目的：白細(xì)胞介素15（IL-15）是與白細(xì)胞介素2（IL-2）有相似生物學(xué)活性，但無(wú)序列同源性的新細(xì)胞因子，其體內(nèi)分布遠(yuǎn)較IL-2廣泛，在免疫調(diào)節(jié)和免疫應(yīng)答尤其是在抗腫瘤免疫應(yīng)答中有重要作用。對(duì)IL-15的鑒定和研究均需有抗IL-15的抗體。本研究的目的是用細(xì)胞工程的方法制備鼠抗人IL-15單克隆抗體（簡(jiǎn)稱(chēng)單抗），鑒定其生物學(xué)和免疫學(xué)特性及理化特性，并初步探討其應(yīng)用。 方法：自重組人白細(xì)胞介素15（rhIL-15）基因工程菌提取融合蛋白GST-IL-15，12%SDS-PAGE電泳鑒定，依據(jù)牛血清白蛋白（BSA）的濃度目測(cè)選擇蛋白量為50μg的凝膠條帶切下制備免疫原，免疫BALB/c小鼠5次，第一次與第二次免疫間隔4周，其后每次免疫間隔2周，融合前三天以rhIL-15包涵體蛋白（rhIL-15IBP）攻擊。取免疫脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞株Sp2/0，用50%聚乙二醇（PEG）融合，HAT培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)出融合細(xì)胞。用rhIL-15IBP為抗原，間接ELISA法，初篩分泌抗rhIL-15IBP抗體的融合細(xì)胞，有限稀釋法克隆化培養(yǎng)獲得穩(wěn)定分泌抗rhIL-15IBP單抗的陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞株，最后以國(guó)際... 

【文章來(lái)源】：河北醫(yī)科大學(xué)河北省

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
研究論文 抗人白細(xì)胞介素15單克隆抗體的制備、鑒定和初步應(yīng)用
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
    附表
    附圖
綜述 IL-15與腫瘤相關(guān)關(guān)系的研究進(jìn)展
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：2966033