HCMV先天性潛伏感染Balb/c老年小鼠IRP與AD樣病理改變的相關(guān)性研究
發(fā)布時間：2021-03-27 12:31
目的在已建立的HCMV先天性中樞神經(jīng)系統(tǒng)潛伏感染Balb/c老年小鼠模型的基礎(chǔ)上,評價老年模型小鼠的免疫風險表型（IRP）,同時觀察大腦皮質(zhì)的阿爾茨海默病（AD）樣病理改變,初步探討HCMV先天性潛伏感染老年Balb/c小鼠免疫功能改變與AD發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性。方法隨機選取HCMV先天性潛伏感染組（A組）、HCMV先天性潛伏感染再激活組（B組）及HF細胞對照組（C組）2426月齡老年雌性小鼠各6只,眼眶取血并引頸處死后,無菌取小鼠大腦皮質(zhì)和脾臟,分別作如下試驗:（1）體外細胞共培養(yǎng)病毒分離試驗、PCR及原位雜交檢測HCMV UL83 DNA、RT-PCR檢測HCMV UL83 mRNA、間接免疫熒光檢測HCMV pp65等確定三組小鼠腦組織中HCMV感染及其感染狀態(tài);（2）小鼠免疫狀態(tài)檢測:間接ELISA檢測小鼠血清中的HCMVIgG、IgM抗體水平,流式細胞儀分別檢測外周血細胞和脾臟細胞懸液中CD3+/CD4+/CD8+ T淋巴細胞亞群數(shù)量;（3）大腦皮質(zhì)AD相關(guān)病理學(xué)檢測:HE染色檢測小鼠大腦皮質(zhì)構(gòu)筑和病理改變;剛果紅染色檢測大腦皮質(zhì)中的淀粉樣斑塊;鍍銀染色檢查...
【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省
【文章頁數(shù)】：63 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
共培養(yǎng)病毒分離試驗HF細胞CPE改變(×200)
圖 2.HCMV UL83 PCR 和 RT-PCR 瓊脂糖凝膠電泳Fig.2: Agarose gel electrophoresis of HCMV UL83 PCR and RT-PCR:DL-2000 Marke； 1:陽性對照；2:陰性對照 3:A 組小鼠；4:B 組小鼠；5:C 組小鼠；M: DL-2000 for Marker; 1: Positive control; 2: Negative control 3: mouse of group A;4: mouse of group B; 5: mouse of group C;接免疫熒光檢測 pp65 抗原結(jié)果HCMV pp65多克隆抗體進行免疫熒光檢測各組細胞爬片pp65抗原的表達情在 A、B 兩組的 HF 細胞漿內(nèi)檢測到蘋果綠色陽性信號（圖 3-Ⅱ）；C 組未檢特異性蘋果綠色熒光陽性信號（圖 3-Ⅰ）。
圖 2.HCMV UL83 PCR 和 RT-PCR 瓊脂糖凝膠電泳Fig.2: Agarose gel electrophoresis of HCMV UL83 PCR and RT-PCRM:DL-2000 Marke； 1:陽性對照；2:陰性對照 3:A 組小鼠；4:B 組小鼠；5:C 組小鼠；M: DL-2000 for Marker; 1: Positive control; 2: Negative control 3: mouse of group A;4: mouse of group B; 5: mouse of group C; 間接免疫熒光檢測 pp65 抗原結(jié)果用HCMV pp65多克隆抗體進行免疫熒光檢測各組細胞爬片pp65抗原的表達情在 A、B 兩組的 HF 細胞漿內(nèi)檢測到蘋果綠色陽性信號（圖 3-Ⅱ）；C 組未檢特異性蘋果綠色熒光陽性信號（圖 3-Ⅰ）。250100005000PCR RT-PCR
【參考文獻】：
期刊論文
[1]老年斑、神經(jīng)元纖維纏結(jié)與硫酸多糖[J]. 胡金鳳,耿美玉. 中國藥理學(xué)通報. 2003(01)
[2]Alzheimer病病人血清與腦脊液白細胞介素-1及腫瘤壞死因子水平檢測的研究[J]. 王琳,韓杰,張昱. 中華神經(jīng)科雜志. 2002(06)
[3]人巨細胞病毒先天性中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染小鼠模型的建立[J]. 王明麗,唐久來,胡聞,史百芬,胡勇,畢克菊,李京培. 動物學(xué)報. 2000(02)
[4]孕期巨細胞病毒感染的免疫學(xué)變化[J]. 閆鳳亭,李芬. 國外醫(yī)學(xué).婦幼保健分冊. 2000(01)
[5]新生乳鼠大腦神經(jīng)膠質(zhì)細胞對人巨細胞病毒易患性研究[J]. 王明麗,胡聞,李京培,史百芬,胡勇,任斌,唐久來. 中華神經(jīng)科雜志. 1999(05)
[6]人巨細胞病毒感染新生乳鼠原代培養(yǎng)腦神經(jīng)細胞研究[J]. 王明麗,陳貴海,唐久來,史百芬,胡勇,汪紅俊,李京培,任斌. 病毒學(xué)報. 1999(02)
[7]反復(fù)呼吸道感染患兒巨細胞病毒感染與細胞免疫功能關(guān)系的探討[J]. 李亞蕊,白翠蓮,劉秀萍,李潤森,賈旭林. 中國免疫學(xué)雜志. 1997(03)
[8]神經(jīng)退行性變的免疫學(xué)機制[J]. 趙紅衛(wèi),McGeerPL. 國外醫(yī)學(xué).藥學(xué)分冊. 1997(02)
本文編號：3103518
【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省
【文章頁數(shù)】：63 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
共培養(yǎng)病毒分離試驗HF細胞CPE改變(×200)
圖 2.HCMV UL83 PCR 和 RT-PCR 瓊脂糖凝膠電泳Fig.2: Agarose gel electrophoresis of HCMV UL83 PCR and RT-PCR:DL-2000 Marke； 1:陽性對照；2:陰性對照 3:A 組小鼠；4:B 組小鼠；5:C 組小鼠；M: DL-2000 for Marker; 1: Positive control; 2: Negative control 3: mouse of group A;4: mouse of group B; 5: mouse of group C;接免疫熒光檢測 pp65 抗原結(jié)果HCMV pp65多克隆抗體進行免疫熒光檢測各組細胞爬片pp65抗原的表達情在 A、B 兩組的 HF 細胞漿內(nèi)檢測到蘋果綠色陽性信號（圖 3-Ⅱ）；C 組未檢特異性蘋果綠色熒光陽性信號（圖 3-Ⅰ）。
圖 2.HCMV UL83 PCR 和 RT-PCR 瓊脂糖凝膠電泳Fig.2: Agarose gel electrophoresis of HCMV UL83 PCR and RT-PCRM:DL-2000 Marke； 1:陽性對照；2:陰性對照 3:A 組小鼠；4:B 組小鼠；5:C 組小鼠；M: DL-2000 for Marker; 1: Positive control; 2: Negative control 3: mouse of group A;4: mouse of group B; 5: mouse of group C; 間接免疫熒光檢測 pp65 抗原結(jié)果用HCMV pp65多克隆抗體進行免疫熒光檢測各組細胞爬片pp65抗原的表達情在 A、B 兩組的 HF 細胞漿內(nèi)檢測到蘋果綠色陽性信號（圖 3-Ⅱ）；C 組未檢特異性蘋果綠色熒光陽性信號（圖 3-Ⅰ）。250100005000PCR RT-PCR
【參考文獻】：
期刊論文
[1]老年斑、神經(jīng)元纖維纏結(jié)與硫酸多糖[J]. 胡金鳳,耿美玉. 中國藥理學(xué)通報. 2003(01)
[2]Alzheimer病病人血清與腦脊液白細胞介素-1及腫瘤壞死因子水平檢測的研究[J]. 王琳,韓杰,張昱. 中華神經(jīng)科雜志. 2002(06)
[3]人巨細胞病毒先天性中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染小鼠模型的建立[J]. 王明麗,唐久來,胡聞,史百芬,胡勇,畢克菊,李京培. 動物學(xué)報. 2000(02)
[4]孕期巨細胞病毒感染的免疫學(xué)變化[J]. 閆鳳亭,李芬. 國外醫(yī)學(xué).婦幼保健分冊. 2000(01)
[5]新生乳鼠大腦神經(jīng)膠質(zhì)細胞對人巨細胞病毒易患性研究[J]. 王明麗,胡聞,李京培,史百芬,胡勇,任斌,唐久來. 中華神經(jīng)科雜志. 1999(05)
[6]人巨細胞病毒感染新生乳鼠原代培養(yǎng)腦神經(jīng)細胞研究[J]. 王明麗,陳貴海,唐久來,史百芬,胡勇,汪紅俊,李京培,任斌. 病毒學(xué)報. 1999(02)
[7]反復(fù)呼吸道感染患兒巨細胞病毒感染與細胞免疫功能關(guān)系的探討[J]. 李亞蕊,白翠蓮,劉秀萍,李潤森,賈旭林. 中國免疫學(xué)雜志. 1997(03)
[8]神經(jīng)退行性變的免疫學(xué)機制[J]. 趙紅衛(wèi),McGeerPL. 國外醫(yī)學(xué).藥學(xué)分冊. 1997(02)
本文編號：3103518
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