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致人體呼吸道感染的似棘阿米巴形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定

發(fā)布時(shí)間:2017-12-01 16:16

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【摘要】:目的鑒定某反復(fù)咳嗽患者痰液樣本中形態(tài)學(xué)似棘阿米巴的寄生蟲種屬。方法分離患者痰液中原蟲進(jìn)行體外培養(yǎng),顯微鏡觀察原蟲滋養(yǎng)體和包囊形態(tài),并提取原蟲DNA,采用阿米巴科18S rRNA通用引物Ami6F1和Ami9R、棘阿米巴屬18S rRNA通用引物JDP1和JDP2、葛氏棘阿米巴(Acanthamoeba griffini)S-7ATCC 18S rRNA全長(zhǎng)序列引物AacGF和AacGR進(jìn)行PCR擴(kuò)增鑒定。以樣本的18S rRNA基因?yàn)榉肿訕?biāo)志,與GenBank中各棘阿米巴序列進(jìn)行同源性分析,篩選相關(guān)物種序列,采用最大似然法構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹,分析親緣關(guān)系。結(jié)果鏡下可見,患者痰樣中的滋養(yǎng)體具有棘阿米巴特征性的棘狀偽足凸起,并呈無(wú)規(guī)則的變形蟲狀;包囊為兩層膜結(jié)構(gòu),內(nèi)膜具有棘阿米巴特征性的星狀突起。PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,采用3組引物分別擴(kuò)增出830、479和1 954 bp的條帶,與預(yù)期片段大小一致。經(jīng)BLAST比對(duì)后,3個(gè)擴(kuò)增產(chǎn)物序列與棘阿米巴S-7 ATCC相似度分別達(dá)99%、99%、100%。系統(tǒng)進(jìn)化樹結(jié)果顯示,樣本棘阿米巴與引起角膜炎的卡氏棘阿米巴(A.castellanii)、多噬棘阿米巴(A.polyphaga)、柯氏棘阿米巴(A.cullbertsoni)和條脊棘阿米巴(A.rhysodes)同源性較高,分別為91.4%、99.6%、94.5%和91.8%。結(jié)論該呼吸道感染患者痰液樣本中的寄生蟲鑒定為葛氏棘阿米巴。
【作者單位】: 上海海洋大學(xué)海洋生物和神經(jīng)科學(xué)研究所;第二軍醫(yī)大學(xué)病原生物學(xué)教研室;
【基金】:衛(wèi)生行業(yè)科研專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)資助項(xiàng)目(No.201202019) 國(guó)家自然科學(xué)基金(No.81141085)~~
【分類號(hào)】:R531.1
【正文快照】: 棘阿米巴(Acanthamoeba spp.)是一種自由生活的原生動(dòng)物,最早由Castellani發(fā)現(xiàn)存在于隱球菌的培養(yǎng)基中[1]。棘阿米巴屬的分類在1931年由Volkonsky建立,至1988年,棘阿米巴的明確分類地位由Pussard和Pons完成[2]。棘阿米巴屬原生動(dòng)物界(Protisa),肉足鞭毛蟲門(Sarcomastigophora

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 高敏;羅時(shí)運(yùn);肖揚(yáng);李然;王智群;孫旭光;;棘阿米巴對(duì)體外培養(yǎng)人角膜上皮細(xì)胞的損傷作用[J];眼科新進(jìn)展;2009年04期

2 鄭善子;;棘阿米巴引起的肉芽腫性阿米巴腦炎研究進(jìn)展[J];延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)學(xué)報(bào);2005年04期

3 易有云;致病的自由生活阿米巴[J];寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志;1984年01期

4 郭睿;劉鐵軍;鄧奎品;;原發(fā)性棘阿米巴肉芽腫性阿米巴腦炎誤診1例分析[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)影像技術(shù);2008年06期

5 ;[J];;年期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 吳楠;抗真菌藥與抗生素聯(lián)用對(duì)棘阿米巴的殺傷作用[D];延邊大學(xué);2014年



本文編號(hào):1241690

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