【摘要】： 目的：鉛在工業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用極廣泛，是常見的生產(chǎn)性毒物和環(huán)境污染物，酒精是常用的有機(jī)溶劑及酒類飲料中的主要成分之一。鉛和乙醇均可對生殖系統(tǒng)產(chǎn)生毒性作用而影響精子質(zhì)量。近來調(diào)查發(fā)現(xiàn)鉛作業(yè)男工多有嗜酒行為，飲酒者發(fā)生鉛中毒的比例較高。但有關(guān)二者對生殖系統(tǒng)聯(lián)合作用的研究較少。另外，硒作為谷胱甘肽過氧化物酶（GSHPx）的主要成分與精子質(zhì)量關(guān)系密切。精子質(zhì)量作為反映雄性生殖能力的主要指標(biāo)，以其簡便易行可靠而廣泛應(yīng)用于臨床和科研。其中精子總數(shù)、精子活動率及精子畸形分別從不同側(cè)面反映了男性的生育力；LDH-x同工酶作為精子能量代謝中的一個關(guān)鍵酶，與精子活力及生育力有關(guān)，LDH-x對男性不育的診斷和發(fā)生原因的研究有重要意義。為此，本研究對鉛和乙醇聯(lián)合作用對小鼠精子質(zhì)量的影響進(jìn)行了研究，，并進(jìn)一步研究了微量元素硒的拮抗作用，為進(jìn)一步揭示鉛和乙醇的生殖毒作用機(jī)理，為男性不育的預(yù)防和治療提供科學(xué)依據(jù)。 方法：取昆明種雄性健康性成熟小鼠84只，體重為25~30g，按體重隨機(jī)分為14組，每組6只，具體分組如下，單獨染毒組：低鉛組(LL)、高鉛組(HL)、低醇組(LE)、高醇組(HE)；聯(lián)合染毒組：低鉛+低醇組、低鉛+ WP=4 高醇組、高鉛+低醇組、高鉛+高醇組；硒干預(yù)組：硒+低鉛+低醇組、硒+低鉛+高醇組、硒+高鉛+低醇組、硒+高鉛+高醇。另設(shè)陰性和陽性對組。醋酸鉛染毒劑量分別為15、30mg/kg體重，乙醇染毒劑量分別為1000、2000mg/kg體重，亞硒酸鈉劑量為1mg/kg體重(于灌胃前1小時腹腔注射)。每天灌胃染毒1次，連續(xù)染毒5天，間歇兩天，連續(xù)3周。陰性對照組給與等量的雙蒸水，陽性對照以40mg/KgＢW的環(huán)磷酰胺腹腔注射，連續(xù)5天。所有動物于首次染毒后第35天斷頸處死，取一側(cè)附睪制備精子懸液，另一側(cè)附睪和睪丸取下立即稱重，記錄睪丸、附睪重量并計算睪丸、附睪的臟器系數(shù)。將孵育15分鐘的精子懸液置于顯微鏡下進(jìn)行精子總數(shù)、活動精子數(shù)的檢查，并推片做伊紅染色和LDH-x組織化學(xué)染色，觀察精子畸形率并根據(jù)酶顯色強(qiáng)度來劃分其分值，計算每只小鼠的LDH-x酶活性積分值。對實驗數(shù)據(jù)用SPSS11.0進(jìn)行統(tǒng)計分析。 結(jié)果: 1.小鼠經(jīng)鉛和乙醇處理后，高劑量組的一般狀況不同程度的受到影響，表現(xiàn)精神萎靡和輕微腹瀉，硒拮抗組與對照組均活動良好。2.各鉛、乙醇單獨染毒組的睪丸重量及臟器系數(shù)與對照組相比均無顯著性差異（P0.05），但高醇和高鉛+高醇組的附睪重量及臟器系數(shù)均顯著低于對照組，說明大劑量鉛和乙醇對小鼠的附睪及臟器系數(shù)的影響大于鉛或乙醇的單獨作用，但不存在協(xié)同作用。硒拮抗組睪丸、附睪重量及臟器系數(shù)與陰性對照組相比均無顯著性差異（P0.05）。3.鉛、乙醇各單獨染毒組與陰性對照相比小鼠精子數(shù)量、精子活力 WP=5 及LDH-x均明顯降低，精子畸形率除低醇組外均顯著增高。而且高劑量組與低劑量組有顯著差異（P0.05）。說明隨著鉛和乙醇染毒劑量的增加，小鼠的精子質(zhì)量表現(xiàn)為下降趨勢。4.鉛和乙醇聯(lián)合染毒組對小鼠精子質(zhì)量的損害加重，表現(xiàn)為小鼠精子計數(shù)、精子活力及LDH-x酶活性強(qiáng)度均顯著降低，精子畸形率增高，和陰性對照組相比具有顯著差異（P0.01）。而且鉛和乙醇聯(lián)合染毒組的精子計數(shù)、精子活力及LDH-x酶活性強(qiáng)度均顯著低于各單獨染毒組（P0.05）。但未觀察到鉛和乙醇對上述指標(biāo)的交互作用，說明鉛和乙醇對上述指標(biāo)的影響可能不存在協(xié)同作用。5.硒拮抗組精子質(zhì)量的各項觀察指標(biāo)與對照組均無顯著性差異（P0.05）；硒拮抗組精子計數(shù)、精子活力及精子LDH-x酶活性強(qiáng)度均顯著高于聯(lián)合染毒組（P0.01），并且有交互作用；亞硒酸鈉也可減輕鉛或/和乙醇所致的精子畸形率的升高，但未發(fā)現(xiàn)交互作用的存在。 結(jié)論：1.鉛和乙醇對小鼠的精子質(zhì)量有損害作用，并隨著劑量的增加損害作用而表現(xiàn)出增強(qiáng)的趨勢。2.鉛和乙醇同時作用時，對小鼠精子質(zhì)量的損害加重，但在本研究劑量范圍內(nèi)未觀察到協(xié)同作用的存在。3.硒可以拮抗鉛和乙醇對雄性生殖系統(tǒng)的損傷，補(bǔ)充硒有助于改善精子質(zhì)量。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2003
【分類號】：R363

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2694198