【摘要】： 全面鑒定痢疾桿菌毒力基因?qū)⒂兄谌藗儗υ摬≡姆肿又虏C(jī)制有更加深入的認(rèn)識，，為控制和預(yù)防該病的發(fā)生提供更多手段和途徑。本文用體內(nèi)表達(dá)技術(shù)獲得了痢疾桿菌福氏2a可能與其毒力相關(guān)的基因，包括yphF、wcaJ、dam、alkA、cysG、yaiC、IS600，citC、aroD、CPO198等，通過構(gòu)建相應(yīng)基因的突變體，研究二者之間的關(guān)系。首先，我們用λ噬菌體的Red重組系統(tǒng)初步建立了一套快速敲除痢疾桿菌基因的技術(shù)平臺，通過一系列的實(shí)驗(yàn)成功地敲除了痢疾桿菌alkA基因。但此方法首次在痢疾桿菌中的應(yīng)用，技術(shù)還不夠完善。為了加快實(shí)驗(yàn)進(jìn)度，順利結(jié)束本工作，我們用本實(shí)驗(yàn)室十分成熟的利用宿主本身的RecA重組系統(tǒng)構(gòu)建突變體的方法，對相應(yīng)基因進(jìn)行了研究。構(gòu)建了yphF、wcaJ、dam、alkA、cysG、yaiC、IS600、citC、aroD、cpo198基因的插入突變體。進(jìn)而進(jìn)行Hela細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)和小鼠肺感染實(shí)驗(yàn)分析細(xì)菌競爭性指數(shù)。獲得數(shù)據(jù)顯示多數(shù)基因失活后，其競爭性指數(shù)較低，侵襲能力下降，毒性減弱。這些基因可能與福氏2a痢疾桿菌的毒力相關(guān)。
【圖文】：

大腸桿菌al沁書缺失突變體B假5113028D的PCR鑒定.araeerzaonoeneaeeonuan

菌al沁書缺失突變體B假5113028Dfgenealk從deletionmutantBW2pCRProduet(amPlifiedfromBWmBW25113028D)
【學(xué)位授予單位】：山東師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2003
【分類號】：R346

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本文編號：2628359