目的：觀察小鼠周圍神經(jīng)髓鞘雪旺細(xì)胞（Schwann cells，SC）和Wistar大鼠腦源性神經(jīng)干細(xì)胞（Neural stem cells，NSC）體外共培養(yǎng)時(shí)兩者的相容性，分析SC對(duì)NSC的存活、增殖以及分化調(diào)控的影響；初步探討SC對(duì)NSC新生軸突髓鞘化的作用以及對(duì)各新生神經(jīng)細(xì)胞之間突觸建立的影響。 方法：獲取出生3d的小鼠坐骨神經(jīng)和臂叢神經(jīng)，采用組織塊法分離、培養(yǎng)SC，一周后采用雙30分鐘差速貼壁粘附離心法純化SC，去除培養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)的成纖維細(xì)胞及其他細(xì)胞并擴(kuò)大培養(yǎng)；3周后進(jìn)行S100免疫組化鑒定。取新生1天的Wistar大鼠，體外分離鼠腦NSC，采用常規(guī)懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法培養(yǎng)NSC，對(duì)第一代和培養(yǎng)3代后的NSC進(jìn)行Nestin免疫組化染色鑒定。然后進(jìn)行小鼠SC與大鼠NSC的混合培養(yǎng)，混合培養(yǎng)分為5組進(jìn)行：實(shí)驗(yàn)組Ⅰ：NSC懸浮+SC懸浮+DMEM／F12；實(shí)驗(yàn)組Ⅱ：NSC懸浮+SC貼壁+DMEM／F12；對(duì)照組Ⅰ：SC培養(yǎng)基+NSC+DMEM／F12；對(duì)照組Ⅱ：EGF／bFGF+NSC+DMEM／F12；對(duì)照組Ⅲ：NSC+DMEM／F12+EGF。各組按照常規(guī)細(xì)胞培...

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
目錄
摘要
    1 中文摘要
    2 Abstract
前言
材料和方法
    1 實(shí)驗(yàn)材料和器械
        1.1 細(xì)胞培養(yǎng)基
        1.2 手術(shù)器械
        1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 小鼠SC的分離、培養(yǎng)、純化與鑒定
        2.2 乳鼠NSC的培養(yǎng)、純化、誘導(dǎo)分化與鑒定
        2.3 小鼠SC與大鼠NSC的混合培養(yǎng)
結(jié)果
    1 小鼠SC的原代培養(yǎng)
    2 Wistar大鼠腦NSC的培養(yǎng)
    3 共培養(yǎng)結(jié)果
討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述 脊髓損傷與自身免疫的研究進(jìn)展
致謝
附圖



本文編號(hào)：4008849