目的：通過對(duì)重組人rhNDPK-A的蛋白結(jié)構(gòu)及生物學(xué)特性的研究，為進(jìn)一步研究其生物學(xué)功能提供理論基礎(chǔ)，探討rhNDPK-A蛋白對(duì)免疫細(xì)胞的作用，為深入研究rhNDPK-A蛋白對(duì)免疫系統(tǒng)的作用機(jī)理提供理論基礎(chǔ)。 方法：在純化rhNDPK-A蛋白的基礎(chǔ)上，對(duì)其單體分子量、酶活性、蛋白純度及聚集體分子量進(jìn)行了測定，聚集體分子量的測定采用了HPLC和多角激光儀，并用原子力顯微鏡對(duì)rhNDPK-A聚集體的外部形貌進(jìn)行了觀察。rhNDPK-A蛋白體外作用于正常小鼠的脾細(xì)胞，用MTT法測定了rhNDPK-A蛋白對(duì)小鼠脾細(xì)胞存活的影響以及對(duì)有絲分裂原誘導(dǎo)的脾細(xì)胞增殖的協(xié)同作用，用流式細(xì)胞儀測定了rhNDPK-A蛋白對(duì)脾細(xì)胞的細(xì)胞周期的影響。以純化得到的rhNDPK-A蛋白免疫新西蘭兔，蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)鑒定了兔抗血清的特異性。 結(jié)果：1．純化所得到的rhNDPK-A蛋白主要是以六聚體的形式存在；2．rhNDPK-A蛋白體外作用，可直接促進(jìn)小鼠的脾細(xì)胞存活，并對(duì)PHA、ConA誘導(dǎo)的脾細(xì)胞增殖有協(xié)同作用；3．rhNDPK-A蛋白可明顯改變脾細(xì)胞的細(xì)胞周期。3．免疫得到的兔抗血清具有較好的特異性... 

【文章來源】：暨南大學(xué)廣東省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
第一部分 nm23的研究進(jìn)展及研究目的
    一、 NDPK蛋白的結(jié)構(gòu)特征
    二、 NDPK蛋白的分布
    三、 NDPK蛋白的生物學(xué)功能
    四. 本研究的目的和意義
第二部分 rhNDPK-A蛋白的結(jié)構(gòu)研究
    一、 實(shí)驗(yàn)材料
    二、 實(shí)驗(yàn)方法和步驟
        （一） rhNDPK-A蛋白的分離純化
        （二） rhNDPK-A蛋白亞基的分子量測定--SDS-PAGE
        （三） rhNDPK-A蛋白含量測定--Bradford法
        （四） rhNDPK-A蛋白的酶活性測定
        （五） rhNDPK-A蛋白的純度測定--RP-HPLC
        （六） rhNDPK-A蛋白的聚集體分子量測定
        （七） 原子力顯微鏡（AFM）掃描rhNDPK-A的外部形貌
    三、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        （一） rhNDPK-A蛋白的亞基分子量
        （二） rhNDPK-A的蛋白含量
        （三） rhNDPK-A蛋白的酶活性
        （四） rhNDPK-A蛋白的純度測定
        （五） rhNDPK-A蛋白的聚集體的分子量測定
        （六） AFM對(duì)rhNDPK-A外部形貌的觀察結(jié)果
    四、 討論
第三部分 rhNDPK-A蛋白的免疫學(xué)作用初探
    一、 實(shí)驗(yàn)材料
    二、 實(shí)驗(yàn)方法和步驟
        （一） rhNDPK-A蛋白對(duì)正常小鼠脾細(xì)胞的作用
        （二） rhNDPK-A蛋白的抗血清制備
    三、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        （一） rhNDPK-A蛋白對(duì)正常小鼠脾細(xì)胞的作用
        （二） rhNDPK-A蛋白抗血清的制備及其意義
    四、 討論
        （一） rhNDPK-A蛋白對(duì)小鼠脾細(xì)胞存活和細(xì)胞周期的影響
        （二） rhNDPK-A蛋白對(duì)有絲分裂原誘導(dǎo)的脾細(xì)胞增殖的影響
        （三） rhNDPK-A蛋白抗血清的制備及其意義
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
英文縮略語表
致謝
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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]磷烯菌素誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞凋亡及其與增殖周期的關(guān)系[J]. 熊金蓉,龔建平,舒丹,陶德定.  腫瘤. 2002(01)
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本文編號(hào)：3061279