目的：利用差異顯示法，分析生理濃度下雌二醇對(duì)小鼠骨髓巨噬細(xì)胞基因表達(dá)的影響。 方法：選用三周齡雄鼠(C₅₇BL/6j)，分離股骨骨髓，實(shí)驗(yàn)組給予生理濃度雌二醇10nM（溶于無水乙醇），對(duì)照組給予等體積的無水乙醇，終濃度為0.04％，在巨噬細(xì)胞激落刺激因子（M-CSF）作用下，使骨髓細(xì)胞分化成熟為巨噬細(xì)胞。采用差異顯示（DD-PCR）法，對(duì)差異基因片段進(jìn)行擴(kuò)增、回收、純化、克隆、序列測定及同源性檢索分析，并根據(jù)已知基因序列合成引物，進(jìn)行RT-PCR再證實(shí)。 結(jié)果：差異基因片段經(jīng)序列測定及同源性分析，由實(shí)驗(yàn)組克隆到一個(gè)新基因，由對(duì)照組克隆到ankyrin-1基因。合成兩對(duì)引物，分別由實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組擴(kuò)增到相應(yīng)產(chǎn)物。 結(jié)論：雌激素作用組與對(duì)照組間基因表達(dá)情況發(fā)生改變，這可能與生理濃度的雌激素的作用有關(guān)。 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

DDRT.PCRg%變性聚丙烯酞胺凝膠電泳


本文編號(hào)：2965958