【摘要】： 阿爾茨海默病(Alzheimer's disease，AD)是一種不可逆的原發(fā)性神經(jīng)退行性疾病，主要表現(xiàn)為進(jìn)行性學(xué)習(xí)、記憶和注意力的喪失。AD的主要病理特征為：腦內(nèi)出現(xiàn)高密度的老年斑(senile plaque，SP)、神經(jīng)微纖維纏結(jié)(neurofibrillary tangles，NFTs)和神經(jīng)元喪失等。據(jù)分析，SP的主要成分是由39-42個氨基酸構(gòu)成的淀粉樣β蛋白(amyloid β protein，AβP)。迄今為止，關(guān)于AβP的神經(jīng)毒作用已有廣泛報(bào)道，如AβP)可影響跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、形成新的跨膜離子通道、引起神經(jīng)細(xì)胞Ca~(2+)超載、以及導(dǎo)致培養(yǎng)的神經(jīng)細(xì)胞死亡等。海馬是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中與學(xué)習(xí)和記憶關(guān)系較為密切的結(jié)構(gòu)之一，也是AD時老年斑聚集的部位之一。海馬的長時程增強(qiáng)(long term potentiation，LTP)是由強(qiáng)直刺激作用于海馬興奮性突觸傳遞通路時所誘發(fā)的一種突觸傳遞效率的長時間增強(qiáng)現(xiàn)象。長期以來，海馬LTP被認(rèn)為是一個重要的反映信息儲存過 山西醫(yī)科大學(xué) 碩士學(xué)位論文2003 程中突觸可塑性的電生理指標(biāo)，與脊椎動物的某種學(xué)習(xí)記憶機(jī)制有關(guān)。 LTP的形成和維持是突觸前和突觸后機(jī)制的聯(lián)合作用，而以突觸后機(jī)制 為主。海馬雙脈沖易化(paired puloe faeilitation，PPF)是由前后兩個刺 激作用于突觸傳遞通路時引起的突觸傳遞的短時間增強(qiáng)現(xiàn)象，也被認(rèn) 為是反映突觸可塑性的指標(biāo)之一，其形成機(jī)制與突觸前神經(jīng)末梢遞質(zhì) 釋放的增加有關(guān)。 考慮到AD時記憶力下降可能與海馬結(jié)構(gòu)的受累有關(guān)，研究ApP 對海馬突觸傳遞尤其是對LTP的影響及作用機(jī)制十分必要。然而，ApP 對海馬LTP的影響及其機(jī)制的探討尚不多，月_存在一些爭議。另外， 在ApP分子中活性序列的研究方面，過去普遍認(rèn)為25一35序列是ApP 毒性作用的關(guān)鍵部分，但有證據(jù)表明更短的31一35片段也具有神經(jīng)毒性 作用，有人還證明將ApP分子組成中的31、33或35號位置上的氨基 酸置換后，ApP分子的毒性作用不再出現(xiàn)。鑒于以上原因和本實(shí)驗(yàn)室 己發(fā)現(xiàn)在神經(jīng)元凋亡、形成新的離子通道、以及影響K十通道的實(shí)驗(yàn)中 A時31一35和ApP25一35有同樣的生物學(xué)效應(yīng)，本實(shí)驗(yàn)采用細(xì)胞外記錄 的方法，以大鼠在體海馬Schaffe:側(cè)枝一CAI錐體細(xì)胞輻射層(schaffor e。llateral/st「atum radiatu，n)這一突jf]蟲傳遞通路上誘導(dǎo)的興奮性突觸后電 位(EPsP)的幅度改變?yōu)橹笜?biāo)，觀察了側(cè)腦室注射人工合成的ApP31一35 和ApP25一35片段對在體條件下以每30秒給予一次的單一電刺激引起 的基礎(chǔ)性EPSPs、在短暫強(qiáng)直刺激后引發(fā)的基礎(chǔ)EPSPs的增大即LTP、 以及雙脈沖弓}起的PPF的影響，以期進(jìn)一步探討ApP在突觸傳遞效率 山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文2003 方面的神經(jīng)毒性作用及其可能機(jī)制，并進(jìn)一步證實(shí)ApP發(fā)揮神經(jīng)毒作 用的最短活性序列。 結(jié)果顯示;(l)在基礎(chǔ)性EPSPS幅度保持穩(wěn)定的基礎(chǔ)上，給予短 串強(qiáng)直刺激(頻率200 Hz，波寬80us，脈沖數(shù)20，，重復(fù)3次，間隔30 秒)后觀察到LTP的出現(xiàn)，如以強(qiáng)直刺激前的EPSPs幅度為100% (n=14)，刺激后立即增加為173.4士6.9%;刺激后15min時達(dá)到最大， 為190.8士7.9%;到刺激后60而n時，EPSPS幅度仍保持在184.5士8.8 %。(2)在腦室注射Zsnmol或50nmol的App31一35或App25一35后 的1h內(nèi)，單個電刺激誘發(fā)的EPSPS與給藥前相比，幅度無明顯變化。 (3)在強(qiáng)直刺激前smin腦室注入50nl二ol的ApP31一35，可觀察到強(qiáng) 直刺激引發(fā)的LTP被顯著抑制，以強(qiáng)直刺激后6Omin時的檢測值為例， 用藥后的LTP值為126.7士5.1%(n=6)，而在不用藥的對照組為184.5 士8.8%(n=14)，差異顯著(P0.05);并且，在同樣實(shí)驗(yàn)程序的情況下 腦室注入相同摩爾濃度的ApP25一35時(n二7)，強(qiáng)直刺激后60min時測 得的LTP測定值為125.5士10，9%，說明兩種膚段對LTP的抑制作用無 明顯差異(P0.05)。(4) ApP31一35對LTP的抑制作用具有劑量依賴 性;例如:在50nmolA日P31一35注入后smin給予強(qiáng)直刺激，其后于smin、 45，nin、60:二in等3個時間點(diǎn)檢測到的LTP分別為1 39.5士12，4%，135.8 士5.3%和126.7士5.1%，各點(diǎn)數(shù)值都比用同樣實(shí)驗(yàn)程序而注入25nmol A即31一35時在各相應(yīng)時間點(diǎn)測得的LTP的數(shù)值(148.7士5.7%，143.0 士6卜3%，142.0士55%)為小，說明大劑量ApP 31一35對LTP的抑制性 山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文2003 為強(qiáng)，又如:在腦室注入25nmol ApP3!一35后lh給予強(qiáng)直刺激，并在 強(qiáng)直刺激后30而n時測定LTP，其值為1262士3.7%(n=5)，而注射 同樣濃度的ApP31一35，只是在注射后smin就給予強(qiáng)直刺激，其后301二in 測得的LTP值為143.5士7.9%(:1二6)，說明后者受到的J:叫同作用較弱。 (5)上述不同劑量的ApP31一35和A日P25一35均對雙刺激引起的易化作 用(PPF)無明顯影響;(6)]Jy腔給予L一型鈣通道拮抗劑VeraPalnil (251二g/kg))舌，不影響App31一35(sonmol)對LTp的抑制效應(yīng)。 以上結(jié)果表明:(l)上述兩種劑量的ApP31一35和ApP25一35均不 影響基礎(chǔ)的突觸傳遞過程，但兩種ApP片段均劑量依賴性抑制LTp; (2)A妙分子中的31一35序列可能是完整ApP分子中更短的具有生物 活性的片段;(3)A日P對LTP的抑制可能主要是通過突觸后機(jī)制，而 不是通過減弱突觸前神
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2003
【分類號】：R33

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 許琳,張均田;突觸長時程增強(qiáng)形成機(jī)制的研究進(jìn)展[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2001年04期

本文編號：2687073