發(fā)布時(shí)間：2020-06-16 12:12

【摘要】： 目的 建立D-半乳糖致亞急性衰老小鼠模型，利用該模型進(jìn)行衰老免疫學(xué)方面的研究，探討自然衰老小鼠及D-半乳糖致亞急性衰老小鼠模型中，CD137分子在脾臟T細(xì)胞上的表達(dá)和功能變化。 方法 取5周齡BALB／c雄性小鼠，頸背部皮下注射D-半乳糖，分別于造模型后一到五個(gè)月取脾臟淋巴細(xì)胞，同時(shí)取自然衰老小鼠脾臟淋巴細(xì)胞，在培養(yǎng)的第0、24、48、72、96、120、144h收集細(xì)胞，用流式細(xì)胞儀分析脾臟T細(xì)胞CD137的表達(dá)陽(yáng)性率。尼龍棉柱法純化T細(xì)胞，培養(yǎng)，同時(shí)收集各組細(xì)胞培養(yǎng)上清，分別用正常T細(xì)胞培養(yǎng)上清加入衰老T細(xì)胞、衰老T細(xì)胞培養(yǎng)上清加入正常T細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，雙染法檢測(cè)各組細(xì)胞中CD137表達(dá)率與細(xì)胞死亡的關(guān)系。提取總RNA，應(yīng)用RT-PCR方法檢測(cè)CD137的mRNA水平變化。 結(jié)果 (1)D-半乳糖致衰老模型小鼠和自然衰老模型的脾臟T細(xì)胞上CD137分子表達(dá)水平低于正常水平，表達(dá)高峰提前出現(xiàn)，隨后表達(dá)水平下降遲緩。(2)在造模過(guò)程中，亞急性衰老模型小鼠CD137分子表達(dá)水平逐漸降低，分子表達(dá)峰逐漸前移。(3)衰老小鼠T細(xì)胞AICD高于正常水平。(4)衰老小鼠及正常小鼠T細(xì)胞培養(yǎng)上清對(duì)CD137分子表達(dá)水平無(wú)顯著影響。(5)亞急性衰老小鼠模型和自然衰老小鼠CD137分子mRNA低于正常小鼠水平。 結(jié)論(1)D-半乳糖致亞急性衰老小鼠模型T細(xì)胞CD137分子表達(dá)變化規(guī)律與自然衰老小鼠相似，造模兩個(gè)月后的大劑量組小鼠即可用于衰老個(gè)體CD137分子的相關(guān)研究。(2)模型小鼠CD137分子表達(dá)隨衰老的發(fā)生發(fā)展呈規(guī)律性變化，提示該分子可能為T(mén)細(xì)胞衰老的分子標(biāo)志。 （3）即使在衰老狀態(tài)下，機(jī)體對(duì)CD137分于的表達(dá)依然具有調(diào)控作用， 提示兔疫系統(tǒng)的代償能力仍然存在。（4）衰老個(gè)體CD137分于對(duì)T細(xì)胞 的AICD保護(hù)作用降低，提示衰老免疫系統(tǒng)對(duì)CD137分于表達(dá)的調(diào)控范圍 是有限的。（5）衰老小鼠＊細(xì)胞CD137基因的轉(zhuǎn)錄水平下降。（6）衰老 小鼠T細(xì)胞功能的異�？赡苤饕獮榧�(xì)胞受體及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑缺陷所導(dǎo) 致。
【學(xué)位授予單位】：第一軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2002
【分類號(hào)】：R392
【圖文】：

M123456鼠T細(xì)胞CD137分子mRNAPT一既R電rophoresisPhotographofRT一PCRabodifferentgrouPofmiee.M:marker鼠T細(xì)胞培養(yǎng)上清對(duì)正常小鼠T細(xì)胞見(jiàn)，亞急性衰老模型小鼠和自然衰老小與正常小鼠T細(xì)胞共同培養(yǎng)后72h，正別為35.70k、33.1%、36.9%，各組表6:p州丫玉L目G丫SFS

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

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本文編號(hào)：2716024