RTCA實時定量動態(tài)監(jiān)測HCMV在MRC-5細(xì)胞上的增殖的研究
發(fā)布時間:2017-05-01 03:08
本文關(guān)鍵詞:RTCA實時定量動態(tài)監(jiān)測HCMV在MRC-5細(xì)胞上的增殖的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的采用實時細(xì)胞分析(RTCA)系統(tǒng)監(jiān)測人巨細(xì)胞病毒(HCMV)在MRC-5細(xì)胞株上的復(fù)制增殖過程,評價此方法在動態(tài)監(jiān)測病毒增殖中的應(yīng)用價值。方法應(yīng)用RTCA動態(tài)觀察MRC-5細(xì)胞在不同階段的生長指數(shù)(CI),選擇合適的細(xì)胞濃度進(jìn)行HCMV增殖的研究,同時采用傳統(tǒng)的空斑形成試驗和間接免疫熒光實驗作為該方法學(xué)的比較和結(jié)果驗證。結(jié)果選擇MRC-5最適細(xì)胞濃度為0.5×105個/孔;與空斑試驗及免疫熒光結(jié)果比較,半數(shù)細(xì)胞指數(shù)CI值對應(yīng)時間(CIT50)與病毒初始滴度有良好的線性關(guān)系;同時CI值與病毒滴度隨著時間的持續(xù),顯示出明顯的負(fù)相關(guān)性(r=-0.977,P0.05)。結(jié)論 RTCA技術(shù)可實時監(jiān)測記錄細(xì)胞生長狀態(tài),反應(yīng)細(xì)胞貼壁、伸展,同時能實時定量監(jiān)測HCMV增殖復(fù)制狀況,數(shù)據(jù)客觀可靠,為今后基礎(chǔ)實驗研究提供了新的實驗技術(shù)和方法。
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學(xué)微生物學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】: 實時細(xì)胞檢測技術(shù) 人巨細(xì)胞病毒 增殖
【基金】:國家自然科學(xué)基金(編號:30872253) 安徽高校省級自然科學(xué)研究項目(編號:KJ2012ZD08)
【分類號】:R511
【正文快照】: 2016-02-22接收人巨細(xì)胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)屬于皰疹病毒β亞科,是皰疹病毒科中最大的一種病毒,結(jié)構(gòu)復(fù)雜,基因組全長超過240 000 bp,病毒顆粒的直徑約為200 nm。據(jù)報道,發(fā)達(dá)國家HCMV的成人平均感染率為40%~60%,而發(fā)展中國家高達(dá)到90%以上[1]。目前該病毒還被認(rèn)
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本文編號:338097
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