【摘要】： IgY是一個(gè)低級(jí)的血清免疫球蛋白，能轉(zhuǎn)運(yùn)至蛋黃，使后代獲得 被動(dòng)免疫保護(hù)。在功能上類似IgG。由于IgY具備與哺乳動(dòng)物IgG不 同的理化性質(zhì)和生物學(xué)活性，因此IgY廣泛應(yīng)用于免疫檢測(cè)制劑和免 疫治療制劑。 目前在蛋白質(zhì)功能上仍未有證據(jù)證明免疫球蛋白進(jìn)化中高度保守 區(qū)的存在。為了證實(shí)免疫球蛋白在進(jìn)化中存在高度保守的同源區(qū)域， 本實(shí)驗(yàn)用鼠抗雞IgY單克隆抗體和多克隆抗體，去識(shí)別不同種系動(dòng)物 的免疫球蛋白與IgY共有的抗原決定簇。在研究中采用dot-ELISA法 檢測(cè)出抗雞IgY抗血清與鳥類免疫球蛋白樣品（鴿、鶴鶉、鴨、鵝） 發(fā)生陽性交叉反應(yīng)，并通過間接ELISA試驗(yàn)驗(yàn)證了dot-ELISA的陽 性檢測(cè)結(jié)果。從制備的13株抗雞IgY單克隆抗體中未能篩出識(shí)別三 個(gè)種系以上的免疫球蛋白樣品的McAb，提示常規(guī)免疫及細(xì)胞融合方 法很難篩到識(shí)別IgY同源決定簇的McAb。進(jìn)而采用雞IgY分別與各 種免疫球蛋白（蝦、魚、鱉、鴿、鴨、兔、馬、人）作基礎(chǔ)、強(qiáng)化免 疫，Balb/c小鼠所產(chǎn)生的抗血清分別與上述各強(qiáng)化免疫樣品作ELISA 檢測(cè)，結(jié)果顯示我們?cè)O(shè)計(jì)的交替免疫方案能增加IgY同源決定簇的豐 度，增強(qiáng)識(shí)別IgY同源決定簇的抗體分泌，所產(chǎn)生的多克隆抗體能同 時(shí)與多種系免疫球蛋白樣品發(fā)生交叉反應(yīng)，并初步顯示IgY同源決定 簇可能存在于被測(cè)的各種系免疫球蛋白中，且至少雞IgY與各禽類蛋 黃抗體存在共同的抗原決定簇。 在蛋黃抗體應(yīng)用研究上，運(yùn)用雜交瘤制備技術(shù)，篩選到兩株鼠抗雞 IgY單克隆抗體，分別命名為DFF和DFA。經(jīng)單克隆抗體相加試驗(yàn) 和Western-Blot試驗(yàn)證實(shí)，它們分別識(shí)別IgY重鏈上的不同位點(diǎn)。其 中高親合力的DFF標(biāo)記HRP，在國內(nèi)率先建立了間接ELISA法檢測(cè) 特異性蛋黃抗體的技術(shù)平臺(tái)。在抗傳染性腹瀉的多價(jià)雞蛋黃抗體的研 究中，采用自立的蛋黃抗體ELISA法檢測(cè)技術(shù)，確立了霍亂弧菌致 病性大腸桿菌基因工程疫苗免疫雞，產(chǎn)生高滴度抗體的免疫規(guī)程， 特異的IgY抗體顯示識(shí)別、結(jié)合霍亂毒素的能力，為進(jìn)人臨床應(yīng)用創(chuàng) 立必要的技術(shù)條件。
【學(xué)位授予單位】：第一軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2000
【分類號(hào)】：R392.11

【引證文獻(xiàn)】

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1 肖飛;抗犬瘟熱和犬細(xì)小病毒病二聯(lián)卵黃抗體的制備及其臨床治療效果觀察[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

本文編號(hào)：2720115