LEPTIN單克隆抗體的制備及其應(yīng)用性探索
發(fā)布時(shí)間:2020-05-16 22:21
【摘要】: 以重組人leptin作為抗原,利用雜交瘤技術(shù)成功制備了3株鼠抗人leptin McAb,對(duì) 其性質(zhì)進(jìn)行了系統(tǒng)的分析,并對(duì)其在診斷中的應(yīng)用進(jìn)行了初步探索。 3株特異性較好,效價(jià)和親和常數(shù)較高。3株McAb均為IgGl亞類,ELISA檢測(cè)腹水效 價(jià)為10~(-6)~10~(-7),特異性較好,親和常數(shù)(Ka)分別為1.67×10~9L/mol,3.0×10~8L/mol,, 7.5×10~8L/mol。 采用常規(guī)的免疫方法制備了兔抗人leptin多克隆抗體,特性分析表明特異性較好,效 價(jià)較高。經(jīng)DEAE-FF純化后的血清,用過(guò)碘酸納法與辣根過(guò)氧化物酶進(jìn)行了標(biāo)記,方法學(xué) 結(jié)果表明,標(biāo)記后的酶標(biāo)抗體質(zhì)量較好。 以單克隆抗體作為固相抗體,多克隆抗體為酶標(biāo)抗體,建立了一種檢測(cè)人血漿中 leptin的雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附分析方法(ELISA)。此法的靈敏度為16ng/ml,批內(nèi)變 異系數(shù)為8.36%(n=10)批間變異系數(shù)為10.22%(n=5),測(cè)得回收率為92.8~106%。
【學(xué)位授予單位】:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2000
【分類號(hào)】:R392-33
本文編號(hào):2667432
【學(xué)位授予單位】:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2000
【分類號(hào)】:R392-33
【參考文獻(xiàn)】
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1 王小寧,張小剛,馬筠,李文簡(jiǎn),馬賢凱,汪美先;McAb夾心ELISA測(cè)定人IL-2及其影響因素的探討[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;1990年02期
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