發(fā)布時(shí)間：2020-04-15 02:48

【摘要】： 第一部分 人骨髓基質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)及其表型、組分分析 目的 體外培養(yǎng)和擴(kuò)增人骨髓基質(zhì)細(xì)胞，并探討其表型及 細(xì)胞組成。方法 體外靜置貼壁培養(yǎng)和擴(kuò)增人骨髓基質(zhì)細(xì)胞，采用流 式細(xì)胞儀檢測(cè)培養(yǎng)五代的骨髓基質(zhì)細(xì)胞表面抗原CD33、CD34、 CD38、CDw90的表達(dá)情況和細(xì)胞DNA的含量。另外，通過(guò)免疫細(xì) 胞化學(xué)染色技術(shù)檢測(cè)了不同代次兒童骨髓基質(zhì)細(xì)胞的波形纖維蛋白 （Vimentin）、結(jié)蛋白（Desmin）、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-Smooth Muscle Actin）和Ⅷ因子相關(guān)抗原（Von Willebrand Factor）的表達(dá)。結(jié)果 人 骨髓基質(zhì)細(xì)胞體外可培養(yǎng)傳代至第九代。第五代基質(zhì)細(xì)胞S期細(xì)胞含 量?jī)H占16.1％，說(shuō)明其分裂增殖能力已下降；CD33、CD34表達(dá)極低， 說(shuō)明該培養(yǎng)方法所得的第五代細(xì)胞基本無(wú)造血細(xì)胞。另外，Vimentin 在傳代過(guò)程中的表達(dá)水平逐漸下降，Desmin、α-Smooth Muscle Actin 單克隆抗體和Von Willebrand Factor抗體染色呈陰性。結(jié)論 本文中的 骨髓基質(zhì)細(xì)胞來(lái)源于間充質(zhì)細(xì)胞，并不含血管內(nèi)皮細(xì)胞；骨髓基質(zhì)細(xì) 胞的組成和表型與體外培養(yǎng)條件有關(guān)。 第二部分 不同發(fā)育階段的人骨髓基質(zhì)細(xì)胞對(duì)多種病毒的敏感性 探討不同發(fā)育階段的人骨髓基質(zhì)細(xì)胞對(duì)多種病毒的敏感 性。方法 采用靜置貼壁培養(yǎng)法，體外長(zhǎng)期培養(yǎng)了胎兒、兒童和成人 骨髓基質(zhì)細(xì)胞，并將傳至5代以上的骨髓基質(zhì)細(xì)胞采用微量細(xì)胞病變 （CPE）法，開展了對(duì)5種病毒的敏感性試驗(yàn)。結(jié)果 人骨髓基質(zhì)細(xì) 胞對(duì)濾泡性口腔炎病毒（VSV），脊髓灰質(zhì)炎病毒（Poliov）、Ⅰ型和Ⅱ 型單純皰疹病毒（HSVⅠ、Ⅱ）均敏感，能產(chǎn)生明顯的CPE，其效價(jià) （TCID_(50)）可達(dá)10~(-3)—10~(-4)，其中胎兒骨髓基質(zhì)細(xì)胞對(duì)病毒敏感性至少比 兒童高2倍，比成人高4倍，，即胎兒＞兒童＞成人，但對(duì)B_3型柯薩奇 病毒均不敏感。結(jié)論 人骨髓基質(zhì)細(xì)胞對(duì)VSV、Poliov、HSV-Ⅰ和
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2001
【分類號(hào)】：R392.12

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本文編號(hào)：2628040