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抗尖吻蝮蛇蛇毒金屬酶類(lèi)共同基序IgY抗體的制備與研究

發(fā)布時(shí)間:2017-09-15 10:12

  本文關(guān)鍵詞:抗尖吻蝮蛇蛇毒金屬酶類(lèi)共同基序IgY抗體的制備與研究


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【摘要】:[目的]制備針對(duì)尖吻蝮蛇蛇毒金屬蛋白酶類(lèi)共同基序的Ig Y抗體,并對(duì)其中和蛇毒活性的作用進(jìn)行研究。[方法]通過(guò)分析尖吻蝮蛇蛇毒各類(lèi)金屬蛋白酶類(lèi)共有序列,設(shè)計(jì)合成與其酶活性密切相關(guān)且高度保守的抗原肽PT1和PT2;偶聯(lián)復(fù)合物KLH-PT1、KLH-PT2免疫母雞獲得Ig Y抗體。采用ELISA和Western blot等方法對(duì)Ig Y效價(jià)及與尖吻蝮蛇蛇毒和短尾蝮蛇蛇毒的交叉反應(yīng)特性進(jìn)行初步研究;最后通過(guò)抗小鼠皮下出血實(shí)驗(yàn)對(duì)Ig Y中和活性進(jìn)行評(píng)價(jià)。[結(jié)果]ELISA、Western blot結(jié)果表明,抗KLH-PT1、抗尖吻蝮蛇蛇毒Ig Y均可與尖吻蝮蛇蛇毒、短尾蝮蛇蛇毒發(fā)生交叉反應(yīng)且后者顯著強(qiáng)于前者;抗KLH-PT2 Ig Y在體外與尖吻蝮蛇蛇毒、短尾蝮蛇蛇毒無(wú)明顯交叉反應(yīng),在體內(nèi)抗出血實(shí)驗(yàn)中卻表現(xiàn)出很強(qiáng)的中和毒性作用,并且顯著優(yōu)于前兩者。[結(jié)論]通過(guò)設(shè)計(jì)金屬蛋白酶共有序列抗原肽,制備了能與多種血循型蛇毒交叉反應(yīng)的Ig Y抗體,這為制備特異、高效、低毒性且廣譜的抗出血型蛇毒抗體奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 浙江中醫(yī)藥大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】金屬蛋白酶 抗原肽 尖吻蝮蛇蛇毒 免疫 Ig Y 出血型蛇毒
【基金】:浙江省教育廳科研項(xiàng)目(Y201224592) 浙江省大學(xué)生科技創(chuàng)新活動(dòng)計(jì)劃項(xiàng)目(2013R410028) 浙江省重點(diǎn)科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(2011R09042-04,2009R50042)~~
【分類(lèi)號(hào)】:R392
【正文快照】: JOURNALOFZHEJIANGCHINESEMEDICALUNIVERSITYVOL.38NO.12Dec.2014論著尖吻蝮蛇(Deinagkistrodon acutus)是我國(guó)常見(jiàn)的毒蛇,其毒液主要為血循毒[1-2],其中蛇毒金屬蛋白酶[3]是引起出血的主要物質(zhì),它們有的干擾傷口血液的凝結(jié)和血栓的形成,有的則降解胞外基質(zhì)或基底膜,是蛇毒蛋

【相似文獻(xiàn)】

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1 王曉輝,王化麗,李旭;尖吻蝮蛇蛇毒中鎮(zhèn)痛成分的研究[J];中國(guó)生化藥物雜志;2001年04期

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3 曹宇亮;張雷;劉明華;;尖吻蝮蛇蛇毒多克隆抗體純化及生物活性研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2014年09期

4 潘學(xué)兵;陳冬云;懷建國(guó);吉兆寧;;皖南尖吻蝮蛇蛇毒中抗腫瘤活性蛋白分離純化及其活體外性研究[J];中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué);2008年09期

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6 王守業(yè),張祖德,陳真龍,余華明,吳雙頂,劉清亮;皖南尖吻蝮蛇蛇毒纖溶組分中結(jié)合態(tài)鈣的生化特性[J];生物化學(xué)與生物物理學(xué)報(bào);1998年03期

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1 唐婭;董偉華;孔天翰;;加熱對(duì)尖吻蝮蛇蛇毒及其組分免疫原性及生物活性影響[A];中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)第九屆全國(guó)代表大會(huì)及學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2010年

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3 王俊杰;一種新的尖吻蝮蛇蛇毒類(lèi)凝血酶的結(jié)構(gòu)和功能研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2009年



本文編號(hào):855909

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