目的初步探討利用微流控技術(shù)體外構(gòu)建三維海馬神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)的可行性。方法設(shè)計(jì)并采用標(biāo)準(zhǔn)濕法腐蝕工藝制備網(wǎng)絡(luò)圖案化的微流控芯片。取新生SD大鼠丘腦組織,分離培養(yǎng)原代海馬神經(jīng)元后,接種于微流控芯片上進(jìn)行培養(yǎng)。3、5、7 d時(shí)行免疫熒光染色,觀察海馬神經(jīng)元生長情況;7 d時(shí)行海馬神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)電生理檢測。結(jié)果熒光顯微鏡下觀察顯示,隨培養(yǎng)時(shí)間延長,海馬神經(jīng)元數(shù)量逐漸增加,且神經(jīng)元突起亦相應(yīng)增多、增長,并且均勻規(guī)則分布在微流控芯片通道,提示成功構(gòu)建三維海馬神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)。培養(yǎng)7 d時(shí)可以檢測到海馬神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)的單通道及多通道自發(fā)放電信號,提示神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)具有初步的生物學(xué)功能。結(jié)論圖案化微流控芯片可以使海馬神經(jīng)元按照局限路徑生長,從而形成三維神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò),并且具有信號傳導(dǎo)等相應(yīng)的生物學(xué)功能。

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