發(fā)布時間：2024-07-05 01:30

　　目的:探討透明質(zhì)酸合成酶2(HAS2)基因在多囊卵巢綜合征(PCOS)大鼠表達及RNA干擾其表達對卵巢顆粒細(xì)胞活力、凋亡及免疫抑制因子TGF-β1和VEGF表達的影響。方法:建立DHEA致雌性SD大鼠PCOS模型,Western blot檢測PCOS大鼠卵巢組織中HAS2的蛋白表達;培養(yǎng)原代PCOS大鼠卵巢顆粒細(xì)胞,將合成的靶向抑制HAS2表達的siRNA轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,Western blot檢測轉(zhuǎn)染效果及轉(zhuǎn)染后48 h各組細(xì)胞中免疫抑制因子TGF-β1、VEGF和NF-κB信號通路相關(guān)蛋白的表達。CCK8及流式細(xì)胞儀分別檢測細(xì)胞活力和凋亡率。結(jié)果:HAS2在PCOS大鼠卵巢組織中高表達,轉(zhuǎn)染si-HAS2的大鼠卵巢顆粒細(xì)胞中HAS2的表達顯著低于NC組和對照組(P <0. 05);與NC組比較,si-HAS2組細(xì)胞活力顯著降低,凋亡率增加,TGF-β1、VEGF及NF-κB信號通路p-NF-κB、p-IκBα和下游cyclin D1、survivin的蛋白表達均顯著降低(P <0. 05)。結(jié)論:HAS2在PCOS大鼠卵巢組織中高表達,抑制大鼠卵巢顆粒細(xì)胞中HAS2表達可...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 PCOS大鼠模型卵巢組織采集
        1.2.2 Western blot檢測兩組卵巢組織中HAS2的表達
        1.2.3 卵巢顆粒細(xì)胞的獲取
        1.2.4 分組及siRNA轉(zhuǎn)染
        1.2.5 CCK8檢測細(xì)胞活力
        1.2.6 流式細(xì)胞儀檢測凋亡
        1.2.7 TGF-β1、VEGF、p-NF-κB、p-IκB、cyclin D1和survivin蛋白表達檢測
    1.3 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 HAS2在PCOS大鼠卵巢組織的表達
    2.2 si-HAS2轉(zhuǎn)染大鼠卵巢顆粒細(xì)胞的效果
    2.3 si-HAS2轉(zhuǎn)染對大鼠卵巢顆粒細(xì)胞活力及凋亡的影響
    2.4 si-HAS2轉(zhuǎn)染對大鼠卵巢顆粒細(xì)胞免疫因子表達的影響
    2.5 si-HAS2轉(zhuǎn)染對大鼠卵巢顆粒細(xì)胞NF-κB信號通路的影響
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