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Duchenne型肌營養(yǎng)不良小鼠模型鑒定及干細胞移植后dystrophin的變化

發(fā)布時間:2017-09-15 08:15

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【摘要】:目的建立Duchenne型肌營養(yǎng)不良(DMD)模型dko小鼠的鑒定方法,評估干細胞移植后dystrophin的再生水平。方法采用SSP-PCR方法鑒定雜合子鼠交配產(chǎn)生的子代鼠的基因型。生化分析儀測定dko小鼠血漿肌酸激酶含量,HE染色觀察肌肉組織學變化。擴增人臍帶間充質(zhì)干細胞并注射到dko小鼠后肢肌肉,2個月后免疫熒光染色法檢測dystrophin的表達。結(jié)果雜合子鼠交配可以產(chǎn)生三個基因型的子代鼠,21.2%的子代鼠可以鑒定為dko小鼠的基因型(285 bp)。dko小鼠顯示了肌營養(yǎng)不良的癥狀,血漿肌酸激酶含量高達(16,988.52±617.48)IU/L,典型的病理變化包括肌纖維大小不一,多見核中移細胞,結(jié)締組織增生或炎性細胞浸潤。將人臍帶間充質(zhì)干細胞注射到dko小鼠后肢肌肉,2個月后可檢測到人dystrophin的表達。結(jié)論采用SSP-PCR可用于鑒定dko小鼠基因型,dko小鼠是研究干細胞治療DMD的理想動物模型。
【作者單位】: 成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院云南省干細胞工程實驗室;中山大學附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;云南農(nóng)業(yè)大學農(nóng)科專業(yè)基礎實驗教學示范中心;軍事醫(yī)學科學院實驗動物中心;北京市獸藥監(jiān)察所;
【關(guān)鍵詞】Duchenne型肌營養(yǎng)不良 動物模型 基因型鑒定 干細胞治療 Dko小鼠
【基金】:云南省基金項目(2011HB050,2013DA004) 成都軍區(qū)基金項目(B12021,2012WJ003) “十二五”重大項目(2011ZXJ09201-031)
【分類號】:R746.2;R-332
【正文快照】: mail:15810074189@163.com(1.Stem Cell Engineering Laboratory of Yunnan Province,Kunming General Hospital of Chengdu MilitaryCommand,Kunming 650032,China;2.Laboratory Animal Center,Military Academy of Medical Sciences,Beijing 100071;3.Department of Neurolo

【共引文獻】

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【相似文獻】

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10 劉t樍,

本文編號:855340


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