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大鼠腦中催產素受體cDNA的克隆和在大腸桿菌與CHO細胞內的表達

發(fā)布時間:2025-01-18 16:37
  <正> 目的:克隆腦中OTR cDNA編碼區(qū)全長,探討腦內OTR的結構、功能和及OT-OTR的作用機制。方法:①采用RT-PCR方法從大鼠外周和中樞神經組織中同時克隆OTR的cDNA編碼區(qū)全長,獲得OTRcDNA;②利用pET-28-α載體構建OTR全長與His tag融合蛋白原核表達載體:pET-28-α-OTR;利用PGEX-4T-3載體構建了OTR不同結構域與GST(GlutathioneS-Transferase,谷胱甘肽-S轉移酶)的融合蛋白表達載體,并在大腸桿菌表達株BL21內進行了這些重組質粒的誘導表達研究;③利用細胞培養(yǎng)和真核轉染技術,建立穩(wěn)定表

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