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撤除細(xì)胞因子對臍血細(xì)胞凋亡的影響及人參皂甙Rg1、Rb1的干預(yù)作用

發(fā)布時(shí)間:2020-08-23 17:25
【摘要】: 目的:探討撤除細(xì)胞因子對臍血造血細(xì)胞凋亡的影響及人參皂甙Rg1、Rb1的干預(yù)作用。方法:無菌條件純化獲得臍血CD34~+細(xì)胞,采用StemSpan~(TM)SFEM無血清液體培養(yǎng)基,TPO 50μg/L,SCF 50μg/L細(xì)胞因子組合擴(kuò)增CD34~+細(xì)胞7天。撤除細(xì)胞因子1天和3天,實(shí)驗(yàn)組加入不同濃度Rg1(2.5mg/L、5mg/L、10mg/L)、Rb1(5mg/L、10mg/L)預(yù)處理,收集適量細(xì)胞。用流式細(xì)胞儀單色熒光標(biāo)記檢測新鮮分離的CD34~+細(xì)胞純度,F(xiàn)ITC-Annexin-Ⅴ雙色熒光標(biāo)記檢測細(xì)胞凋亡率,比色法檢測Caspase-3蛋白相對表達(dá)。結(jié)果:免疫磁珠MACS分離系統(tǒng)可有效而高質(zhì)量的分離臍血CD34~+細(xì)胞,純度高達(dá)(98.28±2.62)%;用TPO和SCF可使臍血CD34~+細(xì)胞明顯擴(kuò)增;收集擴(kuò)增7天的細(xì)胞,撤除細(xì)胞因子1天后細(xì)胞凋亡率(24.79±2.80)%較對照組(2.69±0.43)%明顯增高;各Rgl、Rbl預(yù)處理組,可明顯降低細(xì)胞凋亡率;撤除細(xì)胞因子1天和3天,Caspase-3蛋白相對表達(dá)均升高近1倍,一定濃度Rg1、Rb1預(yù)處理后,可降低Caspase-3蛋白相對表達(dá)。結(jié)論:撤除細(xì)胞因子可誘導(dǎo)臍血造血細(xì)胞凋亡,一定濃度Rg1、Rb1有抑制此凋亡的作用,并且Caspase-3參與了凋亡事件并發(fā)揮著重要作用。
【學(xué)位授予單位】:天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2003
【分類號】:R329.2

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 蔡直鋒;撤除生長因子對hUCMSCs增殖和細(xì)胞外基質(zhì)表達(dá)的影響[D];山東大學(xué);2010年



本文編號:2801806

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