【摘要】： 目的 建立D-半乳糖致亞急性衰老小鼠模型，利用該模型進行衰老免疫學方面的研究，探討自然衰老小鼠及D-半乳糖致亞急性衰老小鼠模型中，CD137分子在脾臟T細胞上的表達和功能變化。 方法 取5周齡BALB／c雄性小鼠，頸背部皮下注射D-半乳糖，分別于造模型后一到五個月取脾臟淋巴細胞，同時取自然衰老小鼠脾臟淋巴細胞，在培養(yǎng)的第0、24、48、72、96、120、144h收集細胞，用流式細胞儀分析脾臟T細胞CD137的表達陽性率。尼龍棉柱法純化T細胞，培養(yǎng)，同時收集各組細胞培養(yǎng)上清，分別用正常T細胞培養(yǎng)上清加入衰老T細胞、衰老T細胞培養(yǎng)上清加入正常T細胞進行培養(yǎng)，雙染法檢測各組細胞中CD137表達率與細胞死亡的關系。提取總RNA，應用RT-PCR方法檢測CD137的mRNA水平變化。 結果 (1)D-半乳糖致衰老模型小鼠和自然衰老模型的脾臟T細胞上CD137分子表達水平低于正常水平，表達高峰提前出現(xiàn)，隨后表達水平下降遲緩。(2)在造模過程中，亞急性衰老模型小鼠CD137分子表達水平逐漸降低，分子表達峰逐漸前移。(3)衰老小鼠T細胞AICD高于正常水平。(4)衰老小鼠及正常小鼠T細胞培養(yǎng)上清對CD137分子表達水平無顯著影響。(5)亞急性衰老小鼠模型和自然衰老小鼠CD137分子mRNA低于正常小鼠水平。 結論(1)D-半乳糖致亞急性衰老小鼠模型T細胞CD137分子表達變化規(guī)律與自然衰老小鼠相似，造模兩個月后的大劑量組小鼠即可用于衰老個體CD137分子的相關研究。(2)模型小鼠CD137分子表達隨衰老的發(fā)生發(fā)展呈規(guī)律性變化，提示該分子可能為T細胞衰老的分子標志。 （3）即使在衰老狀態(tài)下，機體對CD137分于的表達依然具有調控作用， 提示兔疫系統(tǒng)的代償能力仍然存在。（4）衰老個體CD137分于對T細胞 的AICD保護作用降低，提示衰老免疫系統(tǒng)對CD137分于表達的調控范圍 是有限的。（5）衰老小鼠＊細胞CD137基因的轉錄水平下降。（6）衰老 小鼠T細胞功能的異常可能主要為細胞受體及信號轉導途徑缺陷所導 致。
【學位授予單位】：第一軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2002
【分類號】：R392
【圖文】：

M123456鼠T細胞CD137分子mRNAPT一既R電rophoresisPhotographofRT一PCRabodifferentgrouPofmiee.M:marker鼠T細胞培養(yǎng)上清對正常小鼠T細胞見，亞急性衰老模型小鼠和自然衰老小與正常小鼠T細胞共同培養(yǎng)后72h，正別為35.70k、33.1%、36.9%，各組表6:p州丫玉L目G丫SFS

【參考文獻】

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本文編號：2716024