發(fā)布時(shí)間：2021-03-27 03:25

　　背景:目前認(rèn)為低氧誘導(dǎo)因子1α是維持機(jī)體細(xì)胞內(nèi)氧穩(wěn)態(tài)的最重要調(diào)控因子之一,骨形態(tài)發(fā)生蛋白6是成骨活性最強(qiáng)的骨形態(tài)發(fā)生蛋白之一,實(shí)驗(yàn)擬構(gòu)建二者共表達(dá)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞系,以研究細(xì)胞在低氧狀態(tài)下的耐受及功能受益問題。目的:探討體外模擬低氧環(huán)境下低氧誘導(dǎo)因子1α和骨形態(tài)發(fā)生蛋白6協(xié)同過表達(dá)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨和成血管生物學(xué)特性。方法:分離培養(yǎng)鑒定SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,將已構(gòu)建好的攜帶有骨形態(tài)發(fā)生蛋白6和低氧誘導(dǎo)因子1α雙基因的腺病毒真核表達(dá)載體共同感染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,在體積分?jǐn)?shù)為21%O₂,2%O₂條件下分別進(jìn)行培養(yǎng),并以常氧狀態(tài)下未轉(zhuǎn)染的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞作為對(duì)照組,RT-qPCR檢測(cè)各組細(xì)胞HIF-1α、VEGF、BMP-6、GLUT-1、SIRT-1、OCN、RUNX2、AKP的m RNA水平。各組骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng)后,觀察體外小管形成能力;各組骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基干預(yù)后,堿性磷酸酶染色及茜素紅染色鑒定成骨效果。結(jié)果與結(jié)論:（1）流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示第4代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞高表達(dá)CD29、CD90、CD... 

【文章來源】：中國組織工程研究. 2019,23(17)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設(shè)計(jì)
    1.2 時(shí)間及地點(diǎn)
    1.3 材料
        1.3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.3.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    1.4 實(shí)驗(yàn)方法
        1.4.1 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)和鑒定
        1.4.2 腺相關(guān)病毒載體構(gòu)建和體外轉(zhuǎn)染
        1.4.3 RT-qPCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染后骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中低氧誘導(dǎo)因子1α和骨形態(tài)發(fā)生蛋白6的表達(dá)
        1.4.4 氧張力設(shè)置及實(shí)驗(yàn)分組
        1.4.5 體外血管生成實(shí)驗(yàn)
        1.4.6 體外成骨實(shí)驗(yàn)
    1.5 主要觀察指標(biāo)
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果Results
    2.1 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞鑒定結(jié)果
    2.2 RT-qPCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染后骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中低氧誘導(dǎo)因子1α和骨形態(tài)發(fā)生蛋白6的表達(dá)
    2.3 RT-qPCR檢測(cè)不同氧張力下骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中成骨和成血管相關(guān)基因的表達(dá)
    2.4 體外小管形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.5 體外成骨實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3 討論Discussion


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Supportive angiogenic and osteogenic differentiation of mesenchymal stromal cells and endothelial cells in monolayer and co-cultures[J]. Florian B?hrnsen,Henning Schliephake.  International Journal of Oral Science. 2016(04)
[2]低氧環(huán)境對(duì)骨代謝影響的研究與進(jìn)展[J]. 李廣周,吳偉.  中國組織工程研究. 2016(33)



本文編號(hào)：3102788