本文關(guān)鍵詞：南京地區(qū)曲霉臨床分離株體外藥物敏感性調(diào)查及煙曲霉對伊曲康唑的耐藥機(jī)制研究　出處：《南京大學(xué)》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：侵襲性曲霉病(invasive aspergillosis,IA)是由曲霉屬感染所致,其中以煙曲霉感染最為常見,其次為黃曲霉、黑曲霉等。近年來,侵襲性曲霉病的患病率呈現(xiàn)上升趨勢,病死率居高不下,且不斷有曲霉對抗真菌藥物耐藥的報道。然而,曲霉體外藥物敏感性檢測在各個醫(yī)院并未常規(guī)開展。曲霉體外藥物敏感性試驗方法尚不統(tǒng)一,包括稀釋法、紙片擴(kuò)散法、E-test法等,其中稀釋法具有準(zhǔn)確度高、重復(fù)性好的特點。目前,稀釋法檢測曲霉體外敏感性的方法主要有兩種,分別是歐洲抗菌藥物敏感試驗委員會(European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing,EUCAST)發(fā)布的方法和美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)發(fā)布的方法。唑類抗真菌藥物對曲霉的作用部位在細(xì)胞膜,通過抑制14-α-去甲基酶(cyp51酶)而使得曲霉細(xì)胞膜中羊毛甾醇到麥角固醇的生物合成受阻,從而抑制曲霉生長。經(jīng)研究證實,煙曲霉對唑類抗真菌藥物耐藥性的產(chǎn)生,大多由于cyp51A基因的突變,包括54、220等位點突變引起的獲得性耐藥機(jī)制和TR/L98H突變引起的天然耐藥機(jī)制。目前,南京地區(qū)尚缺乏曲霉臨床分離株的體外藥物敏感性相關(guān)數(shù)據(jù)。故而本研究通過收集南京地區(qū)曲霉臨床分離株,檢測其對抗真菌藥物的體外藥物敏感性,并對耐藥煙曲霉株的耐藥機(jī)制進(jìn)行初步探討。研究一:南京地區(qū)曲霉臨床株體外藥物敏感性調(diào)查目的:調(diào)查南京地區(qū)曲霉臨床株對抗真菌藥物的體外藥物敏感性,并比較EUCAST和CLSI微量稀釋法檢測曲霉體外藥物敏感性的差異。材料與方法:收集南京地區(qū)5家大型教學(xué)醫(yī)院2012～2013年的曲霉臨床分離株,經(jīng)菌落形態(tài)、鏡下特征及分子生物學(xué)鑒定后,10%甘油-80℃冰凍保存。分別采用EUCAST和CLSI微量稀釋法檢測所收集曲霉株對兩性霉素B、伏立康唑、伊曲康唑、卡泊芬凈和米卡芬凈的體外藥物敏感性,比較兩方法的基本符合率、藥敏符合率、重大誤差率和極重大誤差率。結(jié)果:共收集臨床曲霉分離株116株,包括煙曲霉81株、黃曲霉28株和黑曲霉7株。EUCAST和CLSI兩方法均檢測到3株煙曲霉對伊曲康唑的最小抑菌濃度(MIC)≥4μg/mL,對116株曲霉藥敏檢測的基本符合率為96.3%～100%。兩方法檢測煙曲霉對伏立康唑的藥敏符合率為98.8%,重大誤差為1.2%,極重大誤差率為0;煙曲霉和黑曲霉對兩性霉素B以及煙曲霉和黃曲霉對伊曲康唑的藥敏符合率均為100%,重大誤差率和極重大誤差率均為0。結(jié)論:南京地區(qū)存在唑類抗真菌藥物耐藥煙曲霉株,對伊曲康唑耐藥比例為3.7%;未發(fā)現(xiàn)有對兩性霉素B耐藥的曲霉株;所檢測曲霉株對卡泊芬凈和米卡芬凈均具有較低的最低有效濃度。EUCAST和CLSI微量稀釋法對曲霉體外藥物敏感性具有良好的一致性。研究二:煙曲霉對伊曲康唑的耐藥機(jī)制研究目的:研究伊曲康唑耐藥煙曲霉株的cyp51A基因突變情況。材料與方法:回顧分析伊曲康唑耐藥煙曲霉株感染患者的臨床資料。提取并擴(kuò)增伊曲康唑耐藥煙曲霉株的cyp51A基因,ABI 3730XLDNA基因測序,同GenBank AF.338659煙曲霉cyp51A基因標(biāo)準(zhǔn)序列比對,以明確其突變情況。結(jié)果:三例伊曲康唑耐藥煙曲霉株感染患者均死亡。其中,一例侵襲性曲霉病患者發(fā)病前給予伊曲康唑以預(yù)防真菌感染,其cyp51A基因存在M220I突變;另外兩例患者侵襲性曲霉病發(fā)病前未給予抗真菌藥物預(yù)防治療,其cyp51A基因存在TR/L98H 突變。結(jié)論:南京地區(qū)伊曲康唑耐藥煙曲霉株的耐藥產(chǎn)生機(jī)制,既有天然耐藥,又有獲得性耐藥。耐藥煙曲霉株感染患者預(yù)后不良。
[Abstract]:渚佃鎬ф洸闇夌梾(invasive aspergillosis,IA)鏄敱鏇查湁灞炴劅鏌撴墍鑷，

本文編號：1418511