發(fā)布時(shí)間：2021-03-09 07:13

　　目的 近年來關(guān)于神經(jīng)再生特別是中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）損傷后再生的研究，一直是神經(jīng)解剖學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)和神經(jīng)免疫學(xué)等神經(jīng)科學(xué)的研究熱點(diǎn)。最新的研究結(jié)果揭示，哺乳動(dòng)物成熟個(gè)體表現(xiàn)出的CNS再生能力缺乏并不是因?yàn)镃NS自身不具有再生能力，而是這種能力被某種物質(zhì)所強(qiáng)烈地抑制。目前認(rèn)為這種再生抑制物質(zhì)是由少突膠質(zhì)細(xì)胞等分泌的一類髓鞘質(zhì)蛋白，其中分子量為35，000dal的NI-35是目前所知的抑制再生能力V_H最強(qiáng)的一種蛋白因子。已有大量研究證實(shí)，在離體細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用抗NI-35的單克隆抗體對(duì)NI-35進(jìn)行封閉，都使CNS再生獲得了成功。本實(shí)驗(yàn)的目的是應(yīng)用分子克隆技術(shù)，將已知的抗鼠NI-35單克隆抗體的重鏈可變區(qū)V_H和輕鏈可變區(qū)V_L基因進(jìn)行重組，使二者通過一個(gè)由四個(gè)甘氨酸一個(gè)絲氨酸組成的重復(fù)序列短肽連接，構(gòu)建出一種全新的抗NI-35重組單鏈抗體（anti-NI-35scFv），并使其在大腸桿菌中初步表達(dá)。 方法 從genebank中檢索抗NI-35單克隆抗體（anti-NI-35mAb）重鏈可變區(qū)和輕鏈可變... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：41 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

pUC18一etor-i一一35seFv菌落pCR結(jié)果

圖5pET-28a(+)一anti一NI一35seFv菌落PCR鑒定結(jié)果M:DNAMarkerl:空載體pE下28a(+)對(duì)照2一8:PET-28a(+)一anti一NI一35scFv菌落PCR產(chǎn)物M

圖6pET-Zsa(+)一anti一M一35SeFv雙酶切鑒定結(jié)果:DNAMarker3:提純的重組子pET-28a(+)一anti一Nx一35seF:經(jīng)BamHI和Hind111雙酶切的質(zhì)粒pET-28a(+)一anti一Nx一35sel7


本文編號(hào)：3072480