【摘要】： E-選擇素(E-selectin)是血管內(nèi)皮細(xì)胞特有的粘附分子，僅在活化內(nèi)皮細(xì)胞表面表達。它在炎癥等許多病理過程中都具有重要作用。對于E-selectin表達及其調(diào)控機制的研究將有助于相關(guān)疾病的預(yù)防，診斷和治療。我們建立并標(biāo)準(zhǔn)化了腫瘤壞死因子-alpha(TNF-alpha)誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達E-selectin達峰值的方法，它代表大血管急性炎癥早期階段的體外模型。制備了一株抗臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的單克隆抗體SZ-106，并進行了初步鑒定，結(jié)果顯示該株單抗是抗內(nèi)皮細(xì)胞表面分子量為25KD抗原的lgGl亞類的單抗。運用SZ-106及我室自制的兩株抗體SZ-21，SZ-51對內(nèi)皮細(xì)胞表達E-selectin進行干預(yù)實驗，結(jié)果表明它們對HUVEC表達E-選擇素沒有影響；同時觀察了中藥阿魏酸對內(nèi)皮細(xì)胞表面E-selectin表達的影響，結(jié)果示，阿魏酸能夠有效抑制E-selectin的表達。在SZ-106鑒定過程中，為了觀察它對內(nèi)皮細(xì)胞與基質(zhì)粘附的影響，我們制備了細(xì)胞外基質(zhì)，比較了基質(zhì)存在與否，細(xì)胞粘附率的差別，結(jié)果顯示，基質(zhì)存在時可以明顯加速細(xì)胞的粘附。運用測定A570nm處虎紅染色細(xì)胞光密度的方法觀察阿魏酸、SZ-106和SZ-21對HUVEC與基質(zhì)粘附影響，實驗結(jié)果表明SZ-106及阿魏酸對HUVEC與基質(zhì)粘附?jīng)]有抑制作用，，而SZ-21可以有效抑制內(nèi)皮細(xì)胞與基質(zhì)的粘附。
【圖文】：

HUV衛(wèi)C接種于培養(yǎng)瓶中4一6h后，大部分己基本貼壁。細(xì)胞呈小多角狀短梭形，逐漸呈魚貫樣排列，5一7天后融合成單層，呈鋪路卵石或多邊鑲嵌排列(圖1一1)。間接免疫熒光染色，顯示HUVEC胞漿內(nèi)呈熒光陽性反應(yīng)(圖1一2)，對照組則呈陰性反應(yīng)。以上結(jié)果證明培養(yǎng)的細(xì)胞為人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞。

4.McAb相應(yīng)抗原分子量的測定Westernblot示，McAb能特異性識別非還原條件下HUVEC表面分子量約25kD的蛋白多膚(見圖2一1)。5.McAb對E一selectin表達的影響統(tǒng)計結(jié)果示該單抗對E一選擇素的表達影響沒有統(tǒng)計學(xué)意義(見表2一l、圖2一2)。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2002
【分類號】：R329.2

【引證文獻】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 廖健毅;阿魏酸鈉對體外循環(huán)血管內(nèi)皮功能保護作用的臨床研究[D];蘇州大學(xué);2010年

本文編號：2659207