目的樹突狀細(xì)胞（dendritic cells, DCs）是體內(nèi)唯一能夠激活初始T細(xì)胞的抗原提呈細(xì)胞,它是免疫反應(yīng)的樞紐。動脈粥樣硬化（atherosclerosis,As）是一種脂質(zhì)相關(guān)的慢性免疫炎癥性疾病。近年來研究顯示,DCs可能影響As的起始和進(jìn)展。已證明多種與As相關(guān)的抗原物質(zhì)可誘導(dǎo)DCs的成熟,而DCs的成熟是其作用完全發(fā)揮的必要條件。本實驗從C57BL/6J小鼠骨髓中分離培養(yǎng)DCs,研究LDL和HDL發(fā)生氧化后,對DCs趨化作用和成熟活化的影響;確定oxLDL和oxHDL作為自身抗原,引起DCs的遷移和成熟活化,導(dǎo)致局部的免疫反應(yīng)和As的起始。方法頸椎脫位法處死C57BL/6J小鼠,取股骨和脛骨,剔除周圍肌肉,離斷干骺端后,用注射器吸取RPMI-1640培養(yǎng)液沖洗骨髓腔,獲得單細(xì)胞懸液。利用動物樹突狀細(xì)胞專用分離液和細(xì)胞黏附性差異去除大部分巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞,用rmGM-CSF和rmIL-4誘導(dǎo)單個核細(xì)胞向DCs分化,并抑制淋巴細(xì)胞生長。隔天半量換液,補足所需細(xì)胞因子和培養(yǎng)液,培養(yǎng)至第7天,輕輕吹打收獲,即為未成熟的骨髓源性樹突狀細(xì)胞（bonemarrow derived... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

LDL、oxLDL、HDL、oxHDL瓊脂糖凝膠電泳LDL、HDL在含200μm/LCuSO4的PBS中，于37℃氧化至顏色由橙黃色轉(zhuǎn)變?yōu)槿榘咨?.8％

圖 2：BMDCs 普通光鏡（10×）、HE 染色（100×）和掃描電鏡：圖 A，培養(yǎng)至第 3 天的骨髓細(xì)胞；圖 B，培養(yǎng)至第 7 天未成熟的l LPS 刺激成熟的 BMDCs；圖 D，未成熟的 BMDCs。掃描電鏡：DCs；圖 F，未成熟的 BMDCs。光染色小鼠 DCs 特有分子標(biāo)志 33D1 和成熟分子標(biāo)志 CD

圖 3：33D1 和 CD11c 免疫熒光染色（FITC，20×）1、1a 分別是同一視野內(nèi) BMDCs 及其 33D1 免疫熒光染色；2、2a 分別是同一視野內(nèi) LPS 刺激后的 BMDCs 及其 33D1 免疫熒光染色；3、3a 分別是同一視野內(nèi) BMDCs 及其 CD11c 免疫熒光染色；4、4a 分別是同一視野內(nèi) LPS 刺激后的 BMDCs 及其 CD11c 免疫熒光染色。 oxLDL 和 oxHDL 對 BMDCs 的趨化作用


本文編號：3116405