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抗人白細胞介素15單克隆抗體的制備、鑒定和初步應用

發(fā)布時間:2021-01-09 05:11
  目的:白細胞介素15(IL-15)是與白細胞介素2(IL-2)有相似生物學活性,但無序列同源性的新細胞因子,其體內(nèi)分布遠較IL-2廣泛,在免疫調(diào)節(jié)和免疫應答尤其是在抗腫瘤免疫應答中有重要作用。對IL-15的鑒定和研究均需有抗IL-15的抗體。本研究的目的是用細胞工程的方法制備鼠抗人IL-15單克隆抗體(簡稱單抗),鑒定其生物學和免疫學特性及理化特性,并初步探討其應用。 方法:自重組人白細胞介素15(rhIL-15)基因工程菌提取融合蛋白GST-IL-15,12%SDS-PAGE電泳鑒定,依據(jù)牛血清白蛋白(BSA)的濃度目測選擇蛋白量為50μg的凝膠條帶切下制備免疫原,免疫BALB/c小鼠5次,第一次與第二次免疫間隔4周,其后每次免疫間隔2周,融合前三天以rhIL-15包涵體蛋白(rhIL-15IBP)攻擊。取免疫脾細胞與骨髓瘤細胞株Sp2/0,用50%聚乙二醇(PEG)融合,HAT培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)出融合細胞。用rhIL-15IBP為抗原,間接ELISA法,初篩分泌抗rhIL-15IBP抗體的融合細胞,有限稀釋法克隆化培養(yǎng)獲得穩(wěn)定分泌抗rhIL-15IBP單抗的陽性雜交瘤細胞株,最后以國際... 

【文章來源】:河北醫(yī)科大學河北省

【文章頁數(shù)】:70 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
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英文摘要
研究論文 抗人白細胞介素15單克隆抗體的制備、鑒定和初步應用
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻
    附表
    附圖
綜述 IL-15與腫瘤相關關系的研究進展
致謝
個人簡歷



本文編號:2966033

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