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重組乙型肝炎大S表面抗原-Fc融合蛋白(rLHBs-Fc)的表達和活性檢測

發(fā)布時間:2020-05-23 02:48
【摘要】:乙型肝炎是一種嚴(yán)重危害人類健康的傳染性疾病,有三分之二的慢性感染者會發(fā)展成為肝硬化、肝癌等惡性肝疾患。目前,對HBV的感染主要采用免疫接種的方式來預(yù)防和控制。其中HBsAg是構(gòu)建疫苗的核心成分,但病毒的變異使得現(xiàn)有疫苗對HBV的預(yù)防存在著困難,F(xiàn)在,人們普遍使用α干擾素和拉米夫定等抗病毒藥物對慢性感染病人進行治療,但療效不是很理想。治療性乙肝疫苗有望成為一種廉價,高效的治療方法。因此,人們更多地通過改變抗原構(gòu)成,來提高機體免疫應(yīng)答。本研究構(gòu)建了preS1/preS2/S(‘a(chǎn)’決定簇)與人IgG1 Fc融合基因穩(wěn)定表達載體,旨在通過增加前S抗原來激發(fā)更高的免疫應(yīng)答;而連接的Fc段促進體內(nèi)含有Fc受體的細胞對抗原的遞呈,從而促進T細胞和B細胞的免疫作用。通過對純化的蛋白進行部分生物活性的檢測,結(jié)果表明,rLHBs-Fc蛋白具有一定的抗原性和免疫原性:①各個表位具有抗原性;②采用HRP-羊抗人IgG1(H+L)進行的免疫印跡實驗證實融合蛋白含有IgG1Fc;③免疫的小鼠可以產(chǎn)生特異性抗體。
【圖文】:

電泳圖,測序,載體,電泳


圖1.2PUC19一rLHBs測序載體的電泳測序結(jié)果經(jīng)過與設(shè)計的基因序列aa(219位堿基a一g),,Ser(744位堿比對完全正確,結(jié)果如下(標(biāo)準(zhǔn)圖見附

測序,質(zhì)粒,條帶,位置


圖1.1rLHBsAg基因的PcR擴增產(chǎn)2puC19一rLHBS測序載體的構(gòu)建與鑒定對小量提取的質(zhì)粒pUC19一rLHBs因條帶位置與預(yù)計相符,rLHBS約為8步鑒定酶切正確,送去測序(圖1.2)。左圖M.1.Hi(860b2.質(zhì)洲繃明您陰側(cè)馴
【學(xué)位授予單位】:中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2004
【分類號】:R392

【共引文獻】

相關(guān)期刊論文 前8條

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6 李郁;肝癌膜抗原HAb18G/CD147反義RNA表達載體的構(gòu)建及其抑制腫瘤侵襲作用的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2002年

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本文編號:2677021

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