在前期研究中，本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建了人睪丸cDNA基因芯片(包含9216個(gè)克隆)，并用以篩選成人及胚胎睪丸的差異表達(dá)基因，構(gòu)建了睪丸發(fā)育／精子發(fā)生相關(guān)的基因表達(dá)譜系。其中有266個(gè)基因在成人睪丸高表達(dá)，我們認(rèn)為其主要為精子發(fā)生相關(guān)基因。本研究中，用人精子cDNA探針與人睪九cDNA芯片進(jìn)行雜交，分析266個(gè)成人睪丸高表達(dá)的基因在精子中的表達(dá)情況，結(jié)果顯示，有149個(gè)基因在精子中有表達(dá)。依其功能對(duì)這些基因進(jìn)行了分類，構(gòu)建了人精子生精相關(guān)基因表達(dá)譜系。 對(duì)譜系中的6個(gè)基因用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)其在精子中的表達(dá)量，以驗(yàn)證芯片雜交結(jié)果，結(jié)果顯示，TPX-1，ODF2，AKAP4，PAFAH1B1，LDHC及CLGN這6個(gè)在芯片中雜交強(qiáng)度呈降序排列的基因，在用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)中，除了AKAP4外，其余5個(gè)基因均得出相同的結(jié)果，說(shuō)明TaqMan技術(shù)得到了與芯片雜交一致的結(jié)果。 分別收集正常(n=29)及弱精癥男性(n=24)精液標(biāo)本，定量檢測(cè)譜系中5個(gè)精子運(yùn)動(dòng)相關(guān)基因(TPX-1，ODF2，AKAP4，LDH及CLGN)在各精子標(biāo)本中的表達(dá)量后，經(jīng)...

【文章頁(yè)數(shù)】：110 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
一、 材料和方法
    實(shí)驗(yàn)材料
    實(shí)驗(yàn)方法
二、 結(jié)果
三、 討論
四、 小結(jié)
五、 參考文獻(xiàn)
附錄1: LDHL基因的克隆及初步研究
    中文摘要
    英文摘要
    前言
    一、 材料和方法
    二、 結(jié)果與討論
    三、 小結(jié)
    四、 參考文獻(xiàn)
附錄2: tsIQGAP2基因的克隆及初步研究
    中文摘要
    英文摘要
    前言
    一、 材料和方法
    二、 結(jié)果與討論
    三、 小結(jié)
    四、 參考文獻(xiàn)
文章
    1 A spermatogenesis-related gene expression profile in human spermatozoa and its potential clinical applications. J Mol Med. 2004 Feb 24 [Epub ahead of print]
    2 Cloning and characterization of a novel intronless human lactate dehydrogenase gene from adult testis. Submit to Journal of Reproductive Medicine
    3 Cloning and characterization of a novel isoform of IQGAP2 in human testis. DNA Sequence, revised
綜述: 精子中mRNA的研究及意義，國(guó)外醫(yī)學(xué)計(jì)劃生育分冊(cè)2003年第22卷第一期P.5-8
致謝



本文編號(hào)：4025202