發(fā)布時(shí)間：2018-01-05 15:19

  本文關(guān)鍵詞：腸道病毒71型感染人腸道細(xì)胞的入侵機(jī)制研究　出處：《第二軍醫(yī)大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：人類腸道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)為單正鏈RNA病毒,屬于小RNA病毒科腸道病毒屬,是引起手足口病的主要病原體,兒童為主要感染人群。臨床癥狀以發(fā)熱以及口腔、手、足部的潰瘍或斑疹為主,隨著病情發(fā)展,可導(dǎo)致肺水腫甚至中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾患。目前尚無有效的治療措施,揭示影響病毒感染的宿主因子,將有助于抗病毒藥物的研發(fā)。一般認(rèn)為,病毒感染宿主細(xì)胞需經(jīng)過吸附、入侵、脫殼、基因組和蛋白質(zhì)合成、裝配、釋放這一完整的復(fù)制周期。其中,吸附和內(nèi)吞是病毒侵入細(xì)胞的首要環(huán)節(jié),病毒通常利用細(xì)胞膜上的受體和細(xì)胞自身固有的內(nèi)吞途徑侵入宿主細(xì)胞。P選擇素糖蛋白配體-1(P-selectin glycoprotein ligand-1,PSGL-1)和B族II型清道夫受體2(Scavenger receptor class B,member 2,SCARB2)是EV71的兩個(gè)功能性受體。病毒與受體結(jié)合后,可激活細(xì)胞內(nèi)相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路;啟動(dòng)病毒的細(xì)胞入侵事件。病毒的細(xì)胞入侵途徑具有多樣性,病毒通常可以利用多種內(nèi)吞途徑侵入不同的甚至同一種靶細(xì)胞,其中,網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞途徑和小窩蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞途徑最為常見。此外,也有病毒依賴非網(wǎng)格蛋白或非小窩蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞途徑進(jìn)行細(xì)胞入侵。EV71的傳播以糞-口途徑最廣,在此傳播途徑中,腸道是人體抵御病原體的第一道屏障。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,EV71經(jīng)口腔接種小鼠后,最先在小腸組織表現(xiàn)出病原體陽性。因此,EV71很可能首先通過對(duì)腸道系統(tǒng)進(jìn)行感染,在小腸道細(xì)胞內(nèi)大量快速復(fù)制,隨后入血導(dǎo)致病毒血癥并引發(fā)其它器官的感染。目前,關(guān)于EV71感染人腸道細(xì)胞的入侵機(jī)制尚不清楚。本課題旨在探明EV71如何利用細(xì)胞的固有元件入侵人腸道細(xì)胞,以及病毒入侵是否會(huì)增加人腸道上皮細(xì)胞的通透性、是否會(huì)破壞細(xì)胞間緊密連接結(jié)構(gòu)。選用人結(jié)腸癌細(xì)胞Caco-2作為EV71感染的靶細(xì)胞,通過免疫印跡、實(shí)時(shí)熒光定量PCR及小RNA干擾等技術(shù),進(jìn)行病毒受體的鑒定。利用人膜轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)分子的小干擾RNA文庫,對(duì)影響病毒感染的關(guān)鍵宿主因子進(jìn)行高通量篩選。結(jié)合篩選結(jié)果,采用小RNA干擾、化學(xué)抑制劑作用和過表達(dá)顯性抑制突變體等方法,確定EV71對(duì)Caco-2細(xì)胞的入侵機(jī)制和入侵相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。同時(shí),建立Caco-2細(xì)胞單層體外培養(yǎng)模型,模擬小腸刷狀緣上皮結(jié)構(gòu),探索EV71病毒入侵對(duì)腸上皮細(xì)胞通透性及緊密連接結(jié)構(gòu)的影響。一、SCARB2是EV71感染Caco-2細(xì)胞的功能性受體人橫紋肌肉瘤細(xì)胞(RD細(xì)胞)和人急性白血病單核細(xì)胞(THP-1細(xì)胞)分別作為SCARB2和PSGL-1表達(dá)的陽性對(duì)照細(xì)胞。利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、免疫印跡技術(shù)對(duì)SCARB2和PSGL-1在Caco-2細(xì)胞中的表達(dá)水平進(jìn)行檢測,結(jié)果顯示,PSGL-1基本不表達(dá);而SCARB2高表達(dá),其在Caco-2細(xì)胞表達(dá)水平與在RD細(xì)胞中相當(dāng)。進(jìn)一步利用小干擾RNA下調(diào)SCARB2的蛋白表達(dá)水平后,EV71對(duì)Caco-2細(xì)胞的感染與入侵被明顯抑制。以上結(jié)果表明,SCARB2是EV71感染Caco-2細(xì)胞的功能性受體。二、EV71感染Caco-2細(xì)胞依賴的膜轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)因子的篩選利用小干擾RNA文庫,靶向下調(diào)140個(gè)人膜轉(zhuǎn)運(yùn)分子的表達(dá),然后進(jìn)行病毒感染。通過免疫熒光、圖像分析及統(tǒng)計(jì)技術(shù),分析各靶分子的下調(diào)對(duì)EV71的感染性的影響。結(jié)果顯示,其中20個(gè)宿主因子的下調(diào),對(duì)EV71感染抑制率達(dá)50%以上,這些宿主因子包括:DNM2、HGS、TSG101、VPS4A、VPS36、PIK3CG、BECN1、ARPC5、ENTH、EPN2、AP2B1、COPA、GAF1、GIT1、VAPB、VCP、NSF、RAB3D、RAB7B、RAB7L1。三、EV71感染Caco-2細(xì)胞不依賴網(wǎng)格蛋白和小窩蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞途徑下調(diào)網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞途徑的幾個(gè)關(guān)鍵分子CLTA、CLTB、CLTC和AP2A1后,并不能抑制EV71對(duì)Caco-2細(xì)胞的感染。通過網(wǎng)格蛋白抑制劑chlorpromazine作用、細(xì)胞內(nèi)過表達(dá)EPS 15蛋白顯性抑制突變體(EPS 15 DN)阻斷網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞途徑后,也并不能抑制EV71對(duì)Caco-2細(xì)胞的感染。同樣,敲低小窩蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞途徑的關(guān)鍵分子CAV1、CAV2和CAV3,并不影響EV71對(duì)Caco-2細(xì)胞的感染。通過使用化學(xué)抑制劑filipin III和caveolin-1蛋白顯性抑制突變體(CAV1 DN)阻斷小窩蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞途徑后,也并不影響病毒對(duì)Caco-2細(xì)胞的感染性。以上結(jié)果表明,EV71感染Caco-2細(xì)胞不依賴網(wǎng)格蛋白和小窩蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞途徑。四、EV71感染和入侵Caco-2細(xì)胞對(duì)化學(xué)抑制劑EIPA敏感,但并不依賴巨胞飲途徑利用鈉氫泵抑制劑EIPA阻斷宿主細(xì)胞巨胞飲途徑后,可抑制EV71對(duì)Caco-2細(xì)胞的感染和入侵。而下調(diào)其它幾個(gè)參與巨胞飲的關(guān)鍵分子CDC42、RAC1、PKC和PAK1的表達(dá),卻并不影響病毒的感染性;Caco-2細(xì)胞經(jīng)RAC1抑制劑NSC23766、PAK-1抑制劑IPA-3和PKC抑制劑bisindolylmaleimide處理后,病毒對(duì)細(xì)胞的感染性也未被明顯抑制。結(jié)果表明,雖然EV71對(duì)Caco-2細(xì)胞的感染與入侵對(duì)EIPA敏感,但巨胞飲途徑并不是病毒的入侵途徑。五、發(fā)動(dòng)蛋白(dynamin 2)在EV71入侵Caco-2細(xì)胞過程中至關(guān)重要利用小干擾RNA下調(diào)發(fā)動(dòng)蛋白(Dynamin 2,DNM 2)的表達(dá),可顯著抑制EV71對(duì)Caco-2細(xì)胞的感染與入侵。通過dynamin 2抑制劑dynasore作用及過表達(dá)dynamin2蛋白顯性抑制突變體(DNM 2 DN)抑制dynamin 2的功能后,可明顯抑制EV71對(duì)Caco-2細(xì)胞的感染與入侵。在病毒感染入侵不同時(shí)間點(diǎn),利用dynasore對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理后,發(fā)現(xiàn)其對(duì)EV71感染抑制作用主要發(fā)生在病毒入侵早期階段。結(jié)果表明,dynamin 2對(duì)于EV71內(nèi)吞入胞過程至關(guān)重要,其主要在病毒入侵早期階段發(fā)揮作用。六、EV71對(duì)Caco-2細(xì)胞的感染與入侵需要膽固醇參與膽固醇剔除劑MβCD對(duì)Caco-2細(xì)胞進(jìn)行預(yù)處理后,明顯抑制了EV71對(duì)靶細(xì)胞的感染與入侵。將一定濃度的膽固醇添加到經(jīng)MβCD預(yù)處理過的Caco-2細(xì)胞,另細(xì)胞膽固醇回到生理水平后,又可恢復(fù)EV71與EV71假病毒的感染性。在病毒感染入侵不同時(shí)間點(diǎn)通過MβCD處理細(xì)胞后,發(fā)現(xiàn)其對(duì)EV71感染抑制作用主要發(fā)生在病毒入侵早期階段。結(jié)果表明,膽固醇參與了EV71感染與入侵Caco-2細(xì)胞,且主要在病毒入侵早期階段發(fā)揮作用。七、EV71入侵Caco-2細(xì)胞依賴轉(zhuǎn)運(yùn)必需內(nèi)體分選復(fù)合物相關(guān)因子HGS、VPS36、VPS37A、VPS37C、CHMP2A、VPS4A利用小干擾RNA下調(diào)Caco-2細(xì)胞中轉(zhuǎn)運(yùn)必需內(nèi)體分選復(fù)合物(Endosomal sorting complex required for transport,ESCRT)相關(guān)因子HGS、VPS36、VPS37A、VPS37C、CHMP2A和VPS4A的表達(dá),可顯著抑制EV71對(duì)Caco-2細(xì)胞的感染與入侵,提示ESCRT在EV71入侵Caco-2細(xì)胞過程中起作用。1,2-棕櫚酰磷酯酰肌醇-3-磷酸(Phosphatidylinositol 3-phosphate,PI3P)對(duì)于ESCRT在內(nèi)體膜上的定位和多囊泡體(Multivesicular bodies,MVB)的形成非常重要,其產(chǎn)生主要由磷脂酰肌醇激酶PIK3CG催化介導(dǎo)。進(jìn)一步通過小干擾RNA下調(diào)PIK3CG的表達(dá)、利用化學(xué)抑制劑wortmannin抑制PIK3CG活性后,發(fā)現(xiàn)EV71對(duì)靶細(xì)胞的感染與入侵均被明顯阻斷。結(jié)果表明,EV71入侵Caco-2細(xì)胞依賴ESCRT,在其參與下,病毒很可能隨之被遞呈至MVB。八、蛋白激酶A(PKA)與蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2在EV71入侵Caco-2細(xì)胞階段發(fā)揮重要作用通過多種靶向細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的化學(xué)抑制劑對(duì)Caco-2細(xì)胞進(jìn)行預(yù)處理后,發(fā)現(xiàn)H-89(PKA抑制劑)和NSC-87877(SHP-2抑制劑)可以明顯抑制EV71的感染與入侵,且高濃度的NSC-87877基本可以完全阻斷病毒的感染與入侵。在病毒感染入侵不同時(shí)間點(diǎn)用H-89或NSC-87877處理細(xì)胞后,發(fā)現(xiàn)H-89主要在病毒感染起始階段表現(xiàn)出明顯的抑制作用,而NSC-87877僅在入侵中、晚期階段發(fā)揮抑制功能。以上結(jié)果提示,細(xì)胞內(nèi)信號(hào)分子PKA和SHP-2對(duì)于EV71入侵Caco-2細(xì)胞至關(guān)重要,且PKA主要在病毒感染起始階段起作用;而在病毒入侵中、晚期階段,SHP-2發(fā)揮著決定性作用,其發(fā)揮作用的靶點(diǎn)很可能是在病毒的囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)或脫殼階段。九、EV71入侵可改變緊密連接結(jié)構(gòu)進(jìn)而增加Caco-2細(xì)胞單層通透性利用transwell培養(yǎng)技術(shù)構(gòu)建Caco-2細(xì)胞單層模型,通過檢測細(xì)胞單層跨膜電阻值(TEER)及細(xì)胞間緊密連接對(duì)細(xì)胞單層的完整性進(jìn)行評(píng)估。將EV71病毒加入Caco-2細(xì)胞單層持續(xù)感染2 h,檢測TEER值的變化,利用免疫熒光對(duì)ZO-1進(jìn)行染色,確定緊密連接是否發(fā)生變化。結(jié)果顯示,細(xì)胞單層跨膜電阻值TEER降低了50%以上,細(xì)胞間緊密連接結(jié)構(gòu)發(fā)生重排,呈非連續(xù)性分布,提示EV71對(duì)分化成熟的Caco-2細(xì)胞單層進(jìn)行入侵時(shí),可造成緊密連接的改變,進(jìn)而增加細(xì)胞單層通透性。本課題初步闡明了EV71入侵人腸道細(xì)胞的分子與細(xì)胞機(jī)制,加深了對(duì)EV71復(fù)制周期的理解和認(rèn)識(shí),為抗病毒藥物的研發(fā)提供了新的靶點(diǎn)。
[Abstract]:Human Enterovirus 71 ( EV71 ) is a single positive strand RNA virus , belonging to the genus Enterovirus belonging to the family of small RNA viruses . It is the main pathogen causing hand - foot - mouth disease . The expression level of EV71 in Caco - 2 cells was investigated by means of immunofluorescence , image analysis and statistical techniques . The infection and invasion of EV71 on Caco - 2 cells were not inhibited . The results showed that EV71 infection and invasion of Caco - 2 cells did not affect the infection of Caco - 2 cells . The infection and invasion of EV71 against Caco - 2 cells were investigated . The results showed that the infection and invasion of EV71 in Caco - 2 cells were significantly inhibited by using small interfering RNA . EV71 invasion can change the tight junction structure and then increase the single - layer permeability of Caco - 2 cells . The monolayer permeability of Caco - 2 cells is assessed by transwell culture technique .

【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R512.5

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7 金美彤;浙江省手足口病流行病學(xué)和病原學(xué)特征分析[D];浙江大學(xué);2015年

8 張莉;臨沂市手足口病檢測結(jié)果分析與防控對(duì)策研究[D];山東大學(xué);2015年

9 李菲;IL-4-589C/T位點(diǎn)基因多態(tài)性與腸道病毒71型感染的相關(guān)性研究[D];青島大學(xué);2015年

10 胡嵐;腸道病毒C組96型（EV-C96）的起源、進(jìn)化及生物學(xué)特征的研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2015年

本文編號(hào)：1383692