目的構(gòu)建炭疽芽胞桿菌A16R株sigB基因缺失突變株,通過(guò)分析其表型,為后續(xù)的炭疽桿菌生命過(guò)程展開系統(tǒng)性研究奠定基礎(chǔ)。方法采用同源重組技術(shù)以sigB為目標(biāo)缺失基因,利用Golden-gate法構(gòu)建含同源臂的打靶載體,結(jié)合基于I-SceⅠ酶驅(qū)動(dòng)的芽胞菌高效敲除體系,篩選出炭疽桿菌sigB缺失突變株。通過(guò)生長(zhǎng)曲線繪制、芽胞形成率測(cè)定、糖代謝能力比較,以及抗逆性實(shí)驗(yàn)等進(jìn)行表型分析研究。結(jié)果成功構(gòu)建了炭疽桿菌sigB缺失突變株,發(fā)現(xiàn)SigB對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)能力、芽胞形成率和糖代謝能力均無(wú)顯著影響。在抗逆性實(shí)驗(yàn)中,經(jīng)不同濃度H₂O₂作用下,與野生株相比,sigB缺失突變株抑菌環(huán)無(wú)明顯差異。經(jīng)過(guò)48與55℃處理后,與A16R野生株比較,sigB缺失突變株菌落數(shù)減少,說(shuō)明sigB缺失突變株抗熱性減弱。結(jié)論成功獲得了炭疽桿菌sigB基因缺失突變株。該研究表明SigB不影響芽胞形成,對(duì)細(xì)菌的抗熱性有顯著影響。 

【文章來(lái)源】：軍事醫(yī)學(xué). 2019,43(01)北大核心

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3115827