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SD大鼠原代胰島細胞分離、純化及培養(yǎng)技術(shù)的改進

發(fā)布時間:2017-09-06 09:02

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【摘要】:目的:探討大鼠胰島細胞分離、純化及培養(yǎng)的方法,并評價其生物學(xué)功能。方法:選用8~10周齡健康SD大鼠,采用膽總管逆行注射預(yù)冷膠原酶P溶液,37℃水浴靜止消化,30目不銹鋼篩網(wǎng)過濾,Ficoll400非連續(xù)密度梯度離心純化。分離后的胰島用DTZ染色計算胰島產(chǎn)量,胰島素釋放試驗評價其生物學(xué)功能。結(jié)果:胰島細胞分布于Ficoll400濃度為23%~20%和20%~11%的界面之間。DTZ染色呈紅色細胞團,胰島產(chǎn)量為(606±56)IEQ/胰腺。純度高達80~90%,活率≥90%,胰島素釋放功能良好。結(jié)論:膠原酶P溶液原位消化,Ficoll400純化是一種高效簡便的胰島分離方法,分離的胰島細胞數(shù)量多、純度高及活性好。
【作者單位】: 復(fù)旦大學(xué)附屬上海市第五人民醫(yī)院內(nèi)分泌科;
【關(guān)鍵詞】SD大鼠 胰島細胞培養(yǎng) 胰島素
【基金】:上海市衛(wèi)生局青年基金(2010Y042) 閔行區(qū)科委自然基金(2010MHZ026)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 前言隨著社會的發(fā)展,人們飲食習(xí)慣及環(huán)境的改變,糖尿病的發(fā)病率日益升高,與心腦血管疾病和惡性腫瘤一起成為嚴重威脅人類健康的重大難題,目前臨床對于糖尿病的治療沒有特別有效的方法,多數(shù)為飲食控制、運動降糖,同時給予藥物刺激胰島分泌胰島素或者補充人工合成的胰島素,胰島

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 侯續(xù)偉;尹波;任甫;;SD大鼠胰島的分離純化及培養(yǎng)[J];解剖科學(xué)進展;2011年02期

2 李永翔;李戈;董維平;陳靜;盧大儒;譚建明;;大鼠胰島分離純化技術(shù)的改進[J];復(fù)旦學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2006年02期

3 劉定志;杜成友;羅詩樵;肖衡;潘龍;;三種消化酶分離胰島對移植胰島存活的影響[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2012年05期

4 范宇;石炳毅;錢葉勇;杜源;;膠原酶消化時間及質(zhì)量濃度對大鼠胰島細胞分離的影響[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2009年20期

5 李s,

本文編號:802193


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