抗尖吻蝮蛇蛇毒金屬酶類(lèi)共同基序IgY抗體的制備與研究
本文關(guān)鍵詞:抗尖吻蝮蛇蛇毒金屬酶類(lèi)共同基序IgY抗體的制備與研究
更多相關(guān)文章: 金屬蛋白酶 抗原肽 尖吻蝮蛇蛇毒 免疫 Ig Y 出血型蛇毒
【摘要】:[目的]制備針對(duì)尖吻蝮蛇蛇毒金屬蛋白酶類(lèi)共同基序的Ig Y抗體,并對(duì)其中和蛇毒活性的作用進(jìn)行研究。[方法]通過(guò)分析尖吻蝮蛇蛇毒各類(lèi)金屬蛋白酶類(lèi)共有序列,設(shè)計(jì)合成與其酶活性密切相關(guān)且高度保守的抗原肽PT1和PT2;偶聯(lián)復(fù)合物KLH-PT1、KLH-PT2免疫母雞獲得Ig Y抗體。采用ELISA和Western blot等方法對(duì)Ig Y效價(jià)及與尖吻蝮蛇蛇毒和短尾蝮蛇蛇毒的交叉反應(yīng)特性進(jìn)行初步研究;最后通過(guò)抗小鼠皮下出血實(shí)驗(yàn)對(duì)Ig Y中和活性進(jìn)行評(píng)價(jià)。[結(jié)果]ELISA、Western blot結(jié)果表明,抗KLH-PT1、抗尖吻蝮蛇蛇毒Ig Y均可與尖吻蝮蛇蛇毒、短尾蝮蛇蛇毒發(fā)生交叉反應(yīng)且后者顯著強(qiáng)于前者;抗KLH-PT2 Ig Y在體外與尖吻蝮蛇蛇毒、短尾蝮蛇蛇毒無(wú)明顯交叉反應(yīng),在體內(nèi)抗出血實(shí)驗(yàn)中卻表現(xiàn)出很強(qiáng)的中和毒性作用,并且顯著優(yōu)于前兩者。[結(jié)論]通過(guò)設(shè)計(jì)金屬蛋白酶共有序列抗原肽,制備了能與多種血循型蛇毒交叉反應(yīng)的Ig Y抗體,這為制備特異、高效、低毒性且廣譜的抗出血型蛇毒抗體奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 浙江中醫(yī)藥大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 金屬蛋白酶 抗原肽 尖吻蝮蛇蛇毒 免疫 Ig Y 出血型蛇毒
【基金】:浙江省教育廳科研項(xiàng)目(Y201224592) 浙江省大學(xué)生科技創(chuàng)新活動(dòng)計(jì)劃項(xiàng)目(2013R410028) 浙江省重點(diǎn)科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(2011R09042-04,2009R50042)~~
【分類(lèi)號(hào)】:R392
【正文快照】: JOURNALOFZHEJIANGCHINESEMEDICALUNIVERSITYVOL.38NO.12Dec.2014論著尖吻蝮蛇(Deinagkistrodon acutus)是我國(guó)常見(jiàn)的毒蛇,其毒液主要為血循毒[1-2],其中蛇毒金屬蛋白酶[3]是引起出血的主要物質(zhì),它們有的干擾傷口血液的凝結(jié)和血栓的形成,有的則降解胞外基質(zhì)或基底膜,是蛇毒蛋
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本文編號(hào):855909
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