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Orexin A對大鼠額葉皮質錐體細胞興奮性的影響

發(fā)布時間:2024-11-24 21:55
  Orexin(ORX)是1998年發(fā)現(xiàn)的一種來自側下丘腦區(qū)(LHA)具有神經(jīng)興奮作用的多肽。Orexin系統(tǒng)包括來自同一基因轉錄產(chǎn)物的二個單體(ORX-A和B)及其對應的兩個G蛋白偶聯(lián)受體(OX1R和OX2R)。大量證據(jù)發(fā)現(xiàn)側下丘腦orexin系統(tǒng)對覺醒-睡眠周期的調控起關鍵作用。目前對orexin促覺醒作用的研究主要集中于皮層下(腦干、下丘腦內)的覺醒睡眠調節(jié)區(qū)如藍斑核、背縫核、結節(jié)狀乳頭體核、及腦橋腳核等結構,而對側下丘腦的orexin與皮層本身的關系研究極少。形態(tài)學證據(jù)顯示側下丘腦的orexin纖維和受體廣泛分布于大腦皮層尤其是額葉皮質的Ⅴ、Ⅵ層。臨床研究發(fā)現(xiàn)發(fā)作性睡病患者大腦皮質的orexin纖維有選擇性的丟失。迄今為止,側下丘腦的orexin是否具有直接興奮大腦皮質功能未見文獻報道。 本實驗以急性分離Wistar大鼠額葉皮質(frontal cortex, FCX)錐體細胞為研究對象,采用膜片鉗全細胞記錄技術,觀察了FCX錐體細胞的基本電生理特性;orexin A對其興奮性的影響及其離子機制;orexin A對谷氨酸和GABA介導的興奮作用的影響。藉此探討or...

【文章頁數(shù)】:63 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1額葉皮質(FCX)的部位及取材位置(方框內)

圖1額葉皮質(FCX)的部位及取材位置(方框內)

、AP5(50mM)、和CNQX(10me,0.002761gCNOX,0.009855gml雙蒸水中,0℃以下保存?zhèn)溆梅蛛x取腦,置入混和氣(95%O2,5%C端(2~4mm)按冠狀面切成約30ACSF中孵育1h以上;在1g次,在深色背景下分出額葉皮....


圖3細胞封接過程中測試方波的變化過程:由上到下為記錄電極分別在溶液中、接近細胞、進一步靠近細胞、形成giga封接及破膜后形成全細胞膜片鉗的波形

圖3細胞封接過程中測試方波的變化過程:由上到下為記錄電極分別在溶液中、接近細胞、進一步靠近細胞、形成giga封接及破膜后形成全細胞膜片鉗的波形

則可打破電極尖端的細胞膜,使細胞內液與電極內液相通,形成所謂的“全細胞膜片”(圖3“gowholecell”),這時記錄方式即是全細胞記錄。圖2膜片鉗記錄系統(tǒng)示意圖灌流槽


圖5在系列由超極化到去極化的躍階電流(-60<sup>+</sup>40pA,step=10,時長100ms)

圖5在系列由超極化到去極化的躍階電流(-60+40pA,step=10,時長100ms)

第三軍醫(yī)大學碩士學位論文記錄方式下,0.1mM的GABA使細胞膜發(fā)生超極化伴自發(fā)性)。加藥裝置的可靠性,排除因其它因素對神經(jīng)元造成假陽性結果鹽水或正常ACSF以作對照,結果膜電位和放電頻率均未見


圖6在系列由超極化到去極化的躍階電流(-60<sup>+</sup>40pA,step=10,時長200ms)刺激下,F(xiàn)CX錐體細胞產(chǎn)生的動作電位數(shù)目增多

圖6在系列由超極化到去極化的躍階電流(-60+40pA,step=10,時長200ms)刺激下,F(xiàn)CX錐體細胞產(chǎn)生的動作電位數(shù)目增多

5在系列由超極化到去極化的躍階電流(-60<sup>+</sup>40pA,step=10,時長100ms刺激下,F(xiàn)CX錐體細胞產(chǎn)生動作電位



本文編號:4012524

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