目的探討大鼠膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎(OA)軟骨下骨神經(jīng)因子表達及血清骨保護素(OPG)水平動態(tài)的變化。方法 40只SD大鼠隨機分為實驗組及對照組,實驗組采用切斷大鼠右后膝前交叉韌帶方法建立OA模型,對照組僅切開關(guān)節(jié)囊,實驗組根據(jù)造模至處死時間再次分為2 w組,4 w組,8 w組,分別于術(shù)后2 w,4 w,8 w處死,對照組于術(shù)后8 w處死。采用心臟采血方法收取大鼠血清標本,處死動物后取膝關(guān)節(jié)標本,肉眼觀察膝關(guān)節(jié)改變,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清OPG濃度值,膝關(guān)節(jié)標本脫鈣后分別行HE染色、軟骨下骨降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)、神經(jīng)生長因子(NGF)免疫組化染色,比較關(guān)節(jié)軟骨Mankin評分及CGRP、NGF灰度值。結(jié)果大鼠造模后均存活,無死亡及傷口感染,對照組膝關(guān)節(jié)面光滑,有光澤,實驗組膝關(guān)節(jié)軟骨面破壞逐漸加重,2 w組膝關(guān)節(jié)面完整性開始遭到破壞,呈現(xiàn)顆粒感,表面晦澀、無光澤,關(guān)節(jié)滑液混濁;4 w組部分大鼠開始出現(xiàn)骨贅,8 w組關(guān)節(jié)磨損嚴重,骨贅明顯,潰瘍面積增大。HE染色顯示對照組關(guān)節(jié)軟骨結(jié)構(gòu)清晰,軟骨表面光滑、完整,實驗組出現(xiàn)軟骨細胞簇集現(xiàn)象,排列紊亂,細胞數(shù)目減少,后期發(fā)生部分區(qū)域軟骨細胞缺損;血清OPG含量2 w、4 w呈下降趨勢,8 w又逐漸上升,CGRP及NGF表達與前趨勢相一致,各組間比較存在統(tǒng)計學差異(P0. 01)。結(jié)論采用前交叉韌帶切斷法可成功建立大鼠OA模型,血清OPG及軟骨下骨CGRP、NGF的表達隨著OA的進展發(fā)生改變,是OA的重要參與因子。
【部分圖文】：

圖1各組軟骨細胞HE染色(×40)2.4CGＲP、NGF免疫組化染色切片結(jié)果CGＲP、NGF免疫組化染色，兩組變化趨勢相一致，對照組骨小梁區(qū)周圍著色區(qū)域多，著色較深;2w組骨小梁著色區(qū)域變淡;4w組相應著色更少，8w組較前顏色稍加深，見圖2、圖3�；叶戎到Y(jié)果見表1，CGＲP各組間比較存在統(tǒng)計學差異(P＜0.01)，NGF各組間比較存在統(tǒng)計學差異(P＜0.01)。圖2各組CGＲP免疫組化切片(×100)圖3各組NGF免疫組化切片(×100)表1各組CGＲP、NGF免疫組化染色灰度值比較(x±s，n=10)組別CGＲPNGF對照組190.2±8.3110.6±4.52w組171.2±6.892.6±5.14w組113.5±8.663.0±7.38w組145.7±6.977.2±4.8F/P值22.8/＜0.0125.8/＜0.013討論OA是最常見的一種關(guān)節(jié)疾病，其發(fā)生是由于各種因素導致生物力學特性改變，致使關(guān)節(jié)軟骨、軟骨下骨及細胞外基質(zhì)失衡。長期以來，軟骨退變一直是國內(nèi)外比較關(guān)注的重點，對于軟骨下骨的作用研究較少，近些年來發(fā)現(xiàn)軟骨下骨改變是OA的重要病理變化，盡管對于其是否是OA始發(fā)因素尚存在爭論。許多基礎(chǔ)實驗證明，OA時軟骨下骨重塑所導致的骨質(zhì)硬化，骨密度增高，使軟骨下骨的生物學性能改變，其對關(guān)節(jié)軟骨的保護功能下降，進而引起或者加重關(guān)節(jié)軟骨退變〔5〕。OPG、ＲANKL、ＲANK是目前公認的調(diào)控骨代謝的重要途徑，其為腫瘤壞死因子家族成員，通過作用于破骨細胞，調(diào)控著骨形成及骨吸收。ＲANK與ＲANKL結(jié)合后，可通過核因子途徑激活破骨細胞分化的信號傳導通路，誘發(fā)相應激酶，發(fā)生一系列酶鏈反應，激活核因子復合體、活化蛋白-1及轉(zhuǎn)錄因子，核?
【參考文獻】

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本文編號：2847483