熒光標(biāo)記抗狂犬病病毒核蛋白單克隆抗體的制備及初步應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2021-07-13 03:44
抗狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)核蛋白熒光抗體具有價(jià)格昂貴、保質(zhì)期短和購(gòu)買周期長(zhǎng)等缺點(diǎn),非常不利于各級(jí)疾病預(yù)防控制系統(tǒng)對(duì)該試劑的緊急使用。作為國(guó)家狂犬病實(shí)驗(yàn)室,亟需研發(fā)具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的異硫氰酸熒光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)標(biāo)記抗RABV核蛋白單克隆抗體(Monoclonal antibody,MAb),并且商品化,使其廣泛應(yīng)用于流行病學(xué)調(diào)查和實(shí)驗(yàn)室的病原學(xué)和血清學(xué)診斷,實(shí)現(xiàn)國(guó)家狂犬病監(jiān)測(cè)和檢測(cè)相關(guān)試劑的標(biāo)準(zhǔn)化,從而為我國(guó)狂犬病防控提供技術(shù)支持。制備FITC標(biāo)記的抗RABV核蛋白MAb,并將其初步應(yīng)用于直接免疫熒光實(shí)驗(yàn)(Direct fluorescent assay,DFA)和快速熒光灶抑制試驗(yàn)(Rapid fluorescent focus inhibition test,RFFIT)。將本實(shí)驗(yàn)室制備的抗RABV核蛋白MAb 3B12進(jìn)行FITC標(biāo)記,通過DFA確定熒光標(biāo)記抗體(FITC--3B12)工作濃度,以市售FITC標(biāo)記MAb作為陽(yáng)性對(duì)照,對(duì)狂犬病相關(guān)臨床樣本進(jìn)行DFA和RFFIT檢測(cè)。DFA實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,FITC...
【文章來源】:病毒學(xué)報(bào). 2019,35(03)北大核心CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
【文章目錄】:
材料與方法
1細(xì)胞、病毒
2腦組織及血清樣本
3單克隆抗體
4主要試劑
5 3B12的純化和標(biāo)記
6 FITC標(biāo)記3B12工作濃度的測(cè)定
7腦組織樣本的DFA檢測(cè)
8血清樣本的RFFIT檢測(cè)
結(jié)果
1 3B12的FITC標(biāo)記及工作濃度確定
2 FITC-3B12應(yīng)用于DFA檢測(cè)
3 FITC-3B12用于RFFIT檢測(cè)
4 FITC-3B12用于RFFIT重復(fù)性檢測(cè)
討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]腹水型單克隆抗體純化方法的研究[J]. 肖增鴻,黃昭亮,林月霞,董斌,田素娟. 中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù). 2013(06)
[2]Establishment and Preliminary Application of a Rapid Fluorescent Focus Inhibition Test (RFFIT) for Rabies Virus[J]. Pengcheng Yu,Xinjun Lv,Xinxin Shen,Qing Tang,Guodong Liang. Virologica Sinica. 2013(04)
[3]Preparation and Identification of Anti-rabies Virus Monoclonal Antibodies[J]. Wen-juan Wang1,2, Xiong Li3, Li-hua Wang2, Hu Shan1, Lei Cao2, Peng-cheng Yu2, Qing Tang2** and Guo-dong Liang2 (1. College of Animal Science and Veterinary Medicine, Qingdao Agricultural university, Qingdao 266109, China; 2. State Key Laboratory for Infectious Disease Prevention and Control, Institute for Viral Disease Control and Prevention, Chinese Center for Disease Control and Prevention, Beijing 102206, China; 3. Xinjiang Center for Disease Control and Prevention, Xinjiang 830001, China). Virologica Sinica. 2012(03)
[4]單克隆抗體純化的研究進(jìn)展[J]. 唐佳佳,李小兵,劉國(guó)文,孔濤,劉磊,楊威,王哲. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2011(02)
[5]抗狂犬病毒核蛋白熒光標(biāo)記抗體的制備和初步鑒定[J]. 嚴(yán)家新,祝玉桃,李承平,徐葛林,朱家鴻. 中國(guó)人獸共患病雜志. 2000(05)
[6]FITC標(biāo)記的抗Brdu單克隆抗體的研制[J]. 徐志偉,鄧?guó)櫂I(yè),韓淑紅,鄧玉蘭,黃大無,丁桂鳳. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2000(02)
[7]小鵝瘟免疫熒光診斷方法的研究[J]. 潘玉民,董玉平,石全瑞,辛英. 中國(guó)獸醫(yī)科技. 1990(10)
本文編號(hào):3281270
【文章來源】:病毒學(xué)報(bào). 2019,35(03)北大核心CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
【文章目錄】:
材料與方法
1細(xì)胞、病毒
2腦組織及血清樣本
3單克隆抗體
4主要試劑
5 3B12的純化和標(biāo)記
6 FITC標(biāo)記3B12工作濃度的測(cè)定
7腦組織樣本的DFA檢測(cè)
8血清樣本的RFFIT檢測(cè)
結(jié)果
1 3B12的FITC標(biāo)記及工作濃度確定
2 FITC-3B12應(yīng)用于DFA檢測(cè)
3 FITC-3B12用于RFFIT檢測(cè)
4 FITC-3B12用于RFFIT重復(fù)性檢測(cè)
討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]腹水型單克隆抗體純化方法的研究[J]. 肖增鴻,黃昭亮,林月霞,董斌,田素娟. 中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù). 2013(06)
[2]Establishment and Preliminary Application of a Rapid Fluorescent Focus Inhibition Test (RFFIT) for Rabies Virus[J]. Pengcheng Yu,Xinjun Lv,Xinxin Shen,Qing Tang,Guodong Liang. Virologica Sinica. 2013(04)
[3]Preparation and Identification of Anti-rabies Virus Monoclonal Antibodies[J]. Wen-juan Wang1,2, Xiong Li3, Li-hua Wang2, Hu Shan1, Lei Cao2, Peng-cheng Yu2, Qing Tang2** and Guo-dong Liang2 (1. College of Animal Science and Veterinary Medicine, Qingdao Agricultural university, Qingdao 266109, China; 2. State Key Laboratory for Infectious Disease Prevention and Control, Institute for Viral Disease Control and Prevention, Chinese Center for Disease Control and Prevention, Beijing 102206, China; 3. Xinjiang Center for Disease Control and Prevention, Xinjiang 830001, China). Virologica Sinica. 2012(03)
[4]單克隆抗體純化的研究進(jìn)展[J]. 唐佳佳,李小兵,劉國(guó)文,孔濤,劉磊,楊威,王哲. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2011(02)
[5]抗狂犬病毒核蛋白熒光標(biāo)記抗體的制備和初步鑒定[J]. 嚴(yán)家新,祝玉桃,李承平,徐葛林,朱家鴻. 中國(guó)人獸共患病雜志. 2000(05)
[6]FITC標(biāo)記的抗Brdu單克隆抗體的研制[J]. 徐志偉,鄧?guó)櫂I(yè),韓淑紅,鄧玉蘭,黃大無,丁桂鳳. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2000(02)
[7]小鵝瘟免疫熒光診斷方法的研究[J]. 潘玉民,董玉平,石全瑞,辛英. 中國(guó)獸醫(yī)科技. 1990(10)
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