【摘要】： 第一部分 人骨髓基質(zhì)細胞的體外培養(yǎng)及其表型、組分分析 目的 體外培養(yǎng)和擴增人骨髓基質(zhì)細胞，并探討其表型及 細胞組成。方法 體外靜置貼壁培養(yǎng)和擴增人骨髓基質(zhì)細胞，采用流 式細胞儀檢測培養(yǎng)五代的骨髓基質(zhì)細胞表面抗原CD33、CD34、 CD38、CDw90的表達情況和細胞DNA的含量。另外，通過免疫細 胞化學染色技術檢測了不同代次兒童骨髓基質(zhì)細胞的波形纖維蛋白 （Vimentin）、結蛋白（Desmin）、α-平滑肌肌動蛋白（α-Smooth Muscle Actin）和Ⅷ因子相關抗原（Von Willebrand Factor）的表達。結果 人 骨髓基質(zhì)細胞體外可培養(yǎng)傳代至第九代。第五代基質(zhì)細胞S期細胞含 量僅占16.1％，說明其分裂增殖能力已下降；CD33、CD34表達極低， 說明該培養(yǎng)方法所得的第五代細胞基本無造血細胞。另外，Vimentin 在傳代過程中的表達水平逐漸下降，Desmin、α-Smooth Muscle Actin 單克隆抗體和Von Willebrand Factor抗體染色呈陰性。結論 本文中的 骨髓基質(zhì)細胞來源于間充質(zhì)細胞，并不含血管內(nèi)皮細胞；骨髓基質(zhì)細 胞的組成和表型與體外培養(yǎng)條件有關。 第二部分 不同發(fā)育階段的人骨髓基質(zhì)細胞對多種病毒的敏感性 探討不同發(fā)育階段的人骨髓基質(zhì)細胞對多種病毒的敏感 性。方法 采用靜置貼壁培養(yǎng)法，體外長期培養(yǎng)了胎兒、兒童和成人 骨髓基質(zhì)細胞，并將傳至5代以上的骨髓基質(zhì)細胞采用微量細胞病變 （CPE）法，開展了對5種病毒的敏感性試驗。結果 人骨髓基質(zhì)細 胞對濾泡性口腔炎病毒（VSV），脊髓灰質(zhì)炎病毒（Poliov）、Ⅰ型和Ⅱ 型單純皰疹病毒（HSVⅠ、Ⅱ）均敏感，能產(chǎn)生明顯的CPE，其效價 （TCID_(50)）可達10~(-3)—10~(-4)，其中胎兒骨髓基質(zhì)細胞對病毒敏感性至少比 兒童高2倍，比成人高4倍，，即胎兒＞兒童＞成人，但對B_3型柯薩奇 病毒均不敏感。結論 人骨髓基質(zhì)細胞對VSV、Poliov、HSV-Ⅰ和
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2001
【分類號】：R392.12

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本文編號：2628040