本文關(guān)鍵詞：TaqMan熒光定量RT-PCR快速檢測(cè)腹地病毒方法的建立

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【摘要】：為建立特異、快速、靈敏的Taq Man熒光定量RT-PCR方法用于腹地病毒核酸檢測(cè),利用腹地病毒核衣殼蛋白編碼基因的特異性序列設(shè)計(jì)引物和探針,建立熒光定量RT-PCR快速檢測(cè)體系。對(duì)含有目的基因的質(zhì)粒、80份發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒陽(yáng)性血清樣本以及80份流行性出血熱病毒陽(yáng)性鼠肺樣本進(jìn)行核酸檢測(cè),驗(yàn)證方法的靈敏度、特異度和重復(fù)性。結(jié)果顯示,該方法所檢測(cè)的80份發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒核酸陽(yáng)性血清與80份流行性出血熱病毒陽(yáng)性鼠肺樣本均為陰性,對(duì)目的基因的檢測(cè)靈敏度達(dá)50拷貝/反應(yīng);重復(fù)性測(cè)試中的變異系數(shù)為0.09%-0.87%,從樣本核酸提取至檢測(cè)完成的全過(guò)程僅需2 h。證明建立的腹地病毒Taq Man實(shí)時(shí)熒光RT-PCR方法具有快速、特異、靈敏及重復(fù)性好的特點(diǎn),有助于進(jìn)口貨物中昆蟲(chóng)、嚙齒類動(dòng)物、外輪上工作的疑似病人檢疫以及對(duì)腹地病毒流行病學(xué)監(jiān)測(cè)工作的開(kāi)展。
【作者單位】： 舟山出入境檢驗(yàn)檢疫局;
【關(guān)鍵詞】： 腹地病毒 發(fā)熱伴血小板減少綜合征 實(shí)時(shí)熒光RT-PCR
【基金】：浙江省科技廳公益技術(shù)研究社會(huì)發(fā)展項(xiàng)目(2015C33245)
【分類號(hào)】：R440;R511
【正文快照】： 1前言 發(fā)熱伴血小板減少綜合征(Fever with Thrombocytopenia Syndromes,SFTS)是由兩種布尼亞病毒即發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒(Fever with Thrombocytopenia Syndromes Virus,SFTSV)和腹地病毒(Heartland Virus,HRTV)引起的一種急性蟲(chóng)媒傳染病[1-3]。該病潛伏期短,死亡率高

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本文編號(hào)：1066086