本文關(guān)鍵詞：流式細(xì)胞術(shù)檢測大鼠肺泡巨噬細(xì)胞吞噬功能方法探討

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【摘要】：目的:比較不同實驗條件對檢測肺泡巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響,為流式細(xì)胞術(shù)檢測肺泡巨噬細(xì)胞吞噬功能篩選快速、靈敏、穩(wěn)定的實驗方法。方法:支氣管肺泡灌洗獲取肺泡巨噬細(xì)胞,將肺泡巨噬細(xì)胞分別與轉(zhuǎn)紅色熒光蛋白基因質(zhì)粒細(xì)菌〔E.coliDH5α(pJZ402rfp)〕及未轉(zhuǎn)質(zhì)粒細(xì)菌(E.coliDH5α)孵育,并選擇〔E.coliDH5α(pJZ402rfp)〕與肺泡巨噬細(xì)胞按不同的細(xì)菌與細(xì)胞比例(50:1、100:1、200:1)、孵育時間(30min、60min、120min、180min)及培養(yǎng)溶液(PBS、Hanks、無血清1640)進(jìn)行孵育,流式細(xì)胞儀檢測肺泡巨噬細(xì)胞的吞噬功能。結(jié)果:E.coliDH5α(pJZ402rfp)具有穩(wěn)定的紅色熒光,用E.coliDH5α(pJZ402rfp)檢測肺泡巨噬細(xì)胞的吞噬功能比用E.coliDH5α獲得更多的參數(shù)。肺泡巨噬細(xì)胞的吞噬率隨著細(xì)菌與細(xì)胞比例的增大而增加,而吞噬指數(shù)在細(xì)菌與細(xì)胞比例為100:1時為最高(P0.05);肺泡巨噬細(xì)胞的吞噬率從30分鐘到120分鐘變化不大,但到180分鐘吞噬率有明星的降低(P0.05),吞噬指數(shù)則在60分鐘時最高,有顯著差異(P0.05);Hanks液組肺泡巨噬細(xì)胞的吞噬率及吞噬指數(shù)顯著高于PBS組及1640組(P0.05)。結(jié)論:在室溫(260C)以肺泡巨噬細(xì)胞與E.coliDH5α(pJZ402rfp)比為1:100的Hanks液中孵育1小時,是流式細(xì)胞術(shù)檢測肺泡巨噬細(xì)胞吞噬功能的快速、靈敏、穩(wěn)定的實驗方法。
【作者單位】： 蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)部;上海市城市環(huán)境氣象中心;
【關(guān)鍵詞】： 轉(zhuǎn)紅色熒光蛋白基因質(zhì)粒細(xì)菌 流式細(xì)胞術(shù) 肺泡巨噬細(xì)胞
【基金】：上海市科學(xué)技術(shù)委員會“氣象與健康”課題,課題號:11DZ226900
【分類號】：R363
【正文快照】： 呼吸系統(tǒng)是環(huán)境和職業(yè)危害侵入機(jī)體的主要途徑之一,肺泡巨噬細(xì)胞作為呼吸系統(tǒng)防御機(jī)能的第一道屏障,它具有攝取、處理、加工清除外來異物的功能,但在發(fā)揮防御功能的同時也受到損害,故常用肺泡巨噬細(xì)胞來評價外源性毒物的毒性并把肺泡巨噬細(xì)胞受損作為反映肺實質(zhì)損傷的標(biāo)志之

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 陳連山;張洋;蘇玉虹;;流式細(xì)胞術(shù)檢測巨噬細(xì)胞吞噬功能的方法建立[J];數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志;2007年05期

2 余虹;;小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能測定方法的改進(jìn)及應(yīng)用(英文)[J];生命科學(xué)研究;2013年04期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 孟瑩;膽汁內(nèi)外引流術(shù)對梗阻性黃疸大鼠血清腫瘤壞死因子和肝臟枯否細(xì)胞誘導(dǎo)型一氧化氮合酶表達(dá)的影響[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2007年

2 肖建國;熊脫氧膽酸對梗阻性黃疸及膽汁內(nèi)外引流術(shù)后大鼠枯否細(xì)胞誘導(dǎo)型一氧化氮合酶表達(dá)的作用[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2008年

3 王子愷;膽汁內(nèi)外引流術(shù)對梗阻性黃疸大鼠肝臟Kupffer細(xì)胞膽汁酸受體TGR5及其mRNA表達(dá)的作用[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2010年

4 王愛清;氡暴露對大鼠免疫系統(tǒng)的毒作用及其機(jī)制探討[D];蘇州大學(xué);2013年

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 鄒丹,全宏勛,胡群員;小鼠肺泡巨噬細(xì)胞的提取、純化及活性檢測[J];中國公共衛(wèi)生;2003年09期

2 周立人,郭玉華,陳躍進(jìn),段瑩瑩,呂及忍;粉塵對肺泡巨噬細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及其功能影響的研究[J];中國核科技報告;1987年00期

3 李宏云;免疫熒光法檢測脂多糖誘導(dǎo)大鼠肺泡巨噬細(xì)胞NF-κB的活化[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2004年12期

4 陳明霞;王鵬;樊小軍;劉衍晟;;一例特發(fā)性肺含鐵血黃素沉著癥肺組織的超微結(jié)構(gòu)觀察[J];電子顯微學(xué)報;2006年01期

5 周立人;段瑩瑩;陳躍進(jìn);;粉塵對肺泡巨噬細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及功能影響的研究(摘要)[J];蘇州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);1985年01期

6 張紅玉,王瑞瑜,嚴(yán)儀昭;764-3和博萊霉素A_6對大鼠肺泡巨噬細(xì)胞表面纖維粘連蛋白的影響(論著摘要)[J];中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報;1992年04期

7 孫秀泓，周伯通，張長青，，秦曉群;前列腺素對肺泡巨噬細(xì)胞分泌白細(xì)胞介素－8的調(diào)控[J];中國應(yīng)用生理學(xué)雜志;1994年01期

8 李文軍,李二紅,楊宗城;煙霧吸入性損傷大鼠肺泡巨噬細(xì)胞吞噬功能與炎癥消散關(guān)系研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2000年11期

9 孟愛宏;;p38MAPK和STAT3在LPS刺激小鼠肺泡巨噬細(xì)胞中的作用[J];中國病理生理雜志;2010年10期

10 Bergmann K Ch ,廖喜梅;肺的免疫機(jī)制[J];國際呼吸雜志;1982年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 錢小順;朱慶磊;楊潔;尹彤;丁秀云;王士雯;;老齡對大鼠多器官衰竭模型肺泡巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響[A];第七屆全國老年醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議暨海內(nèi)外華人老年醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

2 黃翠萍;楊和平;;p38蛋白激酶對脂多糖誘導(dǎo)肺泡巨噬細(xì)胞NF-κB活化的調(diào)控[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國呼吸病學(xué)術(shù)會議暨學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2006年

3 劉永平;管茶香;白洪波;劉惠君;張長青;;降鈣素基因相關(guān)肽下調(diào)LPS誘導(dǎo)肺泡巨噬細(xì)胞MMP-9的表達(dá)及機(jī)制探討[A];湖南省生理科學(xué)學(xué)會2004年度學(xué)術(shù)年會論文摘要匯編[C];2004年

4 尚利宏;羅自強(qiáng);鄧小丹;岳少杰;;NMDA誘導(dǎo)的大鼠肺泡巨噬細(xì)胞TNF-α的變化[A];全國圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)專題學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2007年

5 張艷淑;姚林;李清釗;劉英莉;徐應(yīng)軍;王廣增;趙伯陽;Arthur H.K Djang;;Oncolyn對石英粉塵所致肺泡巨噬細(xì)胞氧化損傷的緩解作用[A];新世紀(jì)預(yù)防醫(yī)學(xué)面臨的挑戰(zhàn)——中華預(yù)防醫(yī)學(xué)會首屆學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2002年

6 莊然;張圓;鄧虎平;金伯泉;;基于CFSE／PI雙標(biāo)記法檢測細(xì)胞殺傷水平方法的建立[A];中國免疫學(xué)會第五屆全國代表大會暨學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2006年

7 譚波;王興勇;許峰;盧仲毅;;MODS大鼠模型的建立及其發(fā)病機(jī)制[A];中華醫(yī)學(xué)會第十四次全國兒科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

8 宋文剛;張明徽;曲迅;張彬彬;徐英萍;曹雪濤;;外周血干細(xì)胞動員中的CD34~+細(xì)胞動態(tài)監(jiān)測[A];山東免疫學(xué)會、山東微生物學(xué)會醫(yī)學(xué)微生物學(xué)專業(yè)委員會、山東省醫(yī)學(xué)會微生物學(xué)和免疫學(xué)專業(yè)委員會、山東省醫(yī)藥生物技術(shù)學(xué)會2001年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2001年

9 陳吉慶;陸超;周國平;周艷;袁傳順;管亞飛;;過氧化氫對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中Par-4基因轉(zhuǎn)錄的影響[A];2006（第三屆）江浙滬兒科學(xué)術(shù)會議暨浙江省兒科學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2006年

10 賈悅;崔毓桂;沙家豪;狄福松;王興海;童建孫;;流式細(xì)胞術(shù)在測定大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞和生精細(xì)胞凋亡中的應(yīng)用[A];中華醫(yī)學(xué)會第六次全國內(nèi)分泌學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 ;As_(2)S_(2)與STI571協(xié)同誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡[N];中國醫(yī)藥報;2003年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 曹蕾;發(fā)育肺炎癥損傷和信號傳導(dǎo)途徑的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2004年

2 南景龍;C反應(yīng)蛋白對內(nèi)皮祖細(xì)胞功能的影響及其機(jī)制研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

3 寧鉑濤;鼠抗人CD14新克隆ZCH-7-2F9單鏈抗體的研究[D];浙江大學(xué);2005年

4 徐建國;甲型流感病毒DNA疫苗雙表達(dá)載體的構(gòu)建及免疫效果的研究[D];吉林大學(xué);2007年

5 秦鑫;人血管內(nèi)皮生長因子受體3結(jié)合肽的篩選和鑒定[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2007年

6 孫禾;肺泡巨噬細(xì)胞Dectin-2在煙曲霉感染免疫中的作用及其機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2013年

7 韓曉男;實驗性肺氣腫、肺動脈高壓發(fā)病機(jī)理及中藥814防治的進(jìn)一步研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2000年

8 張遵真;DNA氧化損傷修復(fù)基因HOGG1低表達(dá)細(xì)胞株的建立及其應(yīng)用研究[D];四川大學(xué);2005年

9 田喜鳳;雙氫青蒿素對體外藍(lán)氏賈第鞭毛蟲滋養(yǎng)體的損傷作用[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2006年

10 蔡燕;著絲粒蛋白CENP-E和CENP-I與染色體分離關(guān)系研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2008年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李宏云;脂多糖誘導(dǎo)大鼠肺泡巨噬細(xì)胞NF-κB活化及TNF-α 釋放的實驗研究[D];鄭州大學(xué);2003年

2 曾芬芳;抗人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞單克隆抗體ZUB1在流式細(xì)胞檢測術(shù)中的應(yīng)用[D];浙江大學(xué);2007年

3 張蕊;硫辛酸對氫醌所致V79細(xì)胞線粒體膜電位損傷的保護(hù)性實驗研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2008年

4 董�，�;大鼠肺泡巨噬細(xì)胞ERG鉀通道的表達(dá)及其功能的初步研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2009年

5 李光源;兩種單純皰疹病毒Ⅰ型糖蛋白B基因疫苗的免疫學(xué)研究[D];吉林大學(xué);2005年

6 秦珍珠;樹突狀細(xì)胞在結(jié)腸癌細(xì)胞SW620上清液作用下內(nèi)皮樣分化傾向的研究[D];鄭州大學(xué);2008年

7 王敏;活細(xì)胞染料CFSE在人γδT細(xì)胞增殖及分泌細(xì)胞因子研究中的應(yīng)用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2005年

8 沈元元;異基因造血干細(xì)胞移植后CD4~+CD25~+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞與移植物抗宿主病關(guān)系的研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2009年

9 趙莉;hTGF-β1對大鼠軟骨細(xì)胞及小鼠淋巴細(xì)胞生物學(xué)特性的影響[D];暨南大學(xué);2005年

10 曹軍麗;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞單克隆抗體在骨髓和臍血間充質(zhì)干細(xì)胞檢測中的應(yīng)用[D];浙江大學(xué);2006年

本文編號：918504