目的：獲取高純度的少突膠質(zhì)前體細胞系，并作鑒定，為進一步研究作細胞準備。方法：出生2日齡的SD大鼠，無菌條件下斷頭取腦，剔除腦膜及血管。根據(jù)星形膠質(zhì)細胞和少突膠質(zhì)前體細胞系生長的時間差異，細胞的粘附特性不同，利用振蕩分離純化法獲得純化的大鼠少突膠質(zhì)前體細胞，再用添加了N2、PDGF、bFGF的無血清培養(yǎng)基傳代培養(yǎng)。分別用少突膠質(zhì)前體細胞系不同發(fā)育階段的特異性抗體：A285、O4、O1，采用免疫熒光法對表面抗原進行細胞鑒定。結(jié)果：獲得純度95％以上的未成熟SD大鼠少突膠質(zhì)前體細胞，少突膠質(zhì)祖細胞A285、O4抗體陽性；未成熟少突膠質(zhì)細胞O4、O1陽性。結(jié)論：通過振蕩分離純化法及結(jié)合少突膠質(zhì)細胞定向培養(yǎng)基是培養(yǎng)少突膠質(zhì)前體細胞的可靠方法；N2、PDGF、bFGF的添加可以顯著提高細胞的產(chǎn)量，并使細胞保持在未成熟階段。目的：建立未成熟大鼠少突膠質(zhì)前體系細胞缺氧缺糖損傷模型，并觀察缺氧不同時間點細胞的變化。方法：體外分離純化培養(yǎng)未成熟SD大鼠少突膠質(zhì)前體細胞系（OLPs）并鑒定（同第一部分）。缺氧缺糖模型組（oxygen&glucosedeprivation，OGD）選擇A285或O4... 

【文章來源】：四川大學(xué)四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：140 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

電鏡下:正常膠質(zhì)細胞

腦60min30min10min對照

增強;部分細胞突起近端可見弱陽性表達(圖13);缺氧損傷后3Omin及60min，NgR在oLPS的胞體及突起的陽性表達進一步增強(細胞突起的近端及遠端均可見綠色熒光)(圖14，15);缺氧損傷后90min，NgR在OLPs

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3281307