【摘要】： 目的：本研究旨在建立一個快速、準確的同種異基因抗原識別的評 價系統(tǒng)，以便對同種移植排斥機理進行深入的研究。 方法：本研究所使用的移植抗原識別模型如下：以混合淋巴細胞培 養(yǎng)為體外同種異基因抗原識別的研究模型，以心肌組織耳廓移植為移植 局部觀察模型，以心肌組織前臂皮下移植為同種異型抗原間接提呈模型， 以分離單個肝細胞腹腔移植為同種異型抗原直接和間接提呈模型。主要 的評價指標為T細胞活化CD69等表面分子和細胞因子的表達。用熒光標 記的單克隆抗體對T細胞表面分子或細胞內(nèi)細胞因子進行雙色或三色免 疫熒光標記，用流式細胞儀進行分析。 結(jié)果：在混合淋巴細胞培養(yǎng)實驗系統(tǒng)里，應(yīng)答細胞培養(yǎng)48小時CD69 和CD25表達百分率均明顯高于對照組，分別為20.65±1.0對7.16± 0.21和40.54±1.87對16.91±0.93；應(yīng)答T細胞IFN-γ等細胞因子的表 同種異基困抗原識別評價系統(tǒng)的研究 中莢文摘要 達百分率也明顯高于對照組，其值為18．65 LI．00對1．Zo t 0．16。與同 基困移植情況相比，耳廓同種異基因心肌組織移植局部免疫炎癥、血管 擴張明顯可見。與同基因移植情況相比，前臂同種異基臥C肌組織移植 48，］、時后腋窩淋巴結(jié)m41細胞和 CDS1細胞表達CD69均見明顯升高。 在移植的同時局部給予弗氏完全佐劑可強化同種異基固抗原刺激T細胞 表達CD69。腹腔同種異基因肝細胞移植可導(dǎo)致腸系膜淋巴結(jié) T細胞CD69 表達增加，而環(huán)胞素A可抑制其表達。用17個針對nR刁叩基因不同片段 編碼蛋白的單克隆抗體分析nR斗叩基因譜，未發(fā)現(xiàn)腹腔同種異基因肝細 胞移植導(dǎo)致腸系膜淋巴結(jié) T細胞的 TCR－Vg基困片段譜出現(xiàn)選擇性取用情 況。 結(jié)論：研究結(jié)果表明，我們已建立了一個新的MLC方法。與傳統(tǒng)的 MLC相比，我們的 MLC方法有以下幾個方面的優(yōu)點：不必使用同位素，耗 時減少，，不必對刺激細胞進行照射等預(yù)處理，在單個細胞水平上反映同 種異型抗原的識別，能在一定的程度上反映同種異型抗原刺激所引發(fā)的 免疫應(yīng)答的模式，而且具有了解不同T細胞亞群同種異型抗原識別和不 同洲C等位基因產(chǎn)物配對識別的潛能。耳廓。G肌移植為很好的研究移植 局部免疫應(yīng)答的模型。前臂組織移植和腹腔細胞移植并觀察引流淋巴結(jié)T 細胞活化對評價藥物及其它免疫干預(yù)作用是十分有用的模型。
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2001
【分類號】：R392

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本文編號：2662976