【摘要】： E-選擇素(E-selectin)是血管內(nèi)皮細(xì)胞特有的粘附分子，僅在活化內(nèi)皮細(xì)胞表面表達(dá)。它在炎癥等許多病理過(guò)程中都具有重要作用。對(duì)于E-selectin表達(dá)及其調(diào)控機(jī)制的研究將有助于相關(guān)疾病的預(yù)防，診斷和治療。我們建立并標(biāo)準(zhǔn)化了腫瘤壞死因子-alpha(TNF-alpha)誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)E-selectin達(dá)峰值的方法，它代表大血管急性炎癥早期階段的體外模型。制備了一株抗臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的單克隆抗體SZ-106，并進(jìn)行了初步鑒定，結(jié)果顯示該株單抗是抗內(nèi)皮細(xì)胞表面分子量為25KD抗原的lgGl亞類(lèi)的單抗。運(yùn)用SZ-106及我室自制的兩株抗體SZ-21，SZ-51對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)E-selectin進(jìn)行干預(yù)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明它們對(duì)HUVEC表達(dá)E-選擇素沒(méi)有影響；同時(shí)觀察了中藥阿魏酸對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞表面E-selectin表達(dá)的影響，結(jié)果示，阿魏酸能夠有效抑制E-selectin的表達(dá)。在SZ-106鑒定過(guò)程中，為了觀察它對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞與基質(zhì)粘附的影響，我們制備了細(xì)胞外基質(zhì)，比較了基質(zhì)存在與否，細(xì)胞粘附率的差別，結(jié)果顯示，基質(zhì)存在時(shí)可以明顯加速細(xì)胞的粘附。運(yùn)用測(cè)定A570nm處虎紅染色細(xì)胞光密度的方法觀察阿魏酸、SZ-106和SZ-21對(duì)HUVEC與基質(zhì)粘附影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明SZ-106及阿魏酸對(duì)HUVEC與基質(zhì)粘附?jīng)]有抑制作用，，而SZ-21可以有效抑制內(nèi)皮細(xì)胞與基質(zhì)的粘附。
【圖文】：

HUV衛(wèi)C接種于培養(yǎng)瓶中4一6h后，大部分己基本貼壁。細(xì)胞呈小多角狀短梭形，逐漸呈魚(yú)貫樣排列，5一7天后融合成單層，呈鋪路卵石或多邊鑲嵌排列(圖1一1)。間接免疫熒光染色，顯示HUVEC胞漿內(nèi)呈熒光陽(yáng)性反應(yīng)(圖1一2)，對(duì)照組則呈陰性反應(yīng)。以上結(jié)果證明培養(yǎng)的細(xì)胞為人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞。

4.McAb相應(yīng)抗原分子量的測(cè)定Westernblot示，McAb能特異性識(shí)別非還原條件下HUVEC表面分子量約25kD的蛋白多膚(見(jiàn)圖2一1)。5.McAb對(duì)E一selectin表達(dá)的影響統(tǒng)計(jì)結(jié)果示該單抗對(duì)E一選擇素的表達(dá)影響沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(見(jiàn)表2一l、圖2一2)。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2002
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 廖健毅;阿魏酸鈉對(duì)體外循環(huán)血管內(nèi)皮功能保護(hù)作用的臨床研究[D];蘇州大學(xué);2010年

本文編號(hào)：2659207