本文關(guān)鍵詞：TaqMan熒光定量RT-PCR快速檢測腹地病毒方法的建立

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【摘要】：為建立特異、快速、靈敏的Taq Man熒光定量RT-PCR方法用于腹地病毒核酸檢測,利用腹地病毒核衣殼蛋白編碼基因的特異性序列設(shè)計(jì)引物和探針,建立熒光定量RT-PCR快速檢測體系。對含有目的基因的質(zhì)粒、80份發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒陽性血清樣本以及80份流行性出血熱病毒陽性鼠肺樣本進(jìn)行核酸檢測,驗(yàn)證方法的靈敏度、特異度和重復(fù)性。結(jié)果顯示,該方法所檢測的80份發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒核酸陽性血清與80份流行性出血熱病毒陽性鼠肺樣本均為陰性,對目的基因的檢測靈敏度達(dá)50拷貝/反應(yīng);重復(fù)性測試中的變異系數(shù)為0.09%-0.87%,從樣本核酸提取至檢測完成的全過程僅需2 h。證明建立的腹地病毒Taq Man實(shí)時(shí)熒光RT-PCR方法具有快速、特異、靈敏及重復(fù)性好的特點(diǎn),有助于進(jìn)口貨物中昆蟲、嚙齒類動(dòng)物、外輪上工作的疑似病人檢疫以及對腹地病毒流行病學(xué)監(jiān)測工作的開展。
【作者單位】： 舟山出入境檢驗(yàn)檢疫局;
【關(guān)鍵詞】： 腹地病毒 發(fā)熱伴血小板減少綜合征 實(shí)時(shí)熒光RT-PCR
【基金】：浙江省科技廳公益技術(shù)研究社會發(fā)展項(xiàng)目(2015C33245)
【分類號】：R440;R511
【正文快照】： 1前言 發(fā)熱伴血小板減少綜合征(Fever with Thrombocytopenia Syndromes,SFTS)是由兩種布尼亞病毒即發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒(Fever with Thrombocytopenia Syndromes Virus,SFTSV)和腹地病毒(Heartland Virus,HRTV)引起的一種急性蟲媒傳染病[1-3]。該病潛伏期短,死亡率高

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本文編號：1066086