背景:隨著經(jīng)濟的發(fā)展,人們對美的追求越來越高,抗衰老研究成為當(dāng)今的研究熱點。干細胞是具有自我更新能力和多向分化能力的細胞,間充質(zhì)干細胞是其中的一種。研究表明間充質(zhì)干細胞能通過旁分泌作用修復(fù)損傷衰老的細胞,但對于不同來源間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基的抗皮膚衰老作用研究甚少。目的:比較人脂肪、羊水、胎盤、臍帶來源間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基對自然衰老皮膚成纖維細胞的抗衰老作用。方法:制備人脂肪、羊水、胎盤、臍帶4種不同來源的間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基,添加到自然衰老皮膚成纖維細胞中,采用CCK-8法檢測細胞活力、β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測細胞衰老率、DCFH-DA探針檢測活性氧含量以及q PCR檢測p16、p53、COL1、KLOTHO基因表達量。結(jié)果與結(jié)論:①4種間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基均能提高皮膚成纖維細胞的活力,其中脂肪間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基的效果最好,β-半乳糖苷酶染色率最低;②4種間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基均能降低活性氧含量,脂肪和羊水來源間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基組的活性氧含量最低;③p16和p53在胎盤和臍帶間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基組的表達均高于對照組,在羊水來源間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基組的表達較低,脂肪間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基組p16表達顯著低于對照組,但p53的表達較高;④COL1基因表達除羊水間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基組外,其他3組均顯著高于對照組,KLOTHO基因表達除胎盤間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基組外,其他3組均顯著高于對照組,且脂肪間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基組的表達最高;⑤結(jié)果顯示,4種不同來源間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基能在一定程度上延緩細胞衰老,但作用效果存在差異,其作用機制還有待進一步研究。
【文章目錄】：
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文題釋義:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設(shè)計
    1.2 時間及地點
    1.3 材料
        1.3.1 樣本
        1.3.2 實驗試劑與儀器
    1.4 實驗方法
        1.4.1 人皮膚成纖維細胞的培養(yǎng)
        1.4.2 衰老皮膚成纖維細胞β-半乳糖苷酶染色
        1.4.3 四種人間充質(zhì)干細胞的制備
        1.4.4 四種人間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基的制備
        1.4.5 CCK-8法檢測細胞增殖活性
        1.4.6 β-半乳糖苷酶染色
        1.4.7 細胞內(nèi)活性氧水平
        1.4.8 實時熒光定量PCR檢測細胞相關(guān)衰老基因表達
    1.5 主要觀察指標(biāo)
    1.6 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果Results
    2.1 衰老人皮膚成纖維細胞的形態(tài)及β-半乳糖苷酶染色結(jié)果
    2.2 四種間充質(zhì)干細胞條件培養(yǎng)基對衰老人皮膚成纖維細胞增殖的影響
    2.3衰老人皮膚成纖維細胞β-半乳糖苷酶染色結(jié)果
    2.4衰老人皮膚成纖維細胞活性氧水平
    2.5 實時熒光定量PCR檢測衰老基因表達
3 討論Discussion

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