目的：通過對重組人rhNDPK-A的蛋白結(jié)構(gòu)及生物學(xué)特性的研究，為進一步研究其生物學(xué)功能提供理論基礎(chǔ)，探討rhNDPK-A蛋白對免疫細胞的作用，為深入研究rhNDPK-A蛋白對免疫系統(tǒng)的作用機理提供理論基礎(chǔ)。 方法：在純化rhNDPK-A蛋白的基礎(chǔ)上，對其單體分子量、酶活性、蛋白純度及聚集體分子量進行了測定，聚集體分子量的測定采用了HPLC和多角激光儀，并用原子力顯微鏡對rhNDPK-A聚集體的外部形貌進行了觀察。rhNDPK-A蛋白體外作用于正常小鼠的脾細胞，用MTT法測定了rhNDPK-A蛋白對小鼠脾細胞存活的影響以及對有絲分裂原誘導(dǎo)的脾細胞增殖的協(xié)同作用，用流式細胞儀測定了rhNDPK-A蛋白對脾細胞的細胞周期的影響。以純化得到的rhNDPK-A蛋白免疫新西蘭兔，蛋白免疫印跡實驗鑒定了兔抗血清的特異性。 結(jié)果：1．純化所得到的rhNDPK-A蛋白主要是以六聚體的形式存在；2．rhNDPK-A蛋白體外作用，可直接促進小鼠的脾細胞存活，并對PHA、ConA誘導(dǎo)的脾細胞增殖有協(xié)同作用；3．rhNDPK-A蛋白可明顯改變脾細胞的細胞周期。3．免疫得到的兔抗血清具有較好的特異性... 

【文章來源】：暨南大學(xué)廣東省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
第一部分 nm23的研究進展及研究目的
    一、 NDPK蛋白的結(jié)構(gòu)特征
    二、 NDPK蛋白的分布
    三、 NDPK蛋白的生物學(xué)功能
    四. 本研究的目的和意義
第二部分 rhNDPK-A蛋白的結(jié)構(gòu)研究
    一、 實驗材料
    二、 實驗方法和步驟
        （一） rhNDPK-A蛋白的分離純化
        （二） rhNDPK-A蛋白亞基的分子量測定--SDS-PAGE
        （三） rhNDPK-A蛋白含量測定--Bradford法
        （四） rhNDPK-A蛋白的酶活性測定
        （五） rhNDPK-A蛋白的純度測定--RP-HPLC
        （六） rhNDPK-A蛋白的聚集體分子量測定
        （七） 原子力顯微鏡（AFM）掃描rhNDPK-A的外部形貌
    三、 實驗結(jié)果
        （一） rhNDPK-A蛋白的亞基分子量
        （二） rhNDPK-A的蛋白含量
        （三） rhNDPK-A蛋白的酶活性
        （四） rhNDPK-A蛋白的純度測定
        （五） rhNDPK-A蛋白的聚集體的分子量測定
        （六） AFM對rhNDPK-A外部形貌的觀察結(jié)果
    四、 討論
第三部分 rhNDPK-A蛋白的免疫學(xué)作用初探
    一、 實驗材料
    二、 實驗方法和步驟
        （一） rhNDPK-A蛋白對正常小鼠脾細胞的作用
        （二） rhNDPK-A蛋白的抗血清制備
    三、 實驗結(jié)果
        （一） rhNDPK-A蛋白對正常小鼠脾細胞的作用
        （二） rhNDPK-A蛋白抗血清的制備及其意義
    四、 討論
        （一） rhNDPK-A蛋白對小鼠脾細胞存活和細胞周期的影響
        （二） rhNDPK-A蛋白對有絲分裂原誘導(dǎo)的脾細胞增殖的影響
        （三） rhNDPK-A蛋白抗血清的制備及其意義
小結(jié)
參考文獻
英文縮略語表
致謝
附: 在學(xué)期間發(fā)表文章


【參考文獻】：
期刊論文
[1]MTT法與流式細胞術(shù)檢測肺炎合劑促進T淋巴細胞轉(zhuǎn)化的實驗研究[J]. 巴圖德力根,孔英,高志紅,朱耀寰,孔力.  中國免疫學(xué)雜志. 2002(04)
[2]磷烯菌素誘導(dǎo)HL-60細胞凋亡及其與增殖周期的關(guān)系[J]. 熊金蓉,龔建平,舒丹,陶德定.  腫瘤. 2002(01)
[3]低頻電磁場對成骨細胞增殖及細胞周期的影響[J]. 湯青,趙南明.  科學(xué)通報. 1999(20)
[4]Nm23-H1/NDPK-A基因在大腸桿菌中的高效表達及產(chǎn)物純化的研究[J]. 侯宇,趙利淦,張美英,何麗容,邊六交,張玲,楊瑞儀,林劍.  中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報. 1998(06)
[5]重組人GM－CSF／MCAF融合蛋白抗血清的制備與鑒定[J]. 葉棋濃,蘇國富,王恒梁,隋擁君,黃翠芬.  微生物學(xué)免疫學(xué)進展. 1996(04)
[6]淫羊藿多糖促進小鼠T和B細胞3H-TdR摻入和誘生干擾素作用的研究[J]. 丁雁,邢善田,周金黃.  中國免疫學(xué)雜志. 1985(06)



本文編號：3061279