群,其中病原微生物主要由細(xì)菌、病毒與寄生蟲等微生物組成。在我國39種法定傳染病中,腹瀉發(fā)病率高居首位。夏秋季是腹瀉的高發(fā)季節(jié),但中國南方廣州由于溫暖潮濕的氣候特征,冬春季腹瀉病也很常見,而完整的病原譜調(diào)查并不多見。作為感染性腹瀉病原譜監(jiān)測平臺的哨點(diǎn)醫(yī)院之一,我們建立了腹瀉病原譜監(jiān)測的技術(shù)平臺,采用了多種先進(jìn)的檢測技術(shù),如質(zhì)譜技術(shù)鑒定細(xì)菌、膠體金免疫層析技術(shù)檢測輪狀病毒抗原和腺病毒抗原以及實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)檢測諾如病毒等。本研究通過檢測廣州市海珠區(qū)冬春季腹瀉的病原菌及病毒的基因型,以及時了解該地區(qū)感染性腹瀉的病原譜特征。此外,我們對一些逐漸變得重要的、臨床上尚未引起足夠重視的病原進(jìn)行了深入研究,包括：彎曲菌感染患者糞便常規(guī)結(jié)果的分析、氣單胞菌屬的進(jìn)一步鑒定和藥敏試驗(yàn)以及病毒的基因分析等等。在進(jìn)行前一部分研究工作時,我們發(fā)現(xiàn)部分嚴(yán)重的腹瀉患者一直未找到病源,綜合分析其臨床資料和查閱有關(guān)腹瀉的最新進(jìn)展,懷疑部分患者可能感染了艱難梭菌,因此開展了酶聯(lián)免疫熒光技術(shù)檢測艱難梭菌AB毒素的相關(guān)工作,綜合分析艱難梭菌AB毒素陽性患者的臨床資料,了解艱難梭菌在腹瀉患者中的感染情況,為臨床診治和預(yù)防提供依據(jù)。 本研究分為以下兩個章節(jié)：第一章廣州市海珠區(qū)冬春季感染性腹瀉的病原學(xué)分析 南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院作為腹瀉癥候群監(jiān)測的哨點(diǎn)醫(yī)院之一,我們收集2012年11月到2013年5月來院就診的腹瀉患者的糞便,通過問卷調(diào)查和查閱病歷的方式了解病人的基本信息、臨床信息以及標(biāo)本采集情況等,共收集標(biāo)本290例,其中70例住院和220例門診,年齡中位數(shù)為25個月。 按照傳染病監(jiān)測技術(shù)平臺的要求,監(jiān)測范圍包括細(xì)菌病原譜和病毒病原譜。首先,對符合要求的腹瀉糞便標(biāo)本按照腹瀉監(jiān)測平臺的要求進(jìn)行病原菌培養(yǎng)、糞便常規(guī)的檢查和隱血試驗(yàn)、免疫層析方法檢測輪狀病毒抗原和腺病毒抗原,同時用凍存管保存5g或5m1左右的糞便于-80℃冰箱；其次,綜合分析各平板的菌落情況,挑取多個可疑菌落利用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)行鑒定；最后,根據(jù)鑒定結(jié)果,用血清學(xué)試驗(yàn)加以確證；氣單胞菌屬則用其他輔助試驗(yàn)鑒定到種；對-80℃冰箱保存的標(biāo)本統(tǒng)一用實(shí)時熒光PCR進(jìn)行諾如病毒的檢測,并提取病毒陽性標(biāo)本的核酸利用測序的方法進(jìn)行基因分型。 從腹瀉人群分析,以發(fā)育情況為標(biāo)準(zhǔn)分為6個年齡組,即嬰兒期組、幼兒期組、童年期組、青春期組、成年期組以及老年期組,其中嬰兒期組的腹瀉人群在所有腹瀉人群中所占比重最高而青春期組最低。從腹瀉的病原譜分析,腹瀉病原總陽性率54.48%(158/290),其中細(xì)菌總陽性率為20.67%(60/290)病毒總陽性率36.90%(107/290),混合感染陽性率7.59%(22/290)。病毒總陽性率明顯高于細(xì)菌總陽性率,各種類型混合感染的陽性率和糞便常規(guī)檢查結(jié)果均沒有顯著差異。在所檢出的病原菌中,沙門菌44.78%(30/67)的構(gòu)成比居首位,其次為彎曲菌屬28.36%(19/67)和氣單胞菌屬14.93%(10/67),未檢測到霍亂弧菌、副溶血性弧菌以及擬態(tài)弧菌；在所檢出的病毒中,輪狀病毒構(gòu)成比54.86%(62/113)；其次為諾如病毒39.82%(45/113),其中以諾如病毒II更常見；最后為腸道腺病毒4.42%(5/113)。從年齡的角度分析,未成年人細(xì)菌的陽性率高于成年人,其中未成年人彎曲菌陽性率明顯高于成年人；但未成年人病毒感染的陽性率與成年人之間沒有顯著差異。從性別的角度分析,男性患者病毒的陽性率高于女性；但男性患者細(xì)菌的陽性率與女性之間沒有顯著差異。從月份的角度分析,細(xì)菌陽性率最高在4月份,最低在1月份；病毒陽性率最高在1月份,最低在5月份。 對本次病原譜排列前三的病原進(jìn)一步的分析顯示：對于細(xì)菌而言,首先對沙門菌,增加了血清學(xué)試驗(yàn)和藥物敏感試驗(yàn),結(jié)果顯示目前引起腹瀉28例是A群沙門菌,2例為B群沙門菌,尚未發(fā)現(xiàn)其他菌群的沙門菌。28株復(fù)蘇成功的沙門菌藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果顯示,28株沙門菌對2種抗生素完全耐藥,占總的抗生素的8.70%；對12種抗生素部分耐藥,占52.17%；剩余的9種抗生素完全敏感,占39.13%；28株沙門菌全存在多重耐藥的情況；對于彎曲菌,詳細(xì)分析了彎曲菌感染患者的臨床特征,結(jié)果顯示彎曲菌感染所引起的腹瀉糞便中紅細(xì)胞、白細(xì)胞以及隱血試驗(yàn)等三個項(xiàng)目的陽性率明顯高于其它細(xì)菌引起的腹瀉,主要原因是該細(xì)菌本身培養(yǎng)的特殊性,較容易被忽略以致于患者未能得到及時有效的治療所致。10例氣單胞菌屬結(jié)合輔助試驗(yàn)鑒定到種,分別為4株溫和氣單胞菌,2株嗜水氣單胞菌、4株豚鼠氣單胞菌,藥物敏感試驗(yàn)顯示在21種抗生素中,10株氣單胞菌對3種抗生素完全耐藥,占14.29%：對6種抗生素部分耐藥,占28.57%；剩余12種抗生素完全敏感,占41.86%；10株氣單胞菌也都存在多重耐藥的情況。對于病毒而言,G1P8型輪狀病毒是本研究地區(qū)的優(yōu)勢株,與G9P8、G2P4和G3P8共占輪狀病毒陽性標(biāo)本的91.94%,其中國內(nèi)尚未報道G9P4型；GII.4型諾如病毒是最常見的流行株,還發(fā)現(xiàn)GI.1、GI.3、GI.4、 GI.6、GI.2、GII.14、GII.G-12型共7種其它基因型,其中國內(nèi)尚未報道GI.6、GII.g-12型。第二章艱難梭菌在腹瀉患者中感染情況的調(diào)查 從2013年7月到2013年12月,通過問卷調(diào)查和查閱病歷的方式了解病人的基本信息、臨床信息等情況,共收集來院就診腹瀉患者標(biāo)本137例,其中94例住院和43例門診；男性84例,女性53例；年齡最大的是85歲,最小的是11天,年齡中位數(shù)22歲。 當(dāng)發(fā)生腹瀉時,首先考慮是常見的病原菌引起的。根據(jù)第一章的研究結(jié)果顯示沙門菌是本次腹瀉監(jiān)測最常見的病原菌,同時該菌因其檢測方法簡單而能在普通實(shí)驗(yàn)室常規(guī)開展,故在進(jìn)行艱難梭菌感染監(jiān)測之前首先對所有檢測的標(biāo)本先進(jìn)行沙門菌的篩查。排除沙門菌感染的臨床病例,利用酶聯(lián)熒光免疫分析技術(shù)對剩余的標(biāo)本進(jìn)行艱難梭菌AB毒素的檢測,結(jié)果為8例陽性,對這8例艱難梭菌AB毒素檢測陽性的標(biāo)本利用加熱富集芽孢的方法進(jìn)行艱難梭菌培養(yǎng),方法如下：在70℃溫浴30分鐘后離心,取沉渣接種于厭氧平板后放入裝有厭氧產(chǎn)氣劑的厭氧袋培養(yǎng),48小時后進(jìn)行觀察,將培養(yǎng)結(jié)果與艱難梭菌AB毒素的結(jié)果進(jìn)行比較。 在收集137例標(biāo)本中,其中66例兒童,46例青年和25例老人。經(jīng)篩查,7例為沙門菌陽性。排除7例檢出沙門菌的標(biāo)本,對剩余的130例糞便標(biāo)本利用酶聯(lián)熒光免疫分析技術(shù)檢測艱難梭菌AB毒素,共檢出8例陽性,陽性率為6.15%。8例陽性標(biāo)本的臨床資料分析顯示,2例來自消化科,2例來自血液科,2例來自兒科門診,1例來自腎內(nèi)科還有1例來自器官移植,科室分布較分散。陽性病例按年齡段分布為兒童3例、中青年3例、老年人2例,以上三組人群的陽性率糞便糞便為4.76%,6.82%和8.70%,經(jīng)過統(tǒng)計學(xué)分析,三類人群的陽性率無顯著性差異。對這8例標(biāo)本的培養(yǎng)結(jié)果顯示,8例毒素陽性的標(biāo)本中,6例培養(yǎng)出艱難梭菌,2例未檢測到艱難梭菌；8例中有6例的結(jié)果一致,酶聯(lián)免疫熒光法和培養(yǎng)的比對結(jié)果良好,進(jìn)一步體會了艱難梭菌進(jìn)行厭氧培養(yǎng)對技術(shù)和人員等的高標(biāo)準(zhǔn)高要求。相比之下,酶聯(lián)免疫熒光法更適合臨床常規(guī)開展。 小結(jié) 根據(jù)以上兩章節(jié)研究結(jié)果,小結(jié)如下： 1、從腹瀉的病原譜分析。病原總陽性率和細(xì)菌陽性率高于國內(nèi)的相關(guān)報道,其可能原因是本研究采用了先進(jìn)的質(zhì)譜鑒定技術(shù)；病毒的陽性率高于細(xì)菌的陽性率。在所檢出的細(xì)菌中,前三位分別為沙門菌、彎曲菌和氣單胞菌；在所檢出病毒中,前三位分別為輪狀病毒、諾如病毒、腸道腺病毒。 2、從腹瀉的流行病學(xué)分析。針對易感人群,嬰兒期組腹瀉人群所占比重最大,青春期組則最低。針對性別而言,男性的病毒陽性率高于女性,但細(xì)菌陽性率沒有顯著差異；針對年齡而言,未成年組的細(xì)菌陽性率高于成年組而病毒陽性率沒有顯著差異；針對月份而言,細(xì)菌陽性率最高在4月份最低在1月份而病毒陽性率最高在1月份最低在5月份。 3、細(xì)菌病原譜的新特點(diǎn)。第一、人獸共患病原菌——彎曲菌在未成年組中的陽性率比成年組較高,彎曲菌腹瀉患者的糞便常規(guī)結(jié)果較其他類型腹瀉患者嚴(yán)重,建議腹瀉未成年人中常規(guī)開展彎曲菌的檢測工作。第二、人獸共患病原菌——?dú)鈫伟鸬母篂a位居第三位,在感染寫腹瀉病原菌中處于主要的病原菌,但因所引起的臨床癥狀不嚴(yán)重,較容易被忽視。 4、病毒病原譜的新特點(diǎn)。對于輪狀病毒而言,G1P8、G9P8、G2P4和G3P8共占輪狀病毒陽性標(biāo)本的91.94%,并發(fā)現(xiàn)了國內(nèi)尚未報道的G9P4型；對于諾如病毒而言,GII.4型諾如病毒是最常見的流行株,還發(fā)現(xiàn)7種其它基因型,其中國內(nèi)尚未報道GI.6、GII.g-12型。 5、藥物敏感試驗(yàn)的新變化。第一、本次所檢測的28株沙門菌和10株氣單胞菌全部出現(xiàn)多重耐藥。第二、兩種細(xì)菌對碳青霉烯類、頭孢四代、喹諾酮類以及氨基糖苷類所代表的抗生素均完全敏感。第三、沙門菌的耐藥情況比氣單胞菌嚴(yán)峻。 6、艱難梭菌感染易感人群發(fā)生的變化。在重點(diǎn)關(guān)注住院患者時也要重視社區(qū)門診患者；在關(guān)注老年人群時不能忽略兒童艱難梭菌感染相關(guān)性腹瀉的監(jiān)測；艱難梭菌感染引起的腹瀉患者來自醫(yī)院多個不同科室,提示艱難梭菌感染可以發(fā)生于各種不同疾病不同人群。 7、艱難梭菌感染新的檢測技術(shù)。與培養(yǎng)的方法相比,酶聯(lián)免疫熒光技術(shù)檢測艱難梭菌A和(或)B毒素簡單、快速、敏感性較高,更適合對腹瀉患者進(jìn)行艱難梭菌感染的篩查。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R512.5

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 聶青和;;感染性腹瀉的研究現(xiàn)狀[J];傳染病信息;2007年04期

2 沈紀(jì)川;劉于飛;李巧艷;謝華萍;蔣力云;吳新偉;魏躍紅;楊智聰;;2008年廣州市嬰幼兒諾如病毒感染流行特征及基因型研究[J];華南預(yù)防醫(yī)學(xué);2010年05期

3 梁大斌,林玫,李翠云,唐振柱,龔健,王鳴柳,權(quán)怡,譚冬梅;1995～2001年廣西感染性腹瀉流行病學(xué)分析[J];廣西預(yù)防醫(yī)學(xué);2003年01期

4 李文麗;簡子娟;劉文恩;劉清霞;;艱難梭菌毒素A＆B測定在醫(yī)院腹瀉患者中的應(yīng)用[J];中國感染控制雜志;2010年04期

5 何英;陸學(xué)東;;艱難梭菌相關(guān)性腹瀉的實(shí)驗(yàn)室診斷[J];國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2013年07期

6 王軼;李蓬;;2005—2008年新鄉(xiāng)市其它感染性腹瀉疫情流行病學(xué)分析[J];河南預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2010年04期

7 吳志潮,鄭亞平,鐘日榮,陳巧彬,蔡忠欽;福州地區(qū)嬰幼兒腺病毒性腸炎的調(diào)查研究[J];海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2001年05期

8 張曉宇;吳守芝;李一航;王春娟;;2003-2007年西安市感染性腹瀉細(xì)菌病原學(xué)監(jiān)測結(jié)果分析[J];疾病監(jiān)測;2008年01期

9 張海龍;李苑;張克春;楊洪;陽帆;羅敏;冼慧霞;姚相杰;何雅青;;2010年廣東省深圳市病毒性腹瀉監(jiān)測結(jié)果分析[J];疾病監(jiān)測;2012年01期

10 曲芬,鮑春梅,崔恩博,郭桐生,李永利,毛遠(yuǎn)麗;氣單胞菌不同種的流行及耐藥性[J];中國抗感染化療雜志;2004年05期

，

本文編號：1452093