【摘要】： 5-羥色胺（5-HT）是一種具有復(fù)雜功能的神經(jīng)遞質(zhì)，在中樞主要發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用，而 在外周主要促進(jìn)傷害性信息的傳遞。5-HT的作用通過其眾多的受體亞型介導(dǎo)。迄今 為止，已發(fā)現(xiàn)5-HT受體的7種類型14種亞型。由于缺乏針對每一種亞型的特異性抗 體、激動劑和拮抗劑，使得對5-HT受體在外周的分布及其機(jī)能的研究受到限制，而 且已有的結(jié)果之間也存在很大分歧。脊髓背根節(jié)（DRG）、三叉神經(jīng)節(jié)（TG）均屬于 感覺神經(jīng)節(jié)，這些神經(jīng)節(jié)中的感覺神經(jīng)元的中樞突分別終止于脊髓背角淺層和三叉神 經(jīng)脊束核尾側(cè)亞核淺層，而周圍突則分布于外周組織。一般認(rèn)為DRG、TG神經(jīng)元合 成蛋白后運(yùn)輸至中樞突和周圍突的末梢。因此通過觀察某種神經(jīng)活性物質(zhì)或受體在 DRG、TG的存在狀況，可以間接地判斷其在中樞突及周圍突末梢的分布情況。 組織損傷和炎癥時，5-HT從血小板和肥大細(xì)胞中釋放出來，參與傷害性感受器 的活化，使之對病理性刺激的敏感性增加。迄今為止，關(guān)于5-HT受體亞型在外周參 與傷害性信息傳遞的研究還較少。以往的研究表明，持續(xù)的外周傷害性刺激可導(dǎo)致 DRG神經(jīng)元發(fā)生顯著的表性改變，如神經(jīng)元中神經(jīng)肽及受體的表達(dá)變化，以此可推 測神經(jīng)肽或受體在傷害性感受中的可能作用。但對于傷害性刺激條件下，DRG中5-HT 受體各亞型表達(dá)的變化還缺乏研究。 本論文采用反轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）法和原位雜交法，系統(tǒng)地檢測了大鼠DRG和 甲口旱巨大學(xué)刃士學(xué)位論土 TG中5－HT受體亞型的分布，并采用RT－PCR法觀察大鼠后爪注射完全弗氏佐劑 （complete Freud’s adjuvanL CFA）后 DRG中 5－HT受體亞型表達(dá)的變化。 一．5－HT受體亞型在大鼠感覺神經(jīng)節(jié)中的分布 RT－PCR檢測到DRG中存在5－HTI＾、5－HTIB、5－HTID、5－HTZA、5－HT3、5－HT4 和5－HT7受體亞型。采用LabW。rks軟件對各陽性條帶密度進(jìn)行分析，結(jié)果顯示5－HTID 和5－HT3受體亞型條帶密度最高，5－HTIB和5－HTZA受體亞型次之，5－HT4、5－HTI＾ 和5－HT7受體亞型則較弱：在TG中表達(dá)的陽性條帶與DRG中的相似，但以5－HT3 和5－HTID受體亞型條帶密度最高，5－HTI＾和5－HT4受體亞型次之，而5－HT7、5－HTZA 和5－HT，。受體亞型較弱。原位雜交實驗結(jié)果與RT－PCR結(jié)果基本一致，在TG和DRG 中均觀察到了5－HTI＾、5－HT：B、5－HT。、5－HTZ＾、5－HT3、5－HT4、5－HT7受體亞型 mRNA陽性神經(jīng)元。但兩種神經(jīng)K內(nèi)同一受體亞型mRNA RJ性神經(jīng)元的數(shù)量不同，， 同一神經(jīng)節(jié)表達(dá)各受體亞型mRNA的陽性神經(jīng)元數(shù)量也存在差異，與PCR的半定量 結(jié)果基本一致。光鏡下觀察到，m性神經(jīng)元直徑不等，但以中（26－35 Pm）、小型（＜ 25卜m）神經(jīng)元為主。 二．CFA致炎后5－HT受體亞型表達(dá)的變化 在大鼠后爪足底注射CFA，所有注射側(cè)均表現(xiàn)出炎性反應(yīng)并伴隨有紅斑和水腫。 注射后4天，炎癥反應(yīng)、水腫達(dá)到最高程度，縮足反射潛伏朋也明顯縮短。采用RT－PCR 法觀察4天后DRG中5－HT受體亞型mRNA的表達(dá)變化。結(jié)果顯示注射CFA側(cè)DRG 中5－HT，＾、5－HT．B、5－HTZA、5－HT3、5－HT4和5－HT7受體亞型mRNA的表達(dá)與對側(cè) 及對照組大鼠相比明顯上調(diào)（FA注射還誘導(dǎo)出5－HTIF和5－HTZC受體亞型iRNA在 DRG中的表達(dá)，而5－HTID受體亞型iRNA的表達(dá)沒有明顯變化。在CFA注射側(cè)DRG 中沒有檢測到5－HTZB、5－HTS＾、5－HTSB和5－HT6受體亞型的mRNA。 本論文的結(jié)果說明在大鼠DRG、TG中存在5－HTI＾、5－HTIB、5－HTID、5－HTZA、 5－HT。、5－HT。和5－HT，受體亞型。原位雜交結(jié)果顯示大多數(shù)陽性神經(jīng)元屬于中、小型 4 冗四罩巨大岑用士攀位論x 神經(jīng)元，提示它們可能在傷害性感受中發(fā)揮作用。CFA注射導(dǎo)致外周炎性條件下， DRG中的5－HT受體亞型的表達(dá)出現(xiàn)了不同程度的變化，提示這些受體亞型在外周傷 害性信息的傳遞或調(diào)控方面可能起重要作用。上述結(jié)果為進(jìn)一步研究5－HT受體各亞 型在外周傷害性感受或調(diào)控中的作用和機(jī)制提供了依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2001
【分類號】：R338

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：2620737