目的:目前實(shí)驗(yàn)研究表明,病理性瘢痕的形成可能是成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞（MyoF）轉(zhuǎn)分化,并且后者持續(xù)存在的結(jié)果。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（TGF-β1）被認(rèn)為是促進(jìn)纖維化發(fā)展的最重要的生長(zhǎng)因子,具有促進(jìn)成纖維細(xì)胞分化的作用,但阻斷其表達(dá)而帶來(lái)的負(fù)作用也異常明顯,結(jié)締組織生長(zhǎng)因子（CTGF）于1991年發(fā)現(xiàn),被認(rèn)為是TGF-β1的下游效應(yīng)因子,主要在間質(zhì)細(xì)胞中表達(dá),是一種特異性更強(qiáng)的促纖維化因子,本文旨在探討結(jié)締組織生長(zhǎng)因子是否也具有促進(jìn)瘢痕成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的作用,且與TGF-β1之間的關(guān)系如何,為增生性瘢痕（HS）的防治研究拓展新的領(lǐng)域。方法:原代培養(yǎng)人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞（HSF）,分別向其培養(yǎng)基內(nèi)單獨(dú)或同時(shí)加入不同濃度的TGF-β1和CTGF,通過(guò)CTGF反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染,以及先轉(zhuǎn)染后再加入TGF-β1刺激,使用倒置顯微鏡、免疫細(xì)胞化學(xué)、Western-blot、流式細(xì)胞術(shù)等方法對(duì)人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞形態(tài)及表型的轉(zhuǎn)變進(jìn)行評(píng)估。結(jié)果:不同濃度CTGF及TGF-β1作用48h后,各濃度組HSF細(xì)胞形態(tài)均呈現(xiàn)出不同程度的改變,其中以CTGF和TGF-β1聯(lián)合刺激... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

CTGF濃度與α－SMA蛋白表達(dá)的變化

圖 2 TGF-β1濃度對(duì) CTGF 蛋白表達(dá)的影響、不同濃度 TGF-β1對(duì)α－SMA 蛋白表達(dá)的影響述樣本同樣經(jīng) Western－blot 檢測(cè)，結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)，TGF-β1的濃度與α達(dá)之間的關(guān)系與 CTGF 組結(jié)果類(lèi)似，正常人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞表達(dá) 蛋白，在加入不同濃度 TGF-β1后(2.5 ng/ml、5 ng/ml、7.5ng/ml、10 ml)，α－SMA 蛋白的表達(dá)量呈逐漸上升趨勢(shì)，與對(duì)照組相比差異顯著，1的濃度為 10ng/ml 時(shí)，這種作用最為明顯(p<0.05)。(見(jiàn)表 2，圖 2，照 TGF-β1濃度為 10 ng/ml 刺激 HSF，48h 后行流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)，結(jié)果顯－SMA 陽(yáng)性細(xì)胞百分率為 10.76±2.81％，TGF-β1刺激組α－SMA 陽(yáng)為 28.74±4.75％，與對(duì)照組相比差異顯著（P<0.05）(見(jiàn)表 5，圖 5)。

第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文表 3 TGF-β1濃度與α－SMA 蛋白表達(dá)的變化(目的蛋白/內(nèi)參蛋白， x ±s)組別 標(biāo)本數(shù) 目的蛋白和內(nèi)參蛋白平均光密度(OD)×面積(mm2)的比值對(duì)照組 6 0.36±0.14T2.5ng/ml組 6 0.44±0.09T5ng/ml組 6 0.44±0.12*T7.5ng/ml組 6 0.56±0.09*T10ng/ml組 6 0.79±0.15*T20ng/ml組 6 0.80±0.17*△*：與對(duì)照組相比：P<0.05△：與 T10ng/ml組相比：P>0.05

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]結(jié)締組織生長(zhǎng)因子在博萊霉素誘導(dǎo)大鼠肺纖維化模型中的表達(dá)及意義[D]. 葉旭軍.武漢大學(xué) 2004



本文編號(hào)：3070012