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包裝重組腺病毒Adncam1及其體外轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細(xì)胞

發(fā)布時間:2017-09-06 03:24

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【摘要】:目的構(gòu)建腺病毒載體,將目的基因NCAM1轉(zhuǎn)染入神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)。方法制備重組質(zhì)粒,完成后與大骨架質(zhì)粒結(jié)合對293A細(xì)胞轉(zhuǎn)染,包裝成重組腺病毒載體Adncam1。對進(jìn)行兩次擴增,并檢測滴度值。利用Adncam1轉(zhuǎn)染NSCs,轉(zhuǎn)染后應(yīng)用QPCR、Western blot對NSCs中的NCAM1進(jìn)行過表達(dá)鑒定。結(jié)果Adncam1包裝成功,兩次擴增后,檢測滴度值為1×1010 PFU/m L。Adncam1對NSCs轉(zhuǎn)染效果明顯。進(jìn)行過表達(dá)鑒定,QPCR檢測Adncam1轉(zhuǎn)染效果為對照轉(zhuǎn)染的15倍以上,Western blot檢測轉(zhuǎn)染效果為3倍以上。結(jié)論重組腺病毒Ad Ncam1成功的將目的基因NCAM1轉(zhuǎn)入NSCs。
【作者單位】: 佳木斯大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;佳木斯大學(xué)附屬二院;
【關(guān)鍵詞】神經(jīng)細(xì)胞黏附分子 神經(jīng)干細(xì)胞 腺病毒包裝 基因轉(zhuǎn)染
【基金】:黑龍江省自然科學(xué)基金項目(C201212)
【分類號】:R3416
【正文快照】: 隨著全球人口老齡化的到來,各種老年性退行性病變明顯增加,但中樞神經(jīng)系統(tǒng)在損傷和退行性變后的自身修復(fù)能力是有限的。神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cells,NSCs)被公認(rèn)為修復(fù)神經(jīng)系統(tǒng)損傷最理想種子,可以直接或間接替代受損的神經(jīng)細(xì)胞和組織,重建神經(jīng)網(wǎng)絡(luò),部分恢復(fù)已尚失的神經(jīng)功

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本文編號:801889

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