本文關鍵詞：TGF-β對小鼠新生隱球菌感染及巨噬細胞功能影響的研究　出處：《第二軍醫(yī)大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

  更多相關文章： 新生隱球菌 巨噬細胞 免疫 轉(zhuǎn)化生長因子

【摘要】：研究背景新生隱球菌是一種機會致病真菌,主要感染免疫缺陷人群,如AIDS/HIV患者、腫瘤病人和長期使用免疫抑制劑的群體。新生隱球菌菌體或孢子通常經(jīng)呼吸道進入患者體內(nèi),造成肺部原發(fā)感染,進而通過血腦屏障進入中樞神經(jīng)系統(tǒng),引起致命性隱球菌性腦膜炎。機體感染隱球菌的結局極大程度上取決于機體的免疫狀態(tài),Th1免疫反應占主要時可清除隱球菌。肺巨噬細胞是機體抵御隱球菌的第一類免疫細胞,可通過內(nèi)吞和氧化殺傷方式在第一時間抵抗入侵的隱球菌,同時巨噬細胞也是連接固有免疫和適應性免疫的關鍵環(huán)節(jié),可募集T細胞至感染灶,形成細胞因子微環(huán)境,進而調(diào)控后續(xù)的獲得性免疫反應。巨噬細胞在機體抗新生隱球菌免疫反應中扮演重要角色。轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β)是一種多效細胞因子,在調(diào)節(jié)免疫反應方面有重要作用,可影響免疫細胞增殖、分化及相應功能,誘導免疫耐受和影響Th1/Th2細胞平衡。本課題將研究TGF-β對巨噬細胞吞噬、殺傷功能的影響,以及在機體抗隱球菌免疫方面的作用。研究目的本課題旨在研究TGF-β對巨噬細胞功能的影響,以及TGF-β在機體抗隱球菌感染方面的作用。研究方法用重組小鼠TGF-β提前干預J774A.1巨噬細胞,隨后用新生隱球菌感染巨噬細胞,觀察巨噬細胞吞噬率的改變;予以TGF-β干預隱球菌感染后巨噬細胞,分別比較巨噬細胞內(nèi)、外隱球菌菌落負荷在TGF-β干預后變化,用以評價巨噬細胞對胞內(nèi)、外隱球菌殺傷能力;為進一步研究巨噬細胞殺傷能力改變,用溶菌酶試劑盒檢測巨噬細胞溶菌酶的分泌量,用Griess reagent試劑盒檢測巨噬細胞NO生成量,并比較TGF-β干預后二者生成量的變化;建立小鼠隱球菌吸入感染模型,將重組小鼠TGF-β經(jīng)尾靜脈注射干預小鼠,分兩組在感染早期和晚期分別干預,觀察小鼠生存曲線、肺、腦組織菌落負荷,以及肺、腦、外周血中Th1/Th2/Th17細胞因子濃度變化。結果TGF-β干預導致巨噬細胞吞噬率下降,而巨噬細胞NO生成量和溶菌酶分泌量均上升,對吞噬入胞內(nèi)和胞外的隱球菌殺傷力均增加。在小鼠吸入感染模型,進行生存曲線分析,TGF-β早期干預組小鼠抵抗隱球菌能力減弱,死亡時間提前。此外,感染早期予TGF-β干預組,肺部菌落負荷增加,晚期隱球菌播散入腦數(shù)量增加,肺部IFN-γ、TNF-α濃度降低,IL-6濃度增高,腦組織和外周血Th細胞因子未見變化。感染后期予TGF-β干預小鼠組,肺部菌落下降,腦部隱球菌量無差異,肺組織中TNF-α和IL-6濃度升高,腦組織和外周血Th細胞因子亦未見變化。結論TGF-β抑制巨噬細胞吞噬隱球菌能力,但可通過增加溶菌酶和NO的生成量,提升巨噬細胞對隱球菌的殺傷能力。在小鼠吸入隱球菌感染模型,早期TGF-β干預將抑制巨噬細胞吞噬作用,進而抑制有效炎癥反應,小鼠抵抗隱球菌能力下降,導致隱球菌播散,死亡時間提前。晚期TGF-β干預可提高巨噬細胞殺傷功能,同時可提高肺部TNF-α濃度,增強抗隱球菌能力,肺部菌落負荷量下降,有助于使感染局限化。
[Abstract]:The research background of Cryptococcus neoformans is an opportunistic fungal infection in immunocompromised population, mainly, such as AIDS/HIV patients, cancer patients and long-term use of immunosuppressant group. Cryptococcus neoformans mycelium or spores are usually caused by respiratory tract in patients, primary lung infection, and then enter the central nervous system through the blood-brain barrier, causing fatal hidden neoformans meningitis. The immune status of cryptococcal infection outcome greatly depends on the body's immune response, Th1 accounted for the major may remove Cryptococcus. Pulmonary macrophage is the first class of immune cells against Cryptococcus neoformans can, through endocytosis and oxidative killing ways to resist the invasion in the first time, and it is also a key link connect the innate and adaptive immune and macrophage, can induce T cells to form foci of infection, cytokine microenvironment, and subsequent control The acquired immune response. Macrophages play an important role in the new body cryptococcal immune response. Transforming growth factor (TGF-) is a pleiotropic cytokine that plays an important role in the regulation of immune response, can affect the immune cell proliferation, differentiation and the corresponding function, the induction of immune tolerance and influence the balance of Th1/Th2 cells. This paper will study TGF- beta on macrophage phagocytosis, cytotoxicity function, and the role in the anti Cryptococcus immunity. The purpose of this study is to study the effect of TGF- on macrophage function beta, beta and TGF- in anti cryptococcus infection and the role of research methods with recombinant mouse J774A.1 macrophage TGF- beta in early intervention then, with Cryptococcus neoformans infection of macrophages, the phagocytosis rate of macrophage change; TGF- beta cryptococcal infection after intervention were compared with macrophages, macrophages Intracellular external cryptococcal colony load changes in the intervention of TGF- beta, evaluated by macrophages, and cryptococcal killing ability; for the further study of macrophage killing ability changes with the secretion of macrophages lysozyme lysozyme detection kit for detection of Griess, macrophage NO reagent kit generation, and compare the changes of beta TGF- the two generation of intervention; cryptococcal infection model of mice inhaled, the recombinant mouse beta TGF- after intravenous intervention mice were divided into two groups of intervention in the early and late infection, observe the survival curves of mice, lung, brain, lung, brain colony load, changes of Th1/Th2/Th17 cytokines in peripheral blood results. TGF- beta intervention led to the phagocytosis rate of macrophages decreased, and the production of NO and lysozyme secretion increased, increased the phagocytosis of Cryptococcus bacteria lethality into intracellular and extracellular. In the mouse model of infection by inhalation, survival curve analysis, early intervention group TGF- beta mice against Cryptococcus neoformans ability is abate, time of death in advance. In addition, the early stage of infection with TGF- beta intervention group, lung colony load increases, the late cryptococcal spread into the brain by increasing the number of lung IFN- gamma, alpha TNF- concentration decreased, the concentration of IL-6 increased brain tissue and peripheral blood Th cell factor did not change. The late stage of infection with TGF- beta treated mice group, lung colonies decreased, no difference in brain Cryptococcus, increased TNF- alpha and IL-6 concentration in lung tissue, brain tissue and peripheral blood Th cells was also no change. Conclusion TGF- beta inhibits macrophage phagocytosis of Cryptococcus neoformans ability, but increased the production of lysozyme and NO, enhance the killing capacity of macrophages of Cryptococcus neoformans in mice model. Inhalation of cryptococcal infection, early intervention of TGF- beta will inhibit macrophage phagocytosis by inhibiting, and Effect of inflammatory reaction in mice against Cryptococcus neoformans resulting in decreased ability to spread, the time of death in advance. The late TGF- beta intervention can improve macrophage killing function, also can improve the lung TNF- concentration, enhance the anti Cryptococcus ability, lung colony load decreased, helps to make localized infection.

【學位授予單位】：第二軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R519.4

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 桑紅,廖萬清,陳江漢,溫海;新生隱球菌白化突變分子機制的初步研究[J];醫(yī)學研究生學報;2001年02期

2 陳劍 ,李若瑜;新生隱球菌常用哪些檢測方法?[J];中華檢驗醫(yī)學雜志;2002年06期

3 楊蕤,胡福定,畢虹,金志賢;纖維支氣管鏡檢查致肺新生隱球菌感染擴散一例[J];中華結核和呼吸雜志;2004年09期

4 馮曉博;姚志榮;;新生隱球菌交配與致病性的關系[J];中國人獸共患病學報;2008年02期

5 孔慶濤;桑紅;;新生隱球菌氧傳感途徑的研究進展[J];醫(yī)學研究生學報;2013年10期

6 ;小兒新生隱球菌病[J];武漢醫(yī)學院學報;1976年01期

7 張宏,黃谷良,林特夫,張元和,張世馥,吳紹熙;新生隱球菌L型致病性的實驗研究[J];中華皮膚科雜志;1995年03期

8 吳紹熙,郭寧如,劉維達,李安生,張宏,沈永年,呂桂霞;新生隱球菌的生態(tài)學、流行病學、分子生物學及臨床研究[J];真菌學報;1996年02期

9 沈永年;墨西哥城鳥糞、水果和蔬菜中分離的新生隱球菌及其變種[J];國外醫(yī)學.皮膚性病學分冊;1996年03期

10 顧菊林;新生隱球菌的基因結構分析[J];國外醫(yī)學.皮膚性病學分冊;1996年04期

相關會議論文 前10條

1 朱元杰;溫海;徐紅;黃欣;趙瑾;;新生隱球菌與角質(zhì)形成細胞的體外相互作用[A];2006中國中西醫(yī)結合皮膚性病學術會議論文匯編[C];2006年

2 鄒先彪;廖萬清;溫海;吳建華;仇蕓;;新生隱球菌基因組DNA不同油提方法的比較[A];2003中國中西醫(yī)結合皮膚性病學術會議論文匯編[C];2003年

3 席麗艷;魯長明;龍澤香代子;福島和貴;;20株新生隱球菌生物學特性分析[A];中華醫(yī)學會第十二次全國皮膚性病學術會議論文集[C];2006年

4 趙卓;廖萬清;;新生隱球菌多糖莢膜的動態(tài)學研究進展[A];2007中華醫(yī)學會第二次醫(yī)學真菌學術會議暨醫(yī)學真菌實驗室研究技術新進展學習班論文匯編[C];2007年

5 李秀麗;廖萬清;;一種新的測定新生隱球菌活力的染色方法[A];2006中國中西醫(yī)結合皮膚性病學術會議論文匯編[C];2006年

6 趙亮;陳玉如;王梅竹;金方;顧桉菁;牟麗麗;羅紅梅;康穎倩;;新生隱球菌格魯比變種微進化表型變異菌株的研究[A];2012年中國菌物學會學術年會會議摘要[C];2012年

7 趙亮;唐秀文;康穎倩;羅紅梅;金方;王梅竹;陳玉如;;貴州貴陽及廣西柳州地區(qū)新生隱球菌臨床株微衛(wèi)星基因分型對比研究[A];2012年中國菌物學會學術年會會議摘要[C];2012年

8 鄒先彪;廖萬清;溫海;吳建華;仇蕓;;新生隱球菌線粒體DNA的快速抽提和電鏡觀察[A];2001年中國中西醫(yī)結合皮膚性病學術會議論文匯編[C];2001年

9 李莉;章強強;王家俊;朱利平;翁心華;張永信;;臨床及環(huán)境新生隱球菌對立�？颠蚝头颠虻捏w外敏感性實驗[A];2005全國首屆深部真菌感染學術會議論文集[C];2005年

10 李秀麗;田媛;史玉玲;顧俊瑛;劉至昱;李曉建;高飛;;蒺藜中甾體皂苷對新生隱球菌生物膜形成的抑制作用[A];2012全國中西醫(yī)結合皮膚性病學術會議論文匯編[C];2012年

相關重要報紙文章 前2條

1 記者 王小龍;新生隱球菌自我保護機制揭開[N];科技日報;2009年

2 本報記者何佳頤;養(yǎng)鴿子注意啥？[N];健康時報;2003年

相關博士學位論文 前10條

1 鄒先彪;新生隱球菌分子生物學分類方法的研究[D];第二軍醫(yī)大學;2001年

2 張超;新生隱球菌外分泌蛋白致病機制及新型藥物抗真菌作用研究[D];第二軍醫(yī)大學;2016年

3 桑軍軍;絲氨酸蛋白酶在新生隱球菌感染中的作用及機制研究[D];第二軍醫(yī)大學;2016年

4 陳宏;MicroRNA靶向單核巨噬細胞MAPK/NF-κB通路相關基因在新生隱球菌致病中的作用及機制研究[D];第二軍醫(yī)大學;2016年

5 法振宗;Annexin A2蛋白和TNFα對新生隱球菌與宿主相互作用調(diào)控機制研究[D];第二軍醫(yī)大學;2017年

6 潘煒華;新生隱球菌分子重組操作系統(tǒng)的建立及其莢膜相關基因的研究[D];第二軍醫(yī)大學;2000年

7 郭秀軍;新生隱球菌莢膜相關基因的實驗研究[D];第二軍醫(yī)大學;2003年

8 陳裕充;巨噬細胞對新生隱球菌活力和基因表達的影響[D];第二軍醫(yī)大學;2004年

9 楊陽;新生隱球菌與小膠質(zhì)細胞相互作用中差異表達蛋白質(zhì)的研究[D];第二軍醫(yī)大學;2005年

10 侯幼紅;藥物和化學試劑對致病酵母細胞表面疏水性和粘附性的影響[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;1994年

相關碩士學位論文 前10條

1 傅美芹;莢膜透明質(zhì)酸在新生隱球菌跨肺泡—毛細血管屏障過程中的作用研究[D];南方醫(yī)科大學;2012年

2 劉永權;中國人隱球菌腦膜炎流行特征和CD44/脂筏-Src信號通路在新生隱球菌侵入人肺泡上皮細胞中的作用機制[D];南方醫(yī)科大學;2015年

3 尤麗吐孜·許合熱提（Yultuz Xohrat）;新疆地區(qū)新生隱球菌的PCR-RAPD基因分型及體外抗真菌藥物敏感性研究[D];新疆醫(yī)科大學;2015年

4 聶舒;小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞與新生隱球菌GXM作用后基因表達譜分析[D];第二軍醫(yī)大學;2015年

5 張蕾;PPP1R26-AS1調(diào)控單核細胞抗新生隱球菌免疫應答及其疾病機制研究[D];第二軍醫(yī)大學;2016年

6 李穎芳;TGF-β對小鼠新生隱球菌感染及巨噬細胞功能影響的研究[D];第二軍醫(yī)大學;2017年

7 陳雪雯;新生隱球菌通過S100A10影響MMP9侵襲血腦屏障的機制研究[D];第二軍醫(yī)大學;2017年

8 曹艷云;不同新生隱球菌菌株對人臍靜脈內(nèi)皮細胞損傷的初步研究[D];第二軍醫(yī)大學;2006年

9 孔慶濤;氧含量對新生隱球菌形態(tài)學及毒力因子影響的初步研究[D];南京大學;2012年

10 林麗娜;80株中國大陸新生隱球菌環(huán)境株表型和分子特征的初步研究[D];第二軍醫(yī)大學;2013年

，

本文編號：1429370