Vero細(xì)胞培養(yǎng)流感病毒的低血清培養(yǎng)基的篩選
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更多相關(guān)文章: Vero細(xì)胞 流感病毒 血清 培養(yǎng)基 生物安全性
【摘要】:目的篩選Vero細(xì)胞生長的最適低血清培養(yǎng)基,用于流感病毒的細(xì)胞培養(yǎng)。方法分別以MEM、M199、DMEM/F12、DMEM/F12與MEM混合物(1∶1)為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,添加5%、2%、1%的小牛血清傳代培養(yǎng)Vero細(xì)胞,通過細(xì)胞形態(tài)觀察、細(xì)胞計(jì)數(shù)及MTT法檢測細(xì)胞的增殖活力篩選最適基礎(chǔ)培養(yǎng)基;將流感病毒接種低血清適應(yīng)的Vero細(xì)胞,檢測病毒收獲液的血凝效價(jià)及殘留BSA含量,電子顯微鏡觀察病毒形態(tài)。結(jié)果以DMEM/F12與MEM混合物(1∶1)為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,添加2%小牛血清培養(yǎng)的Vero細(xì)胞長勢良好,細(xì)胞數(shù)量較多,增殖活力最強(qiáng)。低血清適應(yīng)的Vero細(xì)胞培養(yǎng)的流感病毒血凝效價(jià)最高可達(dá)1∶512,平均值為1∶384;病毒液中的殘留BSA含量約為正常血清培養(yǎng)條件下的1/18;病毒形態(tài)完整。結(jié)論成功篩選出Vero細(xì)胞培養(yǎng)流感病毒的低血清培養(yǎng)基,為更具生物安全性的流感疫苗的研發(fā)奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所云南省重大傳染病疫苗研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: Vero細(xì)胞 流感病毒 血清 培養(yǎng)基 生物安全性
【基金】:國家國際合作項(xiàng)目“細(xì)胞流行性感冒病毒減毒活疫苗合作研究”(2011DFR30420)
【分類號(hào)】:R373.13
【正文快照】: 流感病毒屬于單股負(fù)鏈RNA病毒[1],變異快,易導(dǎo)致流感大流行。2013年出現(xiàn)的流感病毒H7N9經(jīng)自然重配,致病迅速,易變異,給人們帶來極度恐慌,引起WHO的高度重視[2]。目前,接種流感疫苗是預(yù)防和控制流感大流行的最有效手段[3-4]。市售流感疫苗主要以雞胚為培養(yǎng)基質(zhì),但雞胚制備的流
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2 吳碧,
本文編號(hào):806717
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