弓形蟲(Toxoplasma gondii)是嚴(yán)重危害人類健康的機(jī)會(huì)致病性寄生蟲。目前，弓形蟲病研究的兩大熱點(diǎn)仍然是尋找敏感性高、特異性強(qiáng)的診斷抗原和有效的候選疫苗分子，基因重組技術(shù)為該研究提供了可行之路。已知生物體進(jìn)化過程中，14-3-3家族是一組真核細(xì)胞表達(dá)的保守蛋白，細(xì)胞內(nèi)五十多種信號(hào)蛋白是其配體，通過結(jié)合激酶、磷酸酶、跨膜受體等多種配體成為信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞周期調(diào)控介質(zhì)。本課題從弓形蟲分裂增殖生命活動(dòng)重要環(huán)節(jié)——細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑尋找重組診斷和候選疫苗分子。根據(jù)GenBank收錄的弓形蟲Beverley株貓腸上皮細(xì)胞期信號(hào)蛋白14-3-3 mRNA序列，設(shè)計(jì)并合成引物，RT-PCR，擴(kuò)增出RH株速殖子14-3-3(Toxo14-3-3)基因，克隆入pGEM-T載體，經(jīng)酶切和PCR法鑒定及DNA測(cè)序證實(shí)；Toxo14-3-3具有一個(gè)長(zhǎng)度為798bp的完整開放閱讀框(ORF)，編碼265個(gè)氨基酸，理論分子量31KDa，與GenBank收錄(編號(hào)為ABO12775)的弓形蟲14-3-3基因完全一致；將目的基因亞克隆入雙表達(dá)質(zhì)粒pBK-CMV、轉(zhuǎn)化宿主菌E.coliXL-1 blue，獲得pB...

【文章頁(yè)數(shù)】：40 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷
致謝
綜述
附： 英文縮寫



本文編號(hào)：4013152