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Nogo-A、NgR和RhoA在未成熟大鼠少突膠質(zhì)前體系細胞的表達和缺氧后的表達變化及意義

發(fā)布時間:2021-07-13 04:05
  目的:獲取高純度的少突膠質(zhì)前體細胞系,并作鑒定,為進一步研究作細胞準備。方法:出生2日齡的SD大鼠,無菌條件下斷頭取腦,剔除腦膜及血管。根據(jù)星形膠質(zhì)細胞和少突膠質(zhì)前體細胞系生長的時間差異,細胞的粘附特性不同,利用振蕩分離純化法獲得純化的大鼠少突膠質(zhì)前體細胞,再用添加了N2、PDGF、bFGF的無血清培養(yǎng)基傳代培養(yǎng)。分別用少突膠質(zhì)前體細胞系不同發(fā)育階段的特異性抗體:A285、O4、O1,采用免疫熒光法對表面抗原進行細胞鑒定。結(jié)果:獲得純度95%以上的未成熟SD大鼠少突膠質(zhì)前體細胞,少突膠質(zhì)祖細胞A285、O4抗體陽性;未成熟少突膠質(zhì)細胞O4、O1陽性。結(jié)論:通過振蕩分離純化法及結(jié)合少突膠質(zhì)細胞定向培養(yǎng)基是培養(yǎng)少突膠質(zhì)前體細胞的可靠方法;N2、PDGF、bFGF的添加可以顯著提高細胞的產(chǎn)量,并使細胞保持在未成熟階段。目的:建立未成熟大鼠少突膠質(zhì)前體系細胞缺氧缺糖損傷模型,并觀察缺氧不同時間點細胞的變化。方法:體外分離純化培養(yǎng)未成熟SD大鼠少突膠質(zhì)前體細胞系(OLPs)并鑒定(同第一部分)。缺氧缺糖模型組(oxygen&glucosedeprivation,OGD)選擇A285或O4... 

【文章來源】:四川大學四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:140 頁

【學位級別】:博士

【部分圖文】:

Nogo-A、NgR和RhoA在未成熟大鼠少突膠質(zhì)前體系細胞的表達和缺氧后的表達變化及意義


電鏡下:正常膠質(zhì)細胞

Nogo-A、NgR和RhoA在未成熟大鼠少突膠質(zhì)前體系細胞的表達和缺氧后的表達變化及意義


腦60min30min10min對照

缺氧缺糖,胞體,缺氧損傷,細胞突起


增強;部分細胞突起近端可見弱陽性表達(圖13);缺氧損傷后3Omin及60min,NgR在oLPS的胞體及突起的陽性表達進一步增強(細胞突起的近端及遠端均可見綠色熒光)(圖14,15);缺氧損傷后90min,NgR在OLPs

【參考文獻】:
期刊論文
[1]大鼠脊髓來源神經(jīng)干細胞NgR的表達[J]. 王豐,朱悅.  中國醫(yī)科大學學報. 2006(05)
[2]龍血竭總黃酮對乳鼠損傷心肌細胞的保護作用[J]. 鄧嘉元,李運曼,方偉蓉.  中國天然藥物. 2006(05)
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[6]新生大鼠高純度少突膠質(zhì)前體細胞系細胞的培養(yǎng)與鑒定:改良振蕩分離純化法的特點[J]. 殷紅兵,丁愛石,吳衛(wèi)平,范明.  中國臨床康復. 2005(17)
[7]比較豬去氧膽酸與;切苋パ跄懣股窠(jīng)細胞缺氧缺糖再給氧損傷的作用[J]. 張壯,閆彥芳,孫塑倫,何麗云,王碩仁,朱陵群,牛福玲.  中國臨床康復. 2005(17)
[8]連二亞硫酸鈉在建立培養(yǎng)細胞的無氧環(huán)境中的應用[J]. 許蜀閩,王培勇,馬紅英.  第三軍醫(yī)大學學報. 2005(04)
[9]Nogo受體(N-20)在大鼠視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜的表達[J]. 雷季良,陳白羽,欒麗菊,楊磊,王珂,楊立元,于恩華.  神經(jīng)解剖學雜志. 2004(05)
[10]Nogo-66受體在成年大鼠脊髓白質(zhì)內(nèi)膠質(zhì)細胞的分布[J]. 胡澤嵐,劉瑩瑩,金衛(wèi)林,劉惠玲,鞠躬.  第四軍醫(yī)大學學報. 2004(16)



本文編號:3281307

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