背景:目前認為低氧誘導(dǎo)因子1α是維持機體細胞內(nèi)氧穩(wěn)態(tài)的最重要調(diào)控因子之一,骨形態(tài)發(fā)生蛋白6是成骨活性最強的骨形態(tài)發(fā)生蛋白之一,實驗擬構(gòu)建二者共表達的骨髓間充質(zhì)干細胞系,以研究細胞在低氧狀態(tài)下的耐受及功能受益問題。目的:探討體外模擬低氧環(huán)境下低氧誘導(dǎo)因子1α和骨形態(tài)發(fā)生蛋白6協(xié)同過表達骨髓間充質(zhì)干細胞的成骨和成血管生物學(xué)特性。方法:分離培養(yǎng)鑒定SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞,將已構(gòu)建好的攜帶有骨形態(tài)發(fā)生蛋白6和低氧誘導(dǎo)因子1α雙基因的腺病毒真核表達載體共同感染骨髓間充質(zhì)干細胞,在體積分數(shù)為21%O₂,2%O₂條件下分別進行培養(yǎng),并以常氧狀態(tài)下未轉(zhuǎn)染的骨髓間充質(zhì)干細胞作為對照組,RT-qPCR檢測各組細胞HIF-1α、VEGF、BMP-6、GLUT-1、SIRT-1、OCN、RUNX2、AKP的m RNA水平。各組骨髓間充質(zhì)干細胞與人臍靜脈內(nèi)皮細胞共培養(yǎng)后,觀察體外小管形成能力;各組骨髓間充質(zhì)干細胞經(jīng)成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基干預(yù)后,堿性磷酸酶染色及茜素紅染色鑒定成骨效果。結(jié)果與結(jié)論:（1）流式細胞儀檢測結(jié)果顯示第4代骨髓間充質(zhì)干細胞高表達CD29、CD90、CD... 

【文章來源】：中國組織工程研究. 2019,23(17)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設(shè)計
    1.2 時間及地點
    1.3 材料
        1.3.1 實驗動物
        1.3.2 實驗試劑
    1.4 實驗方法
        1.4.1 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的分離培養(yǎng)和鑒定
        1.4.2 腺相關(guān)病毒載體構(gòu)建和體外轉(zhuǎn)染
        1.4.3 RT-qPCR檢測轉(zhuǎn)染后骨髓間充質(zhì)干細胞中低氧誘導(dǎo)因子1α和骨形態(tài)發(fā)生蛋白6的表達
        1.4.4 氧張力設(shè)置及實驗分組
        1.4.5 體外血管生成實驗
        1.4.6 體外成骨實驗
    1.5 主要觀察指標(biāo)
    1.6 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果Results
    2.1 骨髓間充質(zhì)干細胞鑒定結(jié)果
    2.2 RT-qPCR檢測轉(zhuǎn)染后骨髓間充質(zhì)干細胞中低氧誘導(dǎo)因子1α和骨形態(tài)發(fā)生蛋白6的表達
    2.3 RT-qPCR檢測不同氧張力下骨髓間充質(zhì)干細胞中成骨和成血管相關(guān)基因的表達
    2.4 體外小管形成實驗結(jié)果
    2.5 體外成骨實驗結(jié)果
3 討論Discussion


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Supportive angiogenic and osteogenic differentiation of mesenchymal stromal cells and endothelial cells in monolayer and co-cultures[J]. Florian B?hrnsen,Henning Schliephake.  International Journal of Oral Science. 2016(04)
[2]低氧環(huán)境對骨代謝影響的研究與進展[J]. 李廣周,吳偉.  中國組織工程研究. 2016(33)



本文編號：3102788